何謝玲，劉 娜，湯建萍，祝興元，唐金玲，韋 祝，常 靜

特應(yīng)性皮炎（atopic dermatitis，AD）是兒童最常見的皮膚病之一，病因及發(fā)病機制復雜，而環(huán)境因素在發(fā)病中起著重要的作用。真菌在自然界分布廣泛，其孢子和菌絲能在空氣中播散。一方面真菌經(jīng)過各種途徑進入或接觸人體后引起機體的各種過敏性反應(yīng)；另一方面真菌還能引起機體的感染。通過調(diào)查研究長沙市氣傳真菌的主要種類、數(shù)量和分布規(guī)律，能為與氣傳真菌相關(guān)的兒童AD的臨床診斷、預(yù)防、治療提供重要依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 材料與試劑

傘蓬式孢子取樣器，載玻片，蓋玻片，凡士林，乳酸棉蘭，光學顯微鏡，圖文采集系統(tǒng)，計算機。

1.2 方法

1.2.1 孢子收集 2014年11月—2015年10月，將傘蓬式孢子取樣器置于醫(yī)院4樓樓頂平臺上[1]，四面無遮擋。每24 h更換涂滿凡士林的載玻片。將換下的載玻片用乳酸棉蘭染色后蓋以22 mm×22 mm的蓋玻片，充分著色后于顯微鏡下觀察蓋玻片區(qū)域，根據(jù)喬秉善主編的《中國氣傳真菌彩色圖譜》對觀察到的孢子進行分類，并記錄各類孢子的數(shù)量。

1.2.2 氣象記錄 記錄2014年11月—2015年10月的氣溫、濕度、可吸入顆粒物（inhalable particulate matter，PM10）等氣象資料。

1.2.3 病例選擇與統(tǒng)計 統(tǒng)計2014年11月—2015年10月我院診斷為AD的長沙地區(qū)患兒，并統(tǒng)計每個月的發(fā)病人數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 長沙市氣傳真菌的種類及每月分布

2014年11月—2015年10月長沙市全年曝片365張，共收集到真菌孢子36 425個，真菌種類69種，氣傳真菌孢子分布見表1。

2.2 長沙市氣象資料

從湖南省氣象局獲取調(diào)查期間長沙的月平均氣溫、濕度、可吸入顆粒物（PM10），并統(tǒng)計長沙市氣傳真菌孢子數(shù)與各氣象參數(shù)每月分布情況（圖1）。

2.3 全年長沙市兒童AD發(fā)病及分布情況

2014年11月—2015年10月我院診斷為AD的長沙地區(qū)的患兒共1 039例，診斷符合Williams標準[2,3]，其中773例為新發(fā)患兒，266例為復發(fā)患兒。所有AD患兒共進行了1 014人次真菌特異性IgE檢測，110次檢測結(jié)果為陽性。每月分布情況見圖2。

表1 2014年11月—2015年10月長沙市氣傳真菌的月分布情況

注：1411代表2014年11月，以此類推

2.4 數(shù)據(jù)分析

長沙市氣傳真菌飄散高峰為每年的10～12月及2～5月，1月份飄散最少，6月、7月份次之。本地區(qū)的優(yōu)勢菌種類由多到少依次為枝孢屬、黑粉目、鏈隔孢、粘菌綱、小戴頓屬和小球腔菌屬。用SPSS20統(tǒng)計軟件分析全年每月收集到的真菌孢子數(shù)分別與溫度、濕度、PM10及兒童AD例數(shù)之間的相關(guān)性（表2）。收集的孢子數(shù)與溫度無相關(guān)性，而與大氣濕度，PM10以及AD患兒例數(shù)呈正相關(guān)，且均有統(tǒng)計學意義；而每月AD患兒例數(shù)與溫度、濕度和PM10均無相關(guān)性。分析孢子總數(shù)及各優(yōu)勢菌與兒童AD例數(shù)、真菌IgE陽性患兒例數(shù)及陽性率之間的相關(guān)性見表3。AD患兒例數(shù)與優(yōu)勢菌中的小戴頓屬相關(guān)，與其他5類優(yōu)勢菌均無相關(guān)性。真菌IgE檢測結(jié)果陽性的患兒例數(shù)與小戴頓屬、小球腔菌及孢子總數(shù)均相關(guān)，且有統(tǒng)計學意義。而真菌IgE的陽性率與各優(yōu)勢菌及孢子總數(shù)均無相關(guān)性。

