王 超，劉 楊，湯有宏，2

（1.安徽古井貢酒股份有限公司，安徽亳州236820； 2.安徽省固態(tài)發(fā)酵工程技術(shù)研究中心，安徽亳州236820）

采用GB 5009.15—2014《食品安全國家標準食品中鎘的測定》的檢測方法檢測水樣中鎘的含量，在GB 5009.15—2014《食品安全國家標準食品中鎘的測定》試樣前處理中，試樣消解共有壓力罐消解法、微波消解、濕式消解法、干灰化法4種消解處理的方法，綜合考慮，針對檢測水樣而言，其中的微波消解法耗時最短，效率最高，現(xiàn)依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》對試樣消解中微波消解的處理方法進行方法驗證，評估驗證標準GB 5009.15—2014《食品安全國家標準食品中鎘的測定》中微波消解法檢測水樣中鎘含量的測量范圍、線性范圍、檢出限、定量限、精密度、正確度6個方法參數(shù)，證明該方法具有適用性和有效性。

1 材料與方法

1.1 相關(guān)依據(jù)

檢測依據(jù)：GB 5009.15—2014《食品安全國家標準食品中鎘的測定》。

驗證依據(jù)：GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》。

1.2 驗證方法

采用GB 5009.15—2014《食品安全國家標準食品中鎘的測定》試樣消解中微波消解處理樣品的方法。

1.3 方法原理

試樣經(jīng)灰化或酸消解后，注入一定量樣品消化液于原子吸收分光光度計石墨爐中，電熱原子化后吸收228.8 nm共振線，在一定濃度范圍內(nèi)，其吸光度值與鎘含量成正比，采用標準曲線法定量。

1.4 試劑和材料

本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的二級水。

所用玻璃儀器均需以硝酸溶液（1+4）浸泡24 h以上，用水反復沖洗，最后用去離子水沖洗干凈。

1.4.1 試劑硝酸（HNO3）：優(yōu)級純。過氧化氫（H2O2，30%）。

1.4.2 試劑配制

硝酸溶液（1%）：取10.0 mL硝酸加入100 mL水中，稀釋至1000 mL。

1.4.3 標準品

經(jīng)國家認證并授予標準物質(zhì)證書的鎘標準溶液(每毫升含1 mg鎘)。國家標準樣品編號GSB 04-1721-2004，唯一標識183012-3，質(zhì)量濃度1000 μg/mL，有效期至2020年3月6日。

1.4.4 標準溶液配制

鎘標準中間液（10 mg/L）：準確吸取鎘標準儲備液（1000 μg/mL）1.00 mL于100 mL容量瓶中，用硝酸溶液（1%）定容至刻度，混勻。

鎘標準中間液（100 μg/L）：準確吸取鎘標準儲備液（10 mg/L）1.00 mL于100 mL容量瓶中，用硝酸溶液（1%）定容至刻度，混勻。

鎘標準中間液（3 μg/L）：準確吸取鎘標準儲備液（100 μg/L）3.00 mL于100 mL容量瓶中，用硝酸溶液（1%）定容至刻度，混勻。

1.5 儀器設(shè)備

原子吸收分光光度計，附石墨爐。

電子天平：感量為0.1 mg和1 mg。

可調(diào)溫式電熱板。

微波消解系統(tǒng)：配聚四氟乙烯或其他合適的壓力罐。

1.6 分析步驟

1.6.1 試樣制備

干試樣：糧食、豆類，去除雜質(zhì)；堅果類去雜質(zhì)、去殼；磨碎成均勻的樣品，顆粒度不大于0.425 mm。儲于潔凈的塑料瓶中，并標明標記，于室溫下或按樣品保存條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

鮮（濕）試樣：蔬菜、水果、肉類、魚類及蛋類等，用食品加工機打成勻漿或碾磨成勻漿，儲于潔凈的塑料瓶中，并標明標記，于-16～-18℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

