異常糖鏈糖蛋白不同截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男?/h1>
2019-04-27 01:56:22張紅軍房延鳳謝永宏金發(fā)光
中華肺部疾病雜志(電子版) 2019年4期
張紅軍 房延鳳 謝永宏 金發(fā)光 顧 興
目前有許多研究發(fā)現(xiàn)，在正常細(xì)胞癌變時(shí)，其細(xì)胞膜表面的聚糖結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生某些變化，造成血液循環(huán)當(dāng)中的異常糖鏈糖蛋白(tumor abnormal protein, TAP)水平不同程度的升高[1-2]。隨著研究的深入，表明TAP是細(xì)胞原癌基因(proto-oncogene)和抑癌基因(caner suppressor gens)突變后表達(dá)的產(chǎn)物，是不同種類的癌細(xì)胞在異常增生過程中的共同特征[3]，在細(xì)胞惡變時(shí)細(xì)胞膜表面的聚糖結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，并分泌到血液，達(dá)到一定濃度后可以通過技術(shù)手段在外周血中檢測(cè)出來[2, 4]。國內(nèi)許多學(xué)者在研究中還發(fā)現(xiàn)，TAP在肺、甲狀腺、口腔、食道、胃、肝膽、結(jié)直腸，以及乳腺、卵巢、子宮與淋巴等多種實(shí)體腫瘤患者外周血當(dāng)中均具有相當(dāng)高的表達(dá)[5]，而且，其敏感度可高達(dá)80%以上[6-8]，所以TAP可作為較好的腫瘤檢測(cè)標(biāo)志物(tumor markers, TM)之一[9]。
肺癌是當(dāng)今世界上發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤，5年生存率不高于15%[10]。早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療，從而降低肺癌患者死亡率及改善預(yù)后是全世界醫(yī)學(xué)家們所努力的共同課題。2013年8月6日，TAP檢測(cè)項(xiàng)目被衛(wèi)生部列入國家《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目目錄》(共計(jì)1 462種)，TAP檢測(cè)從此在臨床各學(xué)科逐漸開展起來。同時(shí)，TAP在肺癌領(lǐng)域的應(yīng)用也越來越多，其目的是想努力實(shí)現(xiàn)肺癌的早診早治[11]。但是，查閱國內(nèi)外文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)TAP在肺癌領(lǐng)域的相關(guān)研究甚少。怎樣解讀TAP檢測(cè)結(jié)果，TAP排查肺癌的效能如何，這些問題仍然使許多臨床醫(yī)生感到困惑。本文通過肺癌患者和非肺癌患者的TAP檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行回顧性分析，對(duì)TAP不同截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男苓M(jìn)行了探討。
對(duì)象與方法
一、研究對(duì)象
選我院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科 2018年4月至 2018年7月經(jīng)治的肺癌患者176例，年齡34～84歲，平均年齡63歲；其中男性136例(77.3%)，女性40例(22.7%)；腺癌56例(31.8%)，鱗癌64例(36.4%)，小細(xì)胞癌39例(22.2%)，未分類癌17例(9.6%)。另收集同時(shí)期經(jīng)治的非肺癌患者113例，年齡26～91歲，平均年齡63歲；其中男性70例(61.9%)，女性43例(38.1%)；慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD) 18例(15.9%)，肺結(jié)核(pulmonary tuberculosis, TB)20例(17.7%)，特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化(idiopathic pulmonary interstitial fibrosis, IPF)9例(8.0%)，肺部感染60例(53.1%)，其它病種6例(5.3%)?；颊呷脒x標(biāo)準(zhǔn)：①所有肺癌患者均經(jīng)電子支氣管鏡或經(jīng)皮肺穿刺活檢行病理學(xué)檢查確診；②所有肺癌患者及非肺癌患者均進(jìn)行TAP檢測(cè)。
二、研究方法
對(duì)所有入選的肺癌患者及非肺癌患者檢測(cè)到的TAP結(jié)果進(jìn)行分析，判定理想截?cái)嘀?，并與TAP檢驗(yàn)報(bào)告解讀及處理建議所提供的截?cái)嘀迪啾容^，探討這兩種截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男堋?/p>
所有肺癌患者及非肺癌患者均清晨空腹，予5 ml注射器抽取靜脈血3 ml，采用由浙江瑞生醫(yī)療儀器廠提供的綜合診斷儀和TAP凝聚劑，用凝聚素親和法進(jìn)行TAP檢測(cè)。檢測(cè)時(shí)使用其公司的原裝配套試劑盒，并嚴(yán)格按照試劑盒的說明進(jìn)行。
