鄧呂紅 譚鋼 鄭浩 唐九豐

[摘要] 目的 分析載脂蛋白E基因（APOE）多態(tài)性預(yù)測年齡相關(guān)性黃斑變性（age-related macular degeneration，AMD）玻璃體內(nèi)康柏西普注射療效的價值。 方法 選取2016年10月～2018年4月于我院經(jīng)FFA和OCT確診的年齡相關(guān)性黃斑變性患者76眼作為研究對象。所有患眼均每月接受10 mg/mL康柏西普玻璃體內(nèi)注射0.05 mL，注射后每月隨訪1次，連續(xù)注射3個月，比較注射前和注射后1、2、3個月患者的最佳視力（best corrected visual acuity，BCVA）、黃斑中心凹視網(wǎng)膜厚度（central macular thickness，CMT）以及不同APOE等位基因分型療效。 結(jié)果 治療前BCVA為（50.36±9.84），治療后1、2、3個月的BCVA為（70.18±11.07）、（72.22±12.06）和（70.31±12.39），與治療前相比均明顯提高（P<0.05）。治療前CMT為（465.23±79.82）μm，治療后1、2、3個月的CMT為（268.31±94.13）μm、（259.21±82.09）μm和（259.42±81.35）μm，與治療前相比均明顯降低（P<0.05）。根據(jù)不同基因分型分析，與APOEε3相比，APOEε4和APOEε2型的患者BCVA明顯較高，CMT明顯較低（P均<0.05），而APOEε2和APOEε4型患者的BCVA和CMT無明顯差異（P>0.05）。 結(jié)論 玻璃體內(nèi)康柏西普注射療效治療年齡相關(guān)性黃斑變性療效顯著，APOEε4和APOEε2型的患者療效更佳，APOE分型可為康柏西普治療AMD提供指導(dǎo)。

[關(guān)鍵詞] APOE;多態(tài)性;黃斑變性;康柏西普

[中圖分類號] R774.5 ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B ? ? ? ? ?[文章編號] 1673-9701（2019）08-0077-03

[Abstract] Objective To analyze the value of apolipoprotein E gene （APOE） polymorphism in predicting the efficacy of intravitreal Conbercept injection in age-related macular degeneration（AMD）. Methods A total of 76 eyes of age-related macular degeneration patients diagnosed by FFA and OCT in our hospital from October 2016 to April 2018 were selected as subjects. All eyes received a monthly injection of 10 mg/mL Conbercept intravitreal injection of 0.05 mL， followed by monthly injections for 3 months. The best corrected visual acuity （BCVA）， central macular thickness （CMT） and different APOE allele genotyping effects before and at 1， 2， and 3 months after injection were compared. Results The BCVA before treatment was（50.36±9.84）. The levels of BCVA at 1， 2， and 3 months after treatment were（70.18±11.07）， （72.22±12.06） and （70.31±12.39）， which were all significantly higher than those before treatment（P<0.05）. The CMT before treatment was（465.23±79.82） μm. And the levels of CMT at 1， 2， and 3 months after treatment were（268.31±94.13） μm， （259.21±82.09） μm and （259.42±81.35） μm， which were significantly lower than those before treatment （P<0.05）. According to different genotyping analysis， compared with that of patients with APOEε3， the BCVA was significantly higher and the CMT was significantly lower in patients with APOEε4 and APOEε2 （P<0.05）. While there were no significant differences in BCVA and CMT between APOEε2 patients and APOEε4 patients （P>0.05）. Conclusion The efficacy of intravitreal Conbercept injection in the treatment of age-related macular degeneration is significant. Patients with APOEε4 and APOEε2 have better efficacy. APOE typing can provide guidance for the treatment of AMD with Conbercept.

