韓寧寧，戴 青，于麗娜，楊秀玉，趙 暉

(中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京海淀 100081)

實(shí)驗(yàn)室間能力比對(duì)是利用實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)來確定實(shí)驗(yàn)室能力的活動(dòng)，實(shí)際上它也是為確保實(shí)驗(yàn)室維持較高的校準(zhǔn)和檢測(cè)水平而對(duì)其能力進(jìn)行考核、監(jiān)督和確認(rèn)的一種驗(yàn)證活動(dòng)[1]。通過比對(duì)，可評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室是否具有勝任其所從事的檢測(cè)的工作能力，亦可補(bǔ)充加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的質(zhì)量控制程序。另外，能力比對(duì)驗(yàn)證結(jié)果和評(píng)價(jià)也為實(shí)驗(yàn)室的評(píng)審和認(rèn)證提供重要依據(jù)。根據(jù)《農(nóng)業(yè)部關(guān)于印發(fā)〈2017年獸藥質(zhì)量監(jiān)督抽檢計(jì)劃〉的通知》(農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2017〕2號(hào))[2]要求，為進(jìn)一步加強(qiáng)獸藥檢測(cè)機(jī)構(gòu)能力建設(shè)，確保獸藥檢驗(yàn)質(zhì)量，中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所于2017年5月～6月組織開展了抗生素微生物檢定法(管碟法)測(cè)定安普霉素含量能力比對(duì)。

1 材料與方法

1.1 比對(duì)項(xiàng)目 本次比對(duì)的考核項(xiàng)目為抗生素微生物檢定法(管碟法)測(cè)定安普霉素含量。

1.2 參加單位 本次比對(duì)原則上要求省級(jí)獸藥檢驗(yàn)單位必須參加，同時(shí)歡迎各地市級(jí)獸藥檢驗(yàn)單位及獸藥生產(chǎn)企業(yè)的參加。本次比對(duì)參加單位有省級(jí)獸藥檢驗(yàn)單位29家，獸藥生產(chǎn)企業(yè)3家。西藏自治區(qū)獸藥監(jiān)察所、吉林省獸藥飼料檢驗(yàn)監(jiān)測(cè)所及天津市獸藥飼料監(jiān)察所由于各自原因，未參加本次能力比對(duì)。

1.3 比對(duì)方法 本次比對(duì)的試驗(yàn)方法參照《中國獸藥典》2015年版一部 硫酸安普霉素的含量測(cè)定方法[3]。上述標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定“按干燥品計(jì)算，每1 mg的效價(jià)不得少于550安普霉素單位”。但是考慮到干燥失重消耗樣品量較多，且將干燥失重的測(cè)量結(jié)果代入含量測(cè)定的計(jì)算會(huì)增加整體檢驗(yàn)過程的不確定度，因此在作業(yè)指導(dǎo)書中要求各參加單位按照濕品含量報(bào)送結(jié)果。

1.4 比對(duì)樣品 本次能力比對(duì)提供2支安普霉素樣品，均為棕色安瓿包裝，每支裝量約200 mg。同時(shí)提供1支安普霉素標(biāo)準(zhǔn)品，來源/批號(hào)為中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所/K0231610?？紤]到由于季節(jié)因素吸濕會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，要求樣品及標(biāo)準(zhǔn)品均開封后立即使用，且僅供一次使用?？紤]到參加單位需進(jìn)行一次效價(jià)估值測(cè)定及一次正式試驗(yàn)測(cè)定，故提供2支安普霉素樣品。

1.5 評(píng)定方法及標(biāo)準(zhǔn) 本次能力比對(duì)統(tǒng)計(jì)分析采用中位值和標(biāo)準(zhǔn)化四分位距法，即采用穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)的中位值作為指定值，標(biāo)準(zhǔn)化四分位距(NIQR)為變動(dòng)性度量值，計(jì)算各參加單位結(jié)果的Z比分?jǐn)?shù)(Z值)。以Z比分?jǐn)?shù)(包括實(shí)驗(yàn)室間Z比分?jǐn)?shù)ZB和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)Z比分?jǐn)?shù)ZW)評(píng)價(jià)參加單位的結(jié)果，即：若|Z|≤2，檢測(cè)結(jié)果為滿意結(jié)果；若2<|Z|<3，檢測(cè)結(jié)果為有問題；若|Z|≥3，檢測(cè)結(jié)果為不滿意結(jié)果或離群值。各統(tǒng)計(jì)量的意義及相關(guān)計(jì)算方法參見CNAS GL02：2014《能力驗(yàn)證結(jié)果的統(tǒng)計(jì)處理和能力評(píng)價(jià)指南》[4]。