三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié) 果
一、肺癌組與非肺癌組的年齡、性別、TAP及構(gòu)成類型特點(diǎn)
經(jīng)檢驗(yàn)分析顯示，肺癌組與非肺癌組相比較，兩組在年齡方面沒有明顯差異(P=0.635)，具有可比性；而在性別方面，兩組相比較，肺癌組男性患者人數(shù)高達(dá)77.3%，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.005)。另外，經(jīng)單因素方差分析，發(fā)現(xiàn)肺癌組TAP(171.82±36.26)明顯高于非肺癌組(158.54±32.61)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002)。
二、肺癌患者TAP理想截?cái)嘀凳?70 μm2
通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，TAP用于排查肺癌患者的理想截?cái)帱c(diǎn)是170 μm2，敏感度54.55%，特異度64.60%，ROC曲線下的面積(AUC)是0.622(標(biāo)準(zhǔn)誤0.034，95%可信區(qū)間0.554-0.689，P<0.001)，見表1、圖1。
表1 TAP不同截?cái)帱c(diǎn)的敏感度、特異度和似然比
注：a理想截?cái)嘀?/p>
圖1 TAP的ROC曲線
三、TAP不同截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男鼙容^
根據(jù)TAP檢驗(yàn)報(bào)告解讀及處理建議，TAP檢驗(yàn)結(jié)果可解讀為三個(gè)級(jí)別：①TAP≤121 μm2：說明被檢者體內(nèi)TAP含量正常，無明顯凝聚物，或腫瘤患者治療有效，或接近或進(jìn)入終末期的腫瘤患者；②121～225 μm2：說明被檢者體內(nèi)TAP含量異常，凝聚物較小，存在腫瘤風(fēng)險(xiǎn)；③≥225 μm2：說明被檢者體內(nèi)TAP含量異常，凝聚物較大，腫瘤風(fēng)險(xiǎn)較大。為此，我們應(yīng)用其推薦值的三個(gè)區(qū)間分別對(duì)肺癌組、非肺癌組及肺癌組+非肺癌組進(jìn)行分析，計(jì)算各自陽性率，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)三組之間并無明顯的差異(P=0.577)。同理，我們將本文所得截?cái)嘀?，?70 μm2為界，按兩個(gè)區(qū)間分別對(duì)肺癌組、非肺癌組及肺癌組+非肺癌組進(jìn)行分析，計(jì)算各自陽性率，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)肺癌組54.55%與診斷一致，非肺癌組64.60%與診斷一致，而肺癌組+非肺癌組兩個(gè)區(qū)間分別是47.06%和52.94%，三組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.006)，見表2。
表2 TAP不同截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男鼙容^[n(%)]
討 論
異常糖鏈糖蛋白(TAP)最初是由烏克蘭科學(xué)院的伽利欣院士發(fā)現(xiàn)的，當(dāng)時(shí)將其與甲胎蛋白(AFP)進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，大大的提高了肝癌的檢出率[4]。后來，隨著研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)TAP的檢測(cè)是一種組合腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)技術(shù)，它以糖蛋白上的“異常糖鏈”作為識(shí)別位點(diǎn)，能夠一次性組合檢測(cè)幾十種TAP，如AFP、CEA、糖蛋白抗原系列(CA 系列)、堿性磷酸酶、人絨毛膜促性腺激素及酸性磷酸酶等[12]，所以TAP對(duì)全身腫瘤均具有很高的敏感性[13-18]。由于TAP可高濃度聚集多種腫瘤信號(hào)，具有靈敏度高、適用癌譜廣、痛苦小、易于普及等多種優(yōu)勢(shì)[19-21]，臨床上應(yīng)用越來越廣泛。尤其在肺癌領(lǐng)域，TAP臨床應(yīng)用日益增多[11, 22-25]，相關(guān)研究也逐漸開展起來。我們?cè)鴮?duì)腺癌、鱗癌及小細(xì)胞癌等不同病理類型的肺癌患者TAP水平，以及其與CEA、鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC)、糖類抗原125(CAl25)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)和細(xì)胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)等傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物的相關(guān)性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)TAP在肺腺癌患者中與傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物具有較好的正相關(guān)性[26]。那么，隨著TAP的臨床應(yīng)用和相關(guān)研究的開展，還有沒有急需解決的問題？答案是肯定的，如：怎樣解讀TAP檢測(cè)結(jié)果，TAP排查肺癌的效能如何等。
