王琳琳 陸陽(yáng)

方法提要

試樣中的克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇和特布他林殘留量采用乙腈水溶液漩渦萃取，PRiME HLB固相萃取柱提取，采用甲醇-乙酸銨流動(dòng)相上HPLC- MS測(cè)定，外標(biāo)法定量。

試劑和材料

除另有說(shuō)明外，所用試劑均為分析純，水為符合GB/T 6682 規(guī)定的一級(jí)水。

甲醇：色譜純；乙腈：色譜純；乙酸銨：色譜純；氮?dú)猓杭兌取?9.999%；標(biāo)準(zhǔn)品：特布他林（Terbutalin sulfate），CAS編號(hào)：23031-32- 5，純度：96.70%；沙丁胺醇（Salbutamol free base），CAS編號(hào)：18559- 94- 9，純度：99.90%；克倫特羅（Clenbuterol hydrochloride），CAS編號(hào)：21898- 19- 1，純度：99.34%；萊克多巴胺（Ractopamine hydrochloride），CAS編號(hào)：90274- 24- 1，純度：97.0%；標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線：配置四種標(biāo)準(zhǔn)溶液的混標(biāo)曲線，濃度為200PPb、100PPb、50PPb、20PPb、10PPb。

儀器與設(shè)備

液相色譜-串聯(lián)四級(jí)桿質(zhì)譜儀：配電噴霧離子源（ESI）；分析天平：感量為0.01g和0.1mg；漩渦混合器；冷凍離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥10000r/min；氮吹濃縮儀。

樣品處理

取生鮮豬肉2.50g，加入80%乙腈水溶液10mL，漩渦震蕩萃取1min，超聲波萃取3min，10000r/min高速離心5min，取5mL上清液直接加載到6cc規(guī)格PRiME HLB固相萃取柱，保持一秒一滴的流速，收集全部流出液。取4.00mL流出液在40℃下氮?dú)獯抵列∮?.5mL，殘留液體用10%甲醇水溶液定容至1.00mL，過(guò)0.2μm微孔濾膜，上液相質(zhì)譜。

色譜和質(zhì)譜條件

液相色譜條件：色譜柱：C18柱，150mm（柱長(zhǎng)）×2.1mm（內(nèi)徑），粒度5μm；流動(dòng)相：甲醇- 5mmol/L乙酸銨溶液，梯度洗脫見表1。

流速：200μL/min；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：20μL。

質(zhì)譜條件：離子化模式：電噴霧電離（ESI）正離子模式；質(zhì)譜掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；分辨率：?jiǎn)挝毁|(zhì)量分辨率；毛細(xì)管電壓：4200V；干燥氣溫度：350℃；干燥氣流量：11L/min；碰撞氣：氮?dú)?；主要質(zhì)譜參數(shù)見表2。

結(jié)果

標(biāo)樣譜圖（見圖1）

樣品（豬肉）加標(biāo)譜圖以及計(jì)算的加標(biāo)回收率（見圖2、圖3）

特布他林、沙丁胺醇、萊克多巴胺、克倫特羅加標(biāo)量均為50ppb，回收率分別為：87.8%、79.6%、64.2%；76.4%，回收率均達(dá)到滿意。

結(jié)果分析

（1）在樣品處理中用PriME HLB固相萃取柱代替了凈化過(guò)程，節(jié)約了很多人力以及時(shí)間；

（2）采用外標(biāo)法，在經(jīng)濟(jì)成本上做到了節(jié)約成本；

（3）流動(dòng)相使用甲醇-乙酸銨溶液，用甲醇代替乙腈，在經(jīng)濟(jì)上節(jié)約成本，在環(huán)境負(fù)擔(dān)上，檢驗(yàn)員長(zhǎng)期接觸乙腈對(duì)人體會(huì)產(chǎn)生一定危害，另外女性工作者長(zhǎng)期接觸乙腈會(huì)增大不孕的概率；

（4）在回收率理想的前提下，本方法不僅節(jié)約了成本，節(jié)省了時(shí)間，還降低了危害。