[Key words] APOE; Polymorphism; Macular degeneration; Conbercept

年齡相關(guān)性黃斑變性（age-related macular degeneration，AMD）是全球一大致盲殺手，全球盲人患者致盲原因4%均為AMD，尤其是歐美國家，AMD為60歲以上患者的首要致盲原因[1，2]。隨著我國進(jìn)入老齡化社會以及各項電子產(chǎn)品的高速普及，我國近年AMD患者的發(fā)病率高達(dá)10.6%，AMD日漸成為威脅我國大眾視力安全的兇手[3]。康柏西普是我國2013年批準(zhǔn)用于治療AMD的一種新蛋白，它可以有效幫助VEGF蛋白融合，目前對于康柏西普的療效報道不一[4]。本文主要研究玻璃體內(nèi)注射康柏西普的療效，同時分析載脂蛋白基因（APOE）基因多態(tài)性預(yù)測AMD療效的價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2016年10月～2018年4月于我院經(jīng)眼底熒光素血管造影（fundus fluorescence angiography，F(xiàn)FA）和眼部光學(xué)相干斷層掃描（optical coherence tomography，OCT）確診的年齡相關(guān)性黃斑變性患者76例作為研究對象，共76眼。所有患者均經(jīng)FFA和OCT眼底檢查確診為年齡相關(guān)性黃斑變性?；颊咧邪尚訟MD44例，濕性AMD患者32例，其中脈絡(luò)膜新生血管33只眼，地圖狀萎縮24只眼，玻璃膜疣11只眼，血管性色素上皮脫離8只眼?；颊咧心?0例，女36例，左眼44只，右眼32只，患者年齡50～82歲，平均（67.1±6.41）歲。所有患者均對本研究知情同意并簽署知情同意書，本研究經(jīng)過本院醫(yī)學(xué)倫理會批準(zhǔn)同意進(jìn)行。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者年齡≥50周歲;（2）患者癥狀符合中華醫(yī)學(xué)會眼科學(xué)會1986年制定的關(guān)于AMD的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn);（3）能配合各項眼底檢查且無禁忌證或過敏現(xiàn)象;（4）所有患者均為單眼AMD。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）排除無法配合研究的特殊人群以及無法完成隨訪人群;（2）排除嚴(yán)重的心腦血管疾病者;（3）排除視網(wǎng)膜病變、白內(nèi)障等眼底疾病者;（4）納入研究前半年連續(xù)1個月患眼使用過皮質(zhì)類固醇激素藥物或者激光治療者。

1.2 治療方法

所有患眼注射前對其過敏史等信息進(jìn)行采集分析，并于前1 d分4次滴用左氧佛沙星滴眼液[參天制藥（中國）有限公司，批號：H20113438]預(yù)防感染，注射時將患者置于無菌化條件下接受無菌化穿刺注射，先使用鹽酸奧布卡因（參天制藥株式會社，批號：H20100362）滴眼液局麻，并以碘伏對眼周皮膚進(jìn)行消毒以及結(jié)膜囊沖洗，鋪巾后取患者顳下3.5～4.0 cm處進(jìn)針點，向患者玻璃腔內(nèi)緩慢推注0.5 mg/0.05 mL康柏西普（成都康弘生物科技有限公司，批號：S2013 0012，規(guī)格：10 mg/mL，0.2 mL/支），每月注射1次，連續(xù)3次為1個療程，1個療程結(jié)束后根據(jù)患者眼部視力穩(wěn)定情況酌情處理，對于視力連續(xù)3個月穩(wěn)定的可以停止治療，而對于視力不穩(wěn)定的情況則需按照病情進(jìn)行繼續(xù)治療。注射后每月隨訪1次，直至停止治療。治療前后及隨訪期間均需要做最佳視力（best corrected visual acuity，BCVA）檢查，觀察患者的黃斑中心凹視網(wǎng)膜厚度（central macular thickness，CMT）等變化情況。

1.3 APOE檢測方法

于患者治療前和治療后3個月抽取患者清晨空腹靜脈血2 mL，離心后取下層血漿進(jìn)行APOE基因型檢測，引物購自上海生物工程有限公司，TagDNA聚合酶等PCR試劑購自TAKARA公司，TA克隆試劑盒購自Promega公司，DNA片段購自華美生物公司，嚴(yán)格按照說明書操作。APOE基因型檢測方法參照文獻(xiàn)[5]，包括采用蛋白酶K裂解法提取基因組DNA、APOE擴(kuò)增、PCR片段回收、質(zhì)粒的提取和重組質(zhì)粒的鑒定分析等操作步驟，之后將酶切鑒定大小正確的質(zhì)粒進(jìn)行系列分析，對患者的APOE等位基因型進(jìn)行判定，并對不同APOE分型患者的BCVA和CMT情況進(jìn)行比較。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料以（x±s）表示，多組計量資料比較采用方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患眼治療前和治療后1、2、3個月 BCVA及CMT比較