液態(tài)試樣：按樣品保存條件保存?zhèn)溆?。含氣樣品使用前?yīng)除氣。

1.6.2 試樣消解

稱取干試樣0.3～0.5 g（精確至0.0001 g）、鮮（濕）試樣1～2 g（精確到0.001 g）置于微波消解罐中，加5 mL硝酸和2 mL過氧化氫。微波消化程序可以根據(jù)儀器型號調(diào)至最佳條件（見表1）。消解完畢，待消解罐冷卻后打開，消化液呈無色或淡黃色，加熱趕酸至近干，用少量硝酸溶液（1%）沖洗消解罐3次，將溶液轉(zhuǎn)移至10 mL或25 mL容量瓶中，并用硝酸溶液（1%）定容至刻度，混勻備用；同時做試劑空白試驗。上機測試。

表1 微波消解升溫程序

2 驗證結(jié)果

2.1 測量范圍

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中5.2測量范圍的驗證方法，對本方法的測量范圍進行驗證，對1 μg/L鎘標準溶液、3 μg/L鎘標準溶液、5 μg/L鎘標準溶液3個不同濃度的標準溶液進行6次檢測分析，其結(jié)果具體如下。

2.1.1 標準曲線

試驗所得標準曲線線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)為0.9993，結(jié)果（見表2）符合GB/T 27417—2017中對于準確定量方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不低于0.99的要求。

2.1.2 精密度

精密度以不同濃度的鎘標準溶液6次檢測結(jié)果值的室內(nèi)變異系數(shù)表示，其結(jié)果（見表3）符合GB/T 27417—2017中被測組分含量為1～10 μg/kg時實驗室內(nèi)變異系數(shù)小于21%的要求。

2.1.3 正確度

正確度以不同濃度的鎘標準溶液的回收率來表示，即鎘標準溶液6次檢測結(jié)果的平均值與已知濃度的比值，其結(jié)果（見表3）符合GB/T 27417—2017中被測組分含量為＜0.1 mg/kg時方法回收率在60%～120%的要求。

表2 標準曲線線性

表3 標準溶液變異系數(shù)及正確度

2.2 線性范圍

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中5.3線性范圍的驗證方法，對本方法的線性范圍進行驗證，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)為0.9993，結(jié)果（見表2）符合GB/T 27417—2017中對于準確定量方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不低于0.99的要求。

2.3 檢出限和定量限

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中5.4檢出限和定量限的驗證方法，采用空白標準偏差法對本方法的檢出限進行驗證，方法的檢出限為空白試驗的平均值與3倍的標準偏差之和，方法定量限為方法檢出限的3倍。故本方法的方法檢出限為0.50 μg/L，定量限為1.50 μg/L（見表4）。

2.4 正確度

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中5.5正確度的驗證方法，采用加標回收的方法對正確度進行驗證，結(jié)果顯示方法回收率（見表5）符合GB/T 27417—2017中被測組分含量為＜0.1 mg/kg時方法回收率在60%～120%的要求。

表4 方法檢出限和定量限 (μg/L)

表5 正確度及精密度

2.5 精密度

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中5.6精密度的驗證方法，以不同樣品6次檢測結(jié)果值的室內(nèi)變異系數(shù)表示精密度，其結(jié)果（見表5）符合GB/T 27417—2017中被測組分含量為1～10 μg/kg時實驗室內(nèi)變異系數(shù)小于21%的要求。

3 結(jié)論

本方法驗證依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中方法驗證相關(guān)的有關(guān)規(guī)定對GB 5009.15—2014《食品安全國家標準食品中鎘的測定》中微波消解法檢測水樣中鎘含量的方法進行方法驗證，其檢測過程中所涉及的的測量范圍、線性范圍、檢出限和定量限、正確度及精密度6個方法參數(shù)均符合GB/T 27417—2017和GB 5009.15—2014的要求，說明GB 5009.15—2014《食品安全國家標準食品中鎘的測定》中微波消解法用于檢測水樣中的鎘含量是適用和有效的。