山西省晉城市食品藥品檢驗所，山西 晉城 048000

止眩膠囊由丹參、當歸、延胡索、雞血藤、莪術、蒲公英、石決明、薏苡仁、夏枯草、澤瀉、續(xù)斷、桃仁、醋三棱、川芎等14味藥物組成，具有活血化瘀、通脈止眩等功效，適用于原發(fā)性高血壓。該膠囊為醫(yī)院制劑，原有質量標準較低，不能全面反映制劑質量狀況，為更好地控制該制劑的內在質量，提高標準，擬增加含量測定等內容，方中以丹參為君藥，走血分、通血脈，攻擅活血化瘀，現(xiàn)代醫(yī)學研究表明，丹參具有擴張冠狀動脈，增加冠狀血流量，促進毛細管血管網(wǎng)開放，擴張血管等作用[1]?；诖?，筆者選擇丹參作為控制指標，建立了其有效成分丹酚酸B的含量測定方法。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Waters 2695高效液相色譜儀(2998二極管陣列檢測器，美國Waters)；AUW120D型電子分析天平(日本島津)；BRANSONIC 超聲波清洗機(美國BRANSON)；Medium-s300超純水器(四川優(yōu)普超純科技有限公司)。

1.2 材料 丹酚酸B對照品(批號：111562-201514，中國食品藥品檢定研究院)；止眩膠囊(批號：180101、180102、180103，自制)；乙腈為色譜純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對照品溶液的制備 精密稱取丹酚酸B對照品1.85 mg，置10 mL棕色量瓶中，加75%甲醇至刻度，搖勻，制得每1 mL含0.185 mg的溶液，即得。

2.1.2 供試品溶液的制備 取本品內容物1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率150 W，頻率40 kHz)30 min，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，取續(xù)濾液，即得。

2.1.3 陰性對照溶液的制備按處方比例依法配制除丹參以外的陰性制劑，精密稱取適量，按“2.1.2”項下方法制備陰性對照溶液。

2.2 色譜條件 色譜柱：Waters xterra C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動相：甲醇乙腈(3∶1)-1.0%甲酸溶液(34∶66)；檢測波長：286 nm；流速：1 mL/min；進樣量：10 μL。

2.3 含量測定方法學考察

2.3.1 專屬性試驗 分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液各10 μL，注入液相色譜儀中，記錄色譜圖(如圖1所示)。試驗表明，陰性對照溶液的色譜峰中，在丹酚酸B對應的位置上無干擾，專屬性較強。

2.3.2 線性關系的考察 精密量取“2.1.1”項下對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0 mL至2 mL量瓶中，用75%甲醇定容，得不同濃度對照品溶液，分別進樣10 μL，測定峰面積積分值，以峰面積積分值為縱坐標，進樣量ng為橫坐標作圖，得一直線回歸方程：Y=1 102.1X-58097，r=0.999 9，表明丹酚酸B在進樣量92.5～1 850 ng范圍內與峰面積呈良好的線性關系。

2.3.3 精密度試驗 取“2.1.1”項下對照品溶液，進樣10 μL，連續(xù)進樣6次，測定峰面積。結果丹酚酸B峰面積積分值RSD值為0.58%(n=6)，表明儀器的精密度良好。

2.3.4 重復性試驗 取批號180101的止眩膠囊樣品，稱取6份，精密稱定，按“2.1.2”項下方法制備溶液，測定峰面積積分值，計算平均含量為5.18 mg/g，RSD值為0.49%(n=6)。表明本方法重復性良好。

2.3.5 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液，在室溫下放置，于0、2、4、6、8、10 h分別進樣10 μL，并測定峰面積，結果RSD為1.32%(n=6)。表明供試品溶液在10 h內基本穩(wěn)定。

2.3.6 加樣回收率試驗 精密稱取已知含量的樣品(批號180101：5.18 mg/g)6份，分別精密加入丹酚酸B對照品適量，按“2.1.2”項下方法制備溶液，測定，計算回收率。結果見表1。

表1 丹酚酸B加樣回收率試驗結果

2.4 樣品含量測定 取不同批號止眩膠囊3批(批號：180101、180102、180103)，按“2.1.2”項下方法制備溶液，進樣測定，記錄峰面積，計算樣品中丹酚酸B的含量，分別為5.18 mg/g、5.20 mg/g、5.16 mg/g。

3 討論

丹參為本處方的君藥，丹酚酸B為丹參的主要有效成分[2-3]，故選擇丹酚酸B作為控制本品質量的指標成分。

在流動相的選擇上，考察了乙腈-0.1%磷酸溶液(22∶78)[2]，乙腈-甲醇-甲酸-水(10∶30∶1∶59)[3]和甲醇：乙腈(3∶1)-1.0%甲酸溶液(34∶66)的流動相體系，通過比較出峰時間、峰形、拖尾因子、分離度等，選擇甲醇乙腈(3∶1)-1.0%甲酸溶液(34∶66)為本方法的流動相體系。

在提取溶劑及提取方式的選擇上，考察了不同的提取溶劑(70%乙醇[2]、75%甲醇[4]、甲醇[5])以及提取方式(加熱回流、超聲處理、索氏提取)對所測組分提取效果的影響，綜合考慮提取率以及操作的便捷性，確定提取方式為75%甲醇超聲處理30 min。

上述三批止眩膠囊中丹酚酸B含量測定來看，結果重現(xiàn)性較好，表明本文所建立的方法適用于該制劑的質量控制，對于原藥材、飲片的選擇，制劑的生產，存儲環(huán)境的控制以及有效期的考察等方面可以起到數(shù)據(jù)支撐的作用。