患者治療后1、2、3個月的BCVA與治療前相比均明顯提高（P<0.05），治療后1、2、3個月的CMT與治療前相比均明顯降低（P<0.05），見表1。

2.2不同APOE分型患者BCVA和CMT比較

根據(jù)不同基因分型分析，與APOEε3相比，APOEε4和APOEε2型的患者CMT明顯較低（均P<0.05），而APOEε2和APOEε4型患者的CMT無明顯差異（P>0.05），見表2。

3討論

AMD是目前常見的致盲原因，發(fā)病率非常高，且有隨著年齡逐年增長的特性，流行病學(xué)調(diào)查顯示50～60歲年齡段AMD的發(fā)病率為2%左右，而75周歲以上的AMD發(fā)病率高達(dá)40%[6，7]。AMD病因目前尚不明確，多認(rèn)為是多因素致病，由遺傳性因素、環(huán)境因素、眼睛疾病、外傷等等原因?qū)е?。AMD患者中心視力明顯下降，視物時物體變形，顏色對比度下降，視野出現(xiàn)黑影，視網(wǎng)膜厚度變厚，隨著病情進(jìn)展癥狀越加明顯，直至致盲，嚴(yán)重影響患者的日常生活，威脅患者的視力健康，因而，尋找合適的治療藥物保證AMD療效，幫助患者阻止AMD進(jìn)程、提高視力保證其老年生活質(zhì)量是目前我國逐漸進(jìn)入老年化社會進(jìn)程中迫切需要解決的問題[8，9]。

康柏西普是新一代的抗VEGF藥物，它可以通過玻璃體腔內(nèi)注射治療提高VEGF水平，增加血管通透性，促進(jìn)視網(wǎng)膜內(nèi)滲液的吸收，減少滲出物質(zhì)沉淀，幫助AMD患者恢復(fù)視力[10-12]。大量研究證實康柏西普有一定的療效，然而其結(jié)果不一，參差不齊。本文通過研究試圖為穩(wěn)定康柏西普療效尋找合適的用藥指導(dǎo)，保證其療效[13，14]。

APOE是1973年于正常人的極低密度脂蛋白中發(fā)現(xiàn)的一種載脂蛋白，是人體血漿中的重要成分，研究顯示，APOE與大量眼底疾病密切相關(guān)，本文通過研究試圖找出APOE分型與康柏西普療效的關(guān)系[15，16]。本文選取了76眼，每月接受0.5 mg/0.05 mL康柏西普玻璃體內(nèi)注射，注射后每月隨訪1次，連續(xù)注射3個月，比較注射前和注射后1、2、3個月患者的最佳視力BCVA、CMT以及不同APOE等位基因分型療效。結(jié)果顯示治療后1、2、3個月BCVA為（70.18±11.07）、（72.22±12.06）和（70.31±12.39），與治療前相比均明顯提高，治療前CMT為（465.23±79.82）μm，治療后1、2、3個月的CMT為（268.31±94.13）μm、（259.21±82.09）μm和（259.42±81.35）μm，與治療前相比均明顯降低。提示康柏西普治療AMD療效確切，患者短期內(nèi)可以迅速恢復(fù)視力，并保持穩(wěn)定性。研究中發(fā)現(xiàn)，基線接近的不同患者治療后的BCVA、CMT差異比較明顯，通過不同基因分型分析，與APOEε3相比，APOEε2和APOEε4型的患者BCVA明顯較高，CMT明顯較低，而APOEε2和APOEε4型患者的BCVA和CMT無明顯差異，提示不同APOE基因分型的治療效果不同，APOEε2和APOEε4分型的AMD患者療效要明顯優(yōu)于APOEε3分型患者，這可能是因為AMD與遺傳因素密切相關(guān)，康柏西普治療APOEε2和APOEε4分型的AMD效果更佳。這可能與APOEε2是AMD的易感因子，而APOEε4是AMD的危險因子，二者與AMD的發(fā)病密切相關(guān)有關(guān)。就目前而言，在選擇康柏西普治療AMD時，考慮患者的APOE分型，可以為預(yù)測其療效提供指導(dǎo)。關(guān)于本研究的具體可能機(jī)制還需進(jìn)一步大樣本和深入的研究，以彌補(bǔ)本文單中心少樣本的研究缺陷，并且研究中對于年齡這一個變量沒有給予固定考慮，未來希望研究中加入年齡因素作更深入的探討。

綜上所述，玻璃體內(nèi)康柏西普注射療效治療年齡相關(guān)性黃斑變性療效顯著，APOEε4和APOEε2型的患者療效更佳，APOE分型可為康柏西普治療AMD提供指導(dǎo)。

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