陸碧瓊

(廣西民族師范學(xué)院體育學(xué)院，廣西 崇左 532200)

衰老是隨著年齡增大，機(jī)體生理功能下降的一種自然現(xiàn)象。伴隨著衰老的發(fā)生，體內(nèi)各器官、組織及細(xì)胞的功能會(huì)發(fā)生明顯下降，從而誘發(fā)各種疾病的發(fā)生。在衰老發(fā)生的過(guò)程中，體內(nèi)自由基產(chǎn)生增加及抗氧化酶活性降低起到了關(guān)鍵作用；而規(guī)律性體育運(yùn)動(dòng)對(duì)減少體內(nèi)自由基產(chǎn)生、提高抗氧化酶活性有著重要作用。Gil等〔1〕認(rèn)為，長(zhǎng)期規(guī)律性的有氧運(yùn)動(dòng)可顯著提高老年人機(jī)體抗氧化酶活性，對(duì)延緩衰老有積極作用。Morten等〔2〕研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期中等強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)可提高老年小鼠氧化酶的活性及降低自由基的產(chǎn)生。但上述研究主要集中在持續(xù)性無(wú)間歇的運(yùn)動(dòng)，而間歇性運(yùn)動(dòng)對(duì)相關(guān)指標(biāo)影響的研究不多?；诖耍狙芯恳訢-半乳糖致衰老小鼠為研究對(duì)象，探討6 w間歇性游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)衰老小鼠不同組織中自由基代謝及抗氧化酶系統(tǒng)的影響。

1 資料與方法

1.1材料

1.1.1動(dòng)物 從河南省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心購(gòu)買Balb/c雌性小白鼠60只，3月齡，體重23～30 g。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行喂養(yǎng)，室溫25℃，通風(fēng)狀態(tài)良好，自然光照充足，保持實(shí)驗(yàn)室及小鼠生長(zhǎng)環(huán)境的清潔和干燥。小鼠分籠喂養(yǎng)，飲水自由，所有小鼠食用相同的飼料。常規(guī)飼養(yǎng)7 d后隨機(jī)分成生理鹽水注射組(AC組，10只)、衰老模型組(50只)。

1.1.2動(dòng)物造模 造模前所有小鼠健康狀況良好，毛色光澤發(fā)亮，反應(yīng)迅速。50只造模對(duì)象腹腔注射用生理鹽水配成的5%D-半乳糖溶液，每次每只予120 mg/(kg·d)，連續(xù)注射6 w。AC組小鼠按照同樣劑量腹腔注射生理鹽水6 w。注射D-半乳糖后小鼠的健康狀況逐步發(fā)生變化，表現(xiàn)為毛色暗淡、脫毛、倦態(tài)、反應(yīng)遲鈍等一系列衰老性狀。而AC組小鼠在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)明顯的體毛和行動(dòng)變化。

1.1.3主要試劑和儀器 丙二醛(MDA)測(cè)試盒、超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒、冰醋酸、無(wú)水乙醇、D-半乳糖、生理鹽水等。主要儀器：可見分光光度計(jì)(V1s-723N)、800型離心沉淀器、電子記重秤(Ds-671)、勻漿機(jī)(C-MAG HS4)、電熱恒溫水浴鍋(HWS28型)、托盤扭力天平(TN-100)、容聲冰箱(BCD-203A)、注射器、5號(hào)針頭、采血針、動(dòng)物手術(shù)器械。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1實(shí)驗(yàn)分組 衰老模型制作成功后，小鼠先進(jìn)行4 d的適應(yīng)性游泳訓(xùn)練，并挑選適宜游泳運(yùn)動(dòng)的小鼠20只，隨機(jī)分成衰老對(duì)照組(OC組)、間歇性游泳運(yùn)動(dòng)組(OS組)。