2 結(jié)果

參加能力比對(duì)的32家單位均在規(guī)定時(shí)間內(nèi)報(bào)送了檢測(cè)結(jié)果。在Z比分?jǐn)?shù)的統(tǒng)計(jì)中，有27家的結(jié)果為滿意，有3家的結(jié)果有問題，2家的結(jié)果為不滿意，各占總數(shù)的84.4%、9.4%、6.2%。其中，代碼為15和16的2個(gè)單位 2<|ZW|<3，即實(shí)驗(yàn)室內(nèi)2個(gè)結(jié)果之間差異較大；代碼為25的單位2<|ZB|<3，代碼為19和28的2個(gè)單位|ZB|≥3，即實(shí)驗(yàn)室提供的2個(gè)結(jié)果與中位值差異較大。具體結(jié)果參加表1。

表1 各參加單位的檢測(cè)結(jié)果和統(tǒng)計(jì)結(jié)果

續(xù)表

注：標(biāo)“§”的為不滿意結(jié)果；標(biāo)“*”的為有問題結(jié)果

3 分析

影響抗生素微生物檢定法(管碟法)定量結(jié)果準(zhǔn)確性的因素主要包括：實(shí)驗(yàn)員操作技能、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、培養(yǎng)基制備、檢驗(yàn)用菌、濃度比的正確計(jì)算等。經(jīng)審核32個(gè)參加單位提交的記錄與報(bào)告，發(fā)現(xiàn)問題如下：

3.2 無原因刪除菌碟 在使用效價(jià)測(cè)量儀測(cè)量菌碟并進(jìn)行計(jì)算的過程中，除非有抗生素藥液濺出鋼管、鋼管被碰移位或碰倒等明顯原因，一般不刪除菌碟，尤其不能為使平行測(cè)定結(jié)果偏差小而人為刪除菌碟。如有刪除，應(yīng)說明原因。在鋪菌碟的過程中，2組供試品的菌碟數(shù)一般一致。但經(jīng)審閱參加單位的原始記錄發(fā)現(xiàn)，代碼為01、04、07、08、11、27的6家單位2組菌碟數(shù)目不一致，也沒有說明原因。尤其是代碼為07的單位一組菌碟數(shù)為8個(gè)，另一組菌碟數(shù)為5個(gè)，不太正常。代碼為06的單位雖在記錄中體現(xiàn)出所做碟數(shù)與參與統(tǒng)計(jì)碟數(shù)不同，但并未說明原因。

3.3 抑菌圈直徑超出范圍 《中國獸藥典》2015年版一部附錄抗生素微生物檢定法[3]規(guī)定，二劑量法的標(biāo)準(zhǔn)品高劑量組抑菌圈直徑應(yīng)為18～22 mm。代碼為10、25的2家單位有標(biāo)準(zhǔn)品高劑量組抑菌圈直徑不在此范圍內(nèi)的菌碟。

3.4 天平室的溫濕度無記錄或超范圍 使用天平進(jìn)行稱量的過程應(yīng)對(duì)天平室的溫濕度進(jìn)行控制，以防止樣品吸潮、靜電等現(xiàn)象出現(xiàn)，影響稱量的準(zhǔn)確性。代碼為03、04、12、14、22、23、24的7家單位在記錄中未體現(xiàn)天平室的溫濕度。代碼為27的單位天平室溫度為30 ℃，超出15 ℃～28 ℃的常規(guī)控制范圍。

3.5 修約進(jìn)位錯(cuò)誤 本次能力比對(duì)要求結(jié)果1與結(jié)果2均保留至小數(shù)點(diǎn)后1位。如效價(jià)測(cè)量儀出具的報(bào)告結(jié)果保留位數(shù)多于小數(shù)點(diǎn)后1位，應(yīng)按照修約規(guī)則進(jìn)舍至規(guī)定的位數(shù)。代碼為02的單位在記錄中有修約的進(jìn)位錯(cuò)誤。

3.6 統(tǒng)計(jì)方法的缺陷 本次能力比對(duì)大部分單位提交的結(jié)果1與結(jié)果2之間的差異小于2個(gè)效價(jià)單位，導(dǎo)致體現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)差異的D值分布比較集中，標(biāo)準(zhǔn)化四分位距偏小，進(jìn)而導(dǎo)致雖然代碼為15與16的2家單位結(jié)果1與結(jié)果2之間的相對(duì)偏差均僅為0.7%，計(jì)算出的ZW值仍均超出滿意范圍。

4 總結(jié)

本次省級(jí)獸藥檢驗(yàn)單位能力比對(duì)總體結(jié)果理想。相較于2011年我所組織的相同考核項(xiàng)目的能力比對(duì)而言，結(jié)果滿意率由71%提升至84%，說明各參加單位對(duì)自身檢測(cè)能力的重視及技術(shù)水平的提升。當(dāng)然，比對(duì)過程中也發(fā)現(xiàn)各參加單位對(duì)抗生素微生物檢定法的掌握能力不盡相同，某些單位試驗(yàn)及計(jì)算過程中仍存在上述問題。結(jié)果不滿意的單位應(yīng)結(jié)合自身檢驗(yàn)過程，查找不滿意原因，從人員培訓(xùn)、環(huán)境改進(jìn)、方法優(yōu)化等不同角度進(jìn)行整改。