為更好的解讀TAP檢測(cè)結(jié)果，本文通過回顧性分析，對(duì)TAP在肺癌領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)行了初步探討。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與非肺癌患者相比較，肺癌患者TAP明顯高于前者。進(jìn)一步通過ROC曲線分析可以得出，TAP用于排查肺癌患者的理想截?cái)帱c(diǎn)是170 μm2。我們將此截?cái)嘀?170 μm2)與TAP檢驗(yàn)報(bào)告解讀及處理建議所提供的截?cái)嘀?≤121 μm2、121～225 μm2、≥225 μm2)分別應(yīng)用于肺癌組、非肺癌組及肺癌組+非肺癌組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這兩種截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男懿煌?，前者在三組間存在顯著性差異，而后者在三組之間并無明顯差別。那么，170 μm2是否具有很好的排查肺癌的效能呢？從本文中可以看出，TAP的ROC曲線下面積是0.622，雖然其在0.5～1之間，但是根據(jù)Swets判斷標(biāo)準(zhǔn)[27-30]，面積在0.5以下，說明實(shí)驗(yàn)沒有診斷價(jià)值，面積在0.5～0.7之間有較低的準(zhǔn)確性，面積在0.7～0.9之間具有一定的準(zhǔn)確性，因此可以認(rèn)為，170 μm2這個(gè)截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男苓€是比較低的。本文數(shù)據(jù)表明，以170 μm2作為截?cái)嘀担伟┙M、非肺癌組及肺癌組+非肺癌組的陽性率及陰性率分別是54.55%與45.45%、64.6%與35.4%、47.06%與52.94%，雖然他們的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是由于陽性率較低，而陰性率又太高，顯然很難滿足臨床需要。
本研究通過臨床數(shù)據(jù)分析，對(duì)不同截?cái)嘀档腡AP排查肺癌效能進(jìn)行了初步探討，獲得了初步研究結(jié)果，但是由于本研究樣本量較少，研究對(duì)象存在性別差異，也沒有納入正常人群進(jìn)行校正，對(duì)研究結(jié)果的可靠性存在一定的影響，具體程度不得而知，尚需今后擴(kuò)大樣本量、擴(kuò)大研究人群進(jìn)一步研究。
綜上所述，肺癌患者TAP明顯高于非肺癌患者，其對(duì)肺癌的排查具有一定的參考價(jià)值，但是，TAP不同截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男苁遣煌?，如僅將TAP單獨(dú)應(yīng)用于肺癌領(lǐng)域，其效能并不高，這一點(diǎn)需引起臨床注意。
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肺癌是當(dāng)今世界上發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤，5年生存率不高于15%[10]。早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療，從而降低肺癌患者死亡率及改善預(yù)后是全世界醫(yī)學(xué)家們所努力的共同課題。2013年8月6日，TAP檢測(cè)項(xiàng)目被衛(wèi)生部列入國家《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目目錄》(共計(jì)1 462種)，TAP檢測(cè)從此在臨床各學(xué)科逐漸開展起來。同時(shí)，TAP在肺癌領(lǐng)域的應(yīng)用也越來越多，其目的是想努力實(shí)現(xiàn)肺癌的早診早治[11]。但是，查閱國內(nèi)外文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)TAP在肺癌領(lǐng)域的相關(guān)研究甚少。怎樣解讀TAP檢測(cè)結(jié)果，TAP排查肺癌的效能如何，這些問題仍然使許多臨床醫(yī)生感到困惑。本文通過肺癌患者和非肺癌患者的TAP檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行回顧性分析，對(duì)TAP不同截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男苓M(jìn)行了探討。
對(duì)象與方法
一、研究對(duì)象