1.2.2運(yùn)動(dòng)方案 ①AC組、OC組不做任何的規(guī)律性運(yùn)動(dòng)，正常喂養(yǎng)6 w。②OS組：每天在相同的時(shí)間段無(wú)負(fù)重游泳3次，每次20 min，每次游泳結(jié)束后休息5 min，每周運(yùn)動(dòng)6 d，共運(yùn)動(dòng)6 w。

各組小鼠游泳時(shí)使用的水池及水池里的溫度保持一致，在此期間各組小鼠飲食等方面保持一致。

1.2.3樣品制備 6 w結(jié)束后，所有小鼠從眼眶采血制作血清，測(cè)定其MDA、SOD的含量，其中MDA含量檢測(cè)采用硫代巴比妥法、SOD活性檢測(cè)采用黃嘌呤氧化酶法。對(duì)各組小鼠進(jìn)行稱重，然后在安靜的情況下使用頸椎脫臼法將小鼠處死，取出腓腸肌，放在生理鹽水中浸泡和清洗，將血液清除后用濾紙吸干，然后分別稱重，-20℃保存。最后測(cè)定各組小鼠腓腸肌中MDA含量、SOD活性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1造模前后兩組血清MDA含量與SOD活性的變化 造模后，衰老模型組血清MDA含量明顯升高，SOD活性明顯下降，與AC組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而AC組注射前后MDA含量及SOD活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 造模前后衰老模型組與AC組血清MDA、SOD的變化

與本組造模前比較：1)P<0.05；與AC組造模后比較：2)P<0.01

2.2運(yùn)動(dòng)前后各組體重變化 運(yùn)動(dòng)前，與AC組相比，OC、OS組體重明顯下降(P<0.05)。說(shuō)明隨著機(jī)體衰老，動(dòng)物的體重逐漸下降。經(jīng)過(guò)6 w的間歇游泳訓(xùn)練后，OC、OS組體重均有下降，且顯著低于AC組運(yùn)動(dòng)后體重(P<0.05)，但與同組別運(yùn)動(dòng)前相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 不同組別運(yùn)動(dòng)前后體重變化

與AC組運(yùn)動(dòng)前比較：1)P<0.05；與運(yùn)動(dòng)后AC組比較：2)P<0.05

2.3運(yùn)動(dòng)前后各組MDA含量變化 運(yùn)動(dòng)前與AC組相比，OC組、OS組腓腸肌MDA含量極顯著升高(P<0.01)。經(jīng)過(guò)6 w的游泳訓(xùn)練后，OC、OS組MDA含量都較運(yùn)動(dòng)前明顯升高(P<0.05)，且OC組明顯高于AC組運(yùn)動(dòng)后值(P<0.05)，見表3。

2.4運(yùn)動(dòng)前后各組SOD活性變化 運(yùn)動(dòng)前，與AC組相比，OC、OS組腓腸肌SOD活性極顯著下降(P<0.01)。經(jīng)過(guò)6 w的游泳訓(xùn)練后，OS組SOD活性較運(yùn)動(dòng)前明顯下降(P<0.05)，OC組SOD活性極明顯下降(P<0.05)，且OC組SOD活性明顯低于運(yùn)動(dòng)后的AC組(P<0.05)，見表4。

表3 不同組別運(yùn)動(dòng)前后MDA含量的變化

與同時(shí)期AC組比較：1)P<0.01,2)P<0.05;與本組運(yùn)動(dòng)前比較：3)P<0.05；下表同

表4 不同組別運(yùn)動(dòng)前后SOD活性的變化

3 討 論

通過(guò)連續(xù)注射D-半乳糖導(dǎo)致小鼠衰老與自然衰老的機(jī)制最為相似，注射D-半乳糖后體內(nèi)的自由基產(chǎn)生明顯增多，抗氧化酶的活性明顯降低，導(dǎo)致細(xì)胞損傷，進(jìn)而引起衰老。