表2 每月真菌孢子數(shù)與溫度、濕度、PM10及AD患兒例數(shù)之間的相關(guān)性分析

表3 孢子總數(shù)及各優(yōu)勢菌與兒童AD發(fā)病數(shù)、真菌IgE陽性患兒例數(shù)及陽性率之間的相關(guān)性

注：1411代表2014年11月，以此類推

3 討論

長沙地屬亞熱帶季風氣候，全年溫暖濕潤，最低月平均溫度為1月7℃，且降水充沛，濕度較大，全年月平均相對濕度均＞50%。本次研究共收集氣傳真菌孢子67類，共計36 425個，全年可見真菌孢子飄散，除3月、6月和7月份收集孢子數(shù)較少，其他月份的孢子數(shù)均＞2 000，且10月、3月、11月份最高，孢子數(shù)＞4 000，種類和數(shù)量均遠高于太原、臺州等地區(qū)[4,5]，且優(yōu)勢菌種類也不盡相同，一方面可能與長沙的氣候與之不同且適合真菌生長有關(guān)，另一方面可能與曝片高度有關(guān)[6]。

長沙地區(qū)全年的優(yōu)勢菌為枝孢屬、黑粉目、鏈隔孢、粘菌綱、小戴頓屬和小球腔菌屬，該6類菌的總占有率為83.48%，其中枝孢屬為絕對優(yōu)勢菌，年總占有率達42.17%。 數(shù)據(jù)分析顯示真菌IgE檢測結(jié)果陽性的患兒例數(shù)與小戴頓屬、小球腔菌及孢子總數(shù)均相關(guān)，提示空氣中真菌孢子的數(shù)量與真菌有關(guān)的AD患兒的發(fā)病有相關(guān)性，且小戴頓屬、小球腔菌或能促進AD的發(fā)病。而分析顯示孢子數(shù)量最多的枝孢屬孢子數(shù)量與AD患兒例數(shù)及真菌IgE檢測結(jié)果陽性的患兒例數(shù)均不相關(guān)，可能是由于長沙地區(qū)全年枝孢屬的數(shù)量均占優(yōu)勢，數(shù)量最低月份均＞300個，而在此基礎(chǔ)上枝孢屬孢子數(shù)量的變化對AD患兒的發(fā)病影響不大。數(shù)據(jù)分析顯示真菌IgE的陽性率與各優(yōu)勢菌及孢子總數(shù)均無相關(guān)性。AD的病因和發(fā)病機制復雜，涉及遺傳、環(huán)境和免疫等多方面因素[7]。一方面，環(huán)境和食物等其他和AD發(fā)病有關(guān)的因素[7]接觸的多少會影響與真菌相關(guān)的AD發(fā)病數(shù)在總AD發(fā)病數(shù)中的比例，另一方面，IgE的產(chǎn)生受多因素調(diào)控[10,11]，故而AD患兒自身的免疫狀態(tài)也會影響血清IgE的檢測結(jié)果。

此次研究顯示氣傳真菌孢子數(shù)與溫度不相關(guān)，這可能是由于長沙全年每月最低平均溫度不低于7℃，氣候溫暖，故而在長沙地區(qū)溫度對真菌的生長影響不大。此次研究收集到的數(shù)據(jù)分析表明氣傳真菌孢子數(shù)與大氣濕度呈正相關(guān)，這與Khotimah和Dahlan[12]的研究結(jié)果一致。同時孢子數(shù)也與PM10呈正相關(guān)。Khotimah 和Dahlan[12]證實總懸浮顆粒物濃度與真菌數(shù)呈正相關(guān)，筆者的分析結(jié)果與之一致。此外，本文數(shù)據(jù)顯示真菌孢子數(shù)與PM10的相關(guān)性強于濕度，這可能是由于孢子直接參與了生物氣溶膠的構(gòu)成[13]。

真菌在大氣中廣泛分布，能作為變應(yīng)原引起機體的變態(tài)反應(yīng)。筆者之前的研究顯示兒童特異性IgE檢測真菌的陽性率為2.04%，次于塵螨、屋塵、動物皮毛屑、樹木花粉，在Ⅰ型過敏反應(yīng)環(huán)境致敏原中居第5位[14]。Carlsten 等[15]的研究表明變應(yīng)原在兒童AD的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后轉(zhuǎn)歸中起重要作用。更有研究報道AD患者病情的嚴重程度與某些真菌的定植有關(guān)[16]，且皮膚的狀況與定植的種類相關(guān)。本次研究發(fā)現(xiàn)氣傳真菌孢子數(shù)與AD患兒例數(shù)呈正相關(guān)，提示氣傳真菌能促進AD的發(fā)生，而AD患兒患病數(shù)與溫度、濕度及PM10均無相關(guān)性。

關(guān)于氣傳真菌有多地的調(diào)研，但長沙氣候獨特，且國內(nèi)尚少見氣傳真菌與兒童AD相關(guān)性的研究，此研究獲得了長沙地區(qū)全年氣傳真菌數(shù)量和種類的分布規(guī)律，能為與真菌有關(guān)的多種疾病的臨床診斷、治療及及時規(guī)避以預(yù)防提供理論依據(jù)。