選我院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科 2018年4月至 2018年7月經(jīng)治的肺癌患者176例，年齡34～84歲，平均年齡63歲；其中男性136例(77.3%)，女性40例(22.7%)；腺癌56例(31.8%)，鱗癌64例(36.4%)，小細(xì)胞癌39例(22.2%)，未分類癌17例(9.6%)。另收集同時(shí)期經(jīng)治的非肺癌患者113例，年齡26～91歲，平均年齡63歲；其中男性70例(61.9%)，女性43例(38.1%)；慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD) 18例(15.9%)，肺結(jié)核(pulmonary tuberculosis, TB)20例(17.7%)，特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化(idiopathic pulmonary interstitial fibrosis, IPF)9例(8.0%)，肺部感染60例(53.1%)，其它病種6例(5.3%)?；颊呷脒x標(biāo)準(zhǔn)：①所有肺癌患者均經(jīng)電子支氣管鏡或經(jīng)皮肺穿刺活檢行病理學(xué)檢查確診；②所有肺癌患者及非肺癌患者均進(jìn)行TAP檢測(cè)。
二、研究方法
對(duì)所有入選的肺癌患者及非肺癌患者檢測(cè)到的TAP結(jié)果進(jìn)行分析，判定理想截?cái)嘀?，并與TAP檢驗(yàn)報(bào)告解讀及處理建議所提供的截?cái)嘀迪啾容^，探討這兩種截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男堋?/p>
所有肺癌患者及非肺癌患者均清晨空腹，予5 ml注射器抽取靜脈血3 ml，采用由浙江瑞生醫(yī)療儀器廠提供的綜合診斷儀和TAP凝聚劑，用凝聚素親和法進(jìn)行TAP檢測(cè)。檢測(cè)時(shí)使用其公司的原裝配套試劑盒，并嚴(yán)格按照試劑盒的說明進(jìn)行。
三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié) 果
一、肺癌組與非肺癌組的年齡、性別、TAP及構(gòu)成類型特點(diǎn)
經(jīng)檢驗(yàn)分析顯示，肺癌組與非肺癌組相比較，兩組在年齡方面沒有明顯差異(P=0.635)，具有可比性；而在性別方面，兩組相比較，肺癌組男性患者人數(shù)高達(dá)77.3%，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.005)。另外，經(jīng)單因素方差分析，發(fā)現(xiàn)肺癌組TAP(171.82±36.26)明顯高于非肺癌組(158.54±32.61)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002)。
二、肺癌患者TAP理想截?cái)嘀凳?70 μm2
通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，TAP用于排查肺癌患者的理想截?cái)帱c(diǎn)是170 μm2，敏感度54.55%，特異度64.60%，ROC曲線下的面積(AUC)是0.622(標(biāo)準(zhǔn)誤0.034，95%可信區(qū)間0.554-0.689，P<0.001)，見表1、圖1。
表1 TAP不同截?cái)帱c(diǎn)的敏感度、特異度和似然比
注：a理想截?cái)嘀?/p>
圖1 TAP的ROC曲線
三、TAP不同截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男鼙容^
根據(jù)TAP檢驗(yàn)報(bào)告解讀及處理建議，TAP檢驗(yàn)結(jié)果可解讀為三個(gè)級(jí)別：①TAP≤121 μm2：說明被檢者體內(nèi)TAP含量正常，無明顯凝聚物，或腫瘤患者治療有效，或接近或進(jìn)入終末期的腫瘤患者；②121～225 μm2：說明被檢者體內(nèi)TAP含量異常，凝聚物較小，存在腫瘤風(fēng)險(xiǎn)；③≥225 μm2：說明被檢者體內(nèi)TAP含量異常，凝聚物較大，腫瘤風(fēng)險(xiǎn)較大。為此，我們應(yīng)用其推薦值的三個(gè)區(qū)間分別對(duì)肺癌組、非肺癌組及肺癌組+非肺癌組進(jìn)行分析，計(jì)算各自陽性率，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)三組之間并無明顯的差異(P=0.577)。同理，我們將本文所得截?cái)嘀?，?70 μm2為界，按兩個(gè)區(qū)間分別對(duì)肺癌組、非肺癌組及肺癌組+非肺癌組進(jìn)行分析，計(jì)算各自陽性率，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)肺癌組54.55%與診斷一致，非肺癌組64.60%與診斷一致，而肺癌組+非肺癌組兩個(gè)區(qū)間分別是47.06%和52.94%，三組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.006)，見表2。
表2 TAP不同截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男鼙容^[n(%)]
討 論