在衰老的過(guò)程中，機(jī)體的器官和組織會(huì)發(fā)生一系列的生理結(jié)構(gòu)和功能變化，其中比較明顯的變化便是體重下降。在自由基的攻擊下，機(jī)體蛋白質(zhì)多肽鏈將會(huì)斷裂，導(dǎo)致肌纖維和肌細(xì)胞萎縮及肌纖維數(shù)量減少，各器官和組織在形態(tài)上出現(xiàn)萎縮，進(jìn)而導(dǎo)致各器官質(zhì)量降低及身體整體重量改變。在本研究中，游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)衰老小鼠體重影響不大，原因可能是間歇性游泳運(yùn)動(dòng)的強(qiáng)度偏大，小鼠運(yùn)動(dòng)中能量代謝以無(wú)氧運(yùn)動(dòng)為主，導(dǎo)致脂肪消耗較少。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中體重下降主要是自然衰老所導(dǎo)致。

長(zhǎng)期適量的運(yùn)動(dòng)可使組織中的MDA含量降低，但運(yùn)動(dòng)降低MDA含量等與運(yùn)動(dòng)方式、運(yùn)動(dòng)持續(xù)時(shí)間及強(qiáng)度等因素有關(guān)〔3〕。顧麗燕等〔3〕研究得出，游泳運(yùn)動(dòng)使小鼠組織中MDA含量降低的程度與運(yùn)動(dòng)持續(xù)的時(shí)間(周數(shù)及每次運(yùn)動(dòng)的時(shí)間)相關(guān)；同等的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度，運(yùn)動(dòng)時(shí)間越長(zhǎng)，MDA含量降低越明顯。此外，伍慶華等〔4〕也得出相似的結(jié)論，老年人運(yùn)動(dòng)1年后MDA含量降低的程度明顯高于運(yùn)動(dòng)6個(gè)月后MDA含量降低的程度。在本研究中，衰老模型小鼠MDA含量在運(yùn)動(dòng)后明顯升高，但OC組升高的幅度更大。分析其原因：(1)注射D-半乳糖后，機(jī)體內(nèi)的半乳糖濃度升高，再加上運(yùn)動(dòng)干預(yù)，導(dǎo)致組織中MDA含量顯著升高，盡管運(yùn)動(dòng)使體內(nèi)的抗氧化防御體系的應(yīng)激水平加強(qiáng)，但也無(wú)法徹底清除，因而導(dǎo)致組織內(nèi)氧化損傷加重；(2)本實(shí)驗(yàn)中小鼠的運(yùn)動(dòng)時(shí)間偏短，尚未達(dá)到引起MDA含量顯著降低的時(shí)間。

目前關(guān)于運(yùn)動(dòng)對(duì)組織SOD活性的影響存在一定的爭(zhēng)議。多數(shù)研究認(rèn)為，適量的運(yùn)動(dòng)尤其是有氧運(yùn)動(dòng)可在一定程度上升高組織中SOD的活性，其機(jī)制是運(yùn)動(dòng)時(shí)自由基生成增多，機(jī)體耗氧量增加，而機(jī)體因自由基增多而出現(xiàn)抗氧化酶活性的適應(yīng)性變化，即抗氧化酶活性增高〔5,6〕。但也有研究認(rèn)為，運(yùn)動(dòng)對(duì)SOD活性的影響不大，不能使SOD活性顯著升高，這可能與運(yùn)動(dòng)方式、運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間及運(yùn)動(dòng)的年限有關(guān)〔3〕。本研究表明，在衰老過(guò)程中，機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能逐步下降，而在運(yùn)動(dòng)的刺激下，機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能得到一定程度的提高。但是在本研究中，運(yùn)動(dòng)提高SOD活性的作用有一定的局限性，在此種運(yùn)動(dòng)方式下，小鼠SOD活性仍有一定程度的下降。因此，筆者認(rèn)為6 w的間歇性運(yùn)動(dòng)對(duì)改善衰老小鼠腓腸肌中MDA含量和SOD活性作用不明顯，有待于進(jìn)一步挖掘更有效的運(yùn)動(dòng)方式或運(yùn)動(dòng)組合。