徐雅萍，邱寒峰，吳 婷，張柳燕，嚴 羽，沈躍順，俞乾挺，翟漢平，朱坤興

(1.浙江省桐鄉(xiāng)市動物疫病預(yù)防控制中心，浙江桐鄉(xiāng)314500 ； 2.浙江省桐鄉(xiāng)市畜牧獸醫(yī)局，浙江桐鄉(xiāng)314500)

小反芻獸疫和羊痘都是我國一類動物疫病，是當前危害湖羊養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要疾病。目前，疫苗免疫仍是防控小反芻獸疫和羊痘最有效的方法[1-3]。根據(jù)周邊地區(qū)傳染病的流行情況，浙江省桐鄉(xiāng)市要求對湖羊口蹄疫、小反芻獸疫和羊痘3種疫病實行強制免疫，并取得了不錯的防疫效果。近年來，桐鄉(xiāng)市湖羊存欄18萬頭左右，以中小規(guī)模養(yǎng)殖為主，過多的強制免疫項目，增加了基層動物防疫工作量，浪費人力、物力，還會增加動物應(yīng)激，直接影響動物防疫水平。據(jù)研究報道，關(guān)于2種疫苗同時注射運用在豬病防控上的成功案例已有不少，如豬瘟疫苗和豬偽狂犬病疫苗[4]，豬瘟疫苗和豬圓環(huán)病毒疫苗[5]。為了探索和創(chuàng)新動物免疫新方法，進一步提升防疫工作效率，特開展本次湖羊小反芻獸疫和羊痘疫苗分點同時注射和混合一針注射的免疫對比試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 浙江省桐鄉(xiāng)市某規(guī)模湖羊場選擇120日齡以上未進行過疫苗免疫注射的健康湖羊32頭，隨機分成2組，試驗組16頭，對照組16頭。

1.2 疫苗及主要試劑 小反芻獸疫活疫苗(批號：2016001-2)，購自新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司；山羊痘活疫苗(批號：201601)，購自遼寧益康生物股份有限公司。小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測試劑盒，購自中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心。羊痘抗體ELISA檢測試劑盒，購自蘭州獸醫(yī)研究所。

1.3 免疫及抗體監(jiān)測方案 試驗組小反芻、羊痘疫苗采用一針注射完成，將500頭份小反芻獸疫疫苗和500頭份羊痘疫苗一起溶于生理鹽水中，定容到500 mL，尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射1 mL/頭；對照組則采用分點同時注射法，小反芻獸疫疫苗頸部皮下注射，羊痘疫苗尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射，注射劑量相同。分別于免疫后7、14、28、70、210 d經(jīng)頸靜脈采血，分離血清，檢測及分析抗體水平和免疫合格率。

1.4 臨床不良反應(yīng)觀察 所有試驗羊在免疫注射后連續(xù)觀察7 d，主要觀察羊只的精神狀況、采食、飲水、體溫是否正常以及是否有其他嚴重不良反應(yīng)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 檢測數(shù)據(jù)按接種疫苗的種類進行分類統(tǒng)計，小反芻獸疫和羊痘均以抗體陽性率表示，采用SPSS統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析，以P<0.05和P>0.05 表示為差異顯著和差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 臨床觀察 試驗羊在免疫注射后連續(xù)觀察7 d，均未出現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)。

2.2 小反芻獸疫抗體檢測分析 免疫后7、14、28、70、210 d分別采血進行小反芻獸疫抗體檢測，結(jié)果顯示，試驗組和對照組在免疫后7 d抗體合格率分別達到93.75%和100%，之后抗體一直維持在較高水平，28 d后有緩慢下降趨勢，直至免疫后7個月，試驗組和對照組的抗體合格率都仍在85%以上，同為87.5% (表1)，2組之間小反芻獸疫抗體合格率差異不顯著(P>0.05)。

表1 PPR抗體水平監(jiān)測結(jié)果

2.3 羊痘抗體檢測分析 免疫后7、14、28、70、210 d分別采血進行羊痘抗體檢測，結(jié)果顯示,試驗組和對照組在免疫后7 d抗體合格率分別達到87.5%和100%，之后試驗組有一個上升趨勢，28 d時抗體合格率達到100%，而對照組抗體合格率一直維持100%，28 d后2組都呈現(xiàn)緩慢下降趨勢，直至免疫后7個月，試驗組和對照組的抗體合格率分別為75%和81.25% (表2)，2組之間羊痘抗體合格率差異不顯著(P﹥0.05)。

表2 Qrf抗體水平監(jiān)測結(jié)果

3 討論

本試驗的試驗動物是120日齡以上未進行過疫苗免疫注射的健康湖羊，避免了免疫抗體的影響，同時也排除了母源抗體的干擾。試驗結(jié)果表明，小反芻獸疫疫苗和羊痘疫苗混合尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射組與單苗分點注射組相比，無明顯不良反應(yīng)，臨床癥狀差異不顯著。從免疫后7 d到免疫后7個月，小反芻獸疫和羊痘抗體合格率都在75%以上，達到了群體合格率 70%以上的合格標準，與對照組相比抗體的產(chǎn)生時間和抗體合格率都沒有顯著差異，同時可以節(jié)省人力、物力，減少湖羊免疫應(yīng)激。通過綜合分析，“小反芻獸疫和羊痘疫苗混合一針注射”的免疫操作程序可在實際工作中推廣運用。

考慮到尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射存在一定難度，在操作上具有一定的技術(shù)要求，而有研究表明，山羊痘疫苗尾根內(nèi)側(cè)皮下注射的免疫效果并不比皮內(nèi)注射差[6]，因此，還可以進一步開展小反芻獸疫疫苗和羊痘疫苗混合尾根內(nèi)側(cè)皮下注射的試驗研究，尋找更優(yōu)的免疫方法。