異常糖鏈糖蛋白(TAP)最初是由烏克蘭科學(xué)院的伽利欣院士發(fā)現(xiàn)的，當(dāng)時(shí)將其與甲胎蛋白(AFP)進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，大大的提高了肝癌的檢出率[4]。后來，隨著研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)TAP的檢測(cè)是一種組合腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)技術(shù)，它以糖蛋白上的“異常糖鏈”作為識(shí)別位點(diǎn)，能夠一次性組合檢測(cè)幾十種TAP，如AFP、CEA、糖蛋白抗原系列(CA 系列)、堿性磷酸酶、人絨毛膜促性腺激素及酸性磷酸酶等[12]，所以TAP對(duì)全身腫瘤均具有很高的敏感性[13-18]。由于TAP可高濃度聚集多種腫瘤信號(hào)，具有靈敏度高、適用癌譜廣、痛苦小、易于普及等多種優(yōu)勢(shì)[19-21]，臨床上應(yīng)用越來越廣泛。尤其在肺癌領(lǐng)域，TAP臨床應(yīng)用日益增多[11, 22-25]，相關(guān)研究也逐漸開展起來。我們?cè)鴮?duì)腺癌、鱗癌及小細(xì)胞癌等不同病理類型的肺癌患者TAP水平，以及其與CEA、鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC)、糖類抗原125(CAl25)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)和細(xì)胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)等傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物的相關(guān)性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)TAP在肺腺癌患者中與傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物具有較好的正相關(guān)性[26]。那么，隨著TAP的臨床應(yīng)用和相關(guān)研究的開展，還有沒有急需解決的問題？答案是肯定的，如：怎樣解讀TAP檢測(cè)結(jié)果，TAP排查肺癌的效能如何等。
為更好的解讀TAP檢測(cè)結(jié)果，本文通過回顧性分析，對(duì)TAP在肺癌領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)行了初步探討。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與非肺癌患者相比較，肺癌患者TAP明顯高于前者。進(jìn)一步通過ROC曲線分析可以得出，TAP用于排查肺癌患者的理想截?cái)帱c(diǎn)是170 μm2。我們將此截?cái)嘀?170 μm2)與TAP檢驗(yàn)報(bào)告解讀及處理建議所提供的截?cái)嘀?≤121 μm2、121～225 μm2、≥225 μm2)分別應(yīng)用于肺癌組、非肺癌組及肺癌組+非肺癌組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這兩種截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男懿煌?，前者在三組間存在顯著性差異，而后者在三組之間并無明顯差別。那么，170 μm2是否具有很好的排查肺癌的效能呢？從本文中可以看出，TAP的ROC曲線下面積是0.622，雖然其在0.5～1之間，但是根據(jù)Swets判斷標(biāo)準(zhǔn)[27-30]，面積在0.5以下，說明實(shí)驗(yàn)沒有診斷價(jià)值，面積在0.5～0.7之間有較低的準(zhǔn)確性，面積在0.7～0.9之間具有一定的準(zhǔn)確性，因此可以認(rèn)為，170 μm2這個(gè)截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男苓€是比較低的。本文數(shù)據(jù)表明，以170 μm2作為截?cái)嘀担伟┙M、非肺癌組及肺癌組+非肺癌組的陽性率及陰性率分別是54.55%與45.45%、64.6%與35.4%、47.06%與52.94%，雖然他們的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是由于陽性率較低，而陰性率又太高，顯然很難滿足臨床需要。
本研究通過臨床數(shù)據(jù)分析，對(duì)不同截?cái)嘀档腡AP排查肺癌效能進(jìn)行了初步探討，獲得了初步研究結(jié)果，但是由于本研究樣本量較少，研究對(duì)象存在性別差異，也沒有納入正常人群進(jìn)行校正，對(duì)研究結(jié)果的可靠性存在一定的影響，具體程度不得而知，尚需今后擴(kuò)大樣本量、擴(kuò)大研究人群進(jìn)一步研究。
綜上所述，肺癌患者TAP明顯高于非肺癌患者，其對(duì)肺癌的排查具有一定的參考價(jià)值，但是，TAP不同截?cái)嘀蹬挪榉伟┑男苁遣煌?，如僅將TAP單獨(dú)應(yīng)用于肺癌領(lǐng)域，其效能并不高，這一點(diǎn)需引起臨床注意。
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