朱江

（紹興市中醫(yī)院 重癥醫(yī)學(xué)，浙江 紹興 312499）

心力衰竭發(fā)病機(jī)制較復(fù)雜，其臨床癥狀、體征等缺乏特異性，發(fā)病率、住院率及死亡率較高，臨床常用檢查方法不能很好的評估患者病情[1]。MicroRNA（miRNA）可介導(dǎo)多種病理生理過程，其在冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。ㄒ韵潞喎Q冠心病）、心力衰竭等心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展中具有重要意義[2]。miR-155在冠心病患者血清中水平升高[3-4]。但miR-155在心肌梗死后心力衰竭患者中的水平及意義尚不清楚。本文對心肌梗死后心力衰竭患者血清miR-155水平進(jìn)行研究，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月—2017年12月紹興市中醫(yī)院收治的陳舊性心肌梗死后心力衰竭患者作為心力衰竭組，陳舊性心肌梗死無心力衰竭患者作為心肌梗死組，健康體檢者作為對照組，每組80例。心力衰竭組：男性48例，女性32例；年齡（63.31±7.29）歲。心肌梗死組：男性46例，女性34例；年齡（62.79±7.42）歲。對照組：男性45例，女性35例，年齡（63.41±7.13）歲。Framingham心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)：患者有基礎(chǔ)心血管疾病病史，休息或運(yùn)動時(shí)出現(xiàn)乏力、呼吸困難及下肢浮腫等癥狀；有呼吸急促、心動過速、胸腔積液、頸靜脈壓力增高、肺部啰音、外周水腫及肝腫大等體征；有心臟雜音、第三心音、心腔擴(kuò)大、超聲心動圖異常及利鈉肽水平升高等心臟功能、結(jié)構(gòu)異常證據(jù)；收縮性或舒張性心力衰竭特征，則可做出心力衰竭診斷。納入標(biāo)準(zhǔn)：心力衰竭組和心肌梗死組均有陳舊性心肌梗死，心力衰竭組符合Framingham心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，心肌梗死組不符合心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)；對照組身體健康。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠期及哺乳期女性；嚴(yán)重肝腎功能障礙；患先天性心臟病、肥厚性心肌病及主動脈夾層等其他心臟疾??；心源性休克、嚴(yán)重心律失常及心源性暈厥史；惡性腫瘤、嚴(yán)重感染性疾病及拒絕參與。3組年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

收集患者年齡、性別、實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)及心功能等臨床資料。

1.2.1 血清miR-155水平測定抽取3組外周靜脈血4 ml，與乙二胺四乙酸抗凝管中放置15 min，3 000 r/min離心10 min，取上清液置于環(huán)氧樹脂管中，提取血清總RNA（試劑盒購自美國Sigma公司），采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR）（試 劑 盒 購 自 美國Sigma公司）測定血清miR-155（引物由廣州復(fù)基因有限公司設(shè)計(jì)合成）水平。miR-155引物，正向引物：5，-TGCCTCGAACTGCACTCGTAG-3；反向引物：5，-GCGAGCAGAGAATAATAGGAC-3。以U6為內(nèi)參照，反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性5 s，60℃變性20 s，62℃退火1 s，72℃延伸1 s，共40個(gè)循環(huán)，血清miR-155以2-ΔΔCt法表示。

1.2.2 心功能測定采用超聲心動圖（德國西門子-18彩色多普勒超聲顯像儀）測定左心室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fraction,LVEF）、左室后壁厚度（left ventricular posterior wall thickness,LVPW）及左室舒 張 末 期 內(nèi) 徑（left ventricular end diastolic diameter,LVEDD）。所有患者由2名經(jīng)驗(yàn)豐富的超聲科醫(yī)生進(jìn)行超聲心動圖檢查，采用常規(guī)超聲心動圖的檢查方法于胸骨旁左心長軸切面，用M型超聲在左室腱索水平測量LVPW和LVEDD，用雙平面改良Simpson法于心尖四腔心切面測量LVEF。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用t檢驗(yàn)或方差分析，進(jìn)一步兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以構(gòu)成比或率（%）表示，比較用χ2檢驗(yàn)，繪制ROC曲線，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組血清miR-155水平比較

對照組、心肌梗死組、心力衰竭組血清miR-155水 平 分 別 為（1.00±0.11）、（1.42±0.17）和（1.87±0.16），經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=682.162，P=0.000）；心力衰竭組患者血清miR-155水平高于對照組和心肌梗死組（P＜0.05），心肌梗死組患者血清miR-155水平高于對照組（P＜0.05）。

2.2 血清miR-155對心肌梗死后心力衰竭的診斷價(jià)值

血清miR-155診斷心肌梗死后心力衰竭的ROC曲線下面積為0.921（95% CI：0.842，0.963），臨界值為1.670，敏感性為88.73%（95% CI：0.375，0.964），特異性為92.14%（95% CI：0.792，0.976）。以血清miR-155≥1.67（臨界值）為高表達(dá)，＜1.67為低表達(dá)，則miR-155高表達(dá)51例，低表達(dá)29例。見圖1。

2.3 血清miR-155與心肌梗死后心力衰竭患者一般情況和生物化學(xué)指標(biāo)的關(guān)系

miR-155高表達(dá)組和miR-155低表達(dá)組患者年齡、性別、空腹血糖（fasting blood sugar,FPG）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低 密 度 脂 蛋 白 膽 固 醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、肌酐（Creatinine，Cr） 及甘油三酯（Triglyceride,TG）比較，經(jīng)t或χ2檢驗(yàn)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。miR-155高表達(dá)組和miR-155低表達(dá)組患者氨基N末端B型腦鈉肽前體（N terminal pro B type natriuretic peptide,NT-proBNP）水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；miR-155高表達(dá)組高于miR-155低表達(dá)組。見表1。

圖1 血清miR-155診斷心肌梗死后心力衰竭的ROC曲線

表1 兩組患者一般情況和生物化學(xué)指標(biāo)比較

2.4 兩組患者超聲心動圖檢查結(jié)果比較

miR-155高表達(dá)組和miR-155低表達(dá)組LVEF和LVEDD水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；miR-155高表達(dá)組LVEF低于miR-155低表達(dá)組，miR-155高表達(dá)組LVEDD高于miR-155低表達(dá)組。兩組LVPW比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

2.5 兩組患者心功能分級構(gòu)成比比較

miR-155高表達(dá)組與miR-155低表達(dá)組心功能分級構(gòu)成比比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=23.854，P=0.000）；miR-155高表達(dá)組Ⅲ、Ⅳ級患者比例高于miR-155低表達(dá)組。見表3。

表2 兩組患者超聲心動圖檢查結(jié)果比較（±s）

表2 兩組患者超聲心動圖檢查結(jié)果比較（±s）

組別 n LVEF/% LVPW/mm LVEDD/mm miR-155高表達(dá)組 51 28.78±1.87 11.53±1.67 71.24±8.57 miR-155低表達(dá)組 29 32.12±1.94 10.94±1.82 54.35±8.46 t值 7.577 1.470 8.513 P值 0.000 0.146 0.000

表3 兩組患者心功能分級構(gòu)成比比較 例（%）

3 討論

冠心病是中老年人死亡的主要原因之一，其中急性心肌梗死病情危重，因此受到重視。心肌梗死指因冠狀動脈痙攣或冠狀動脈斑塊破裂引起的冠狀動脈血管急性持續(xù)閉塞而造成的心肌組織缺血缺氧，從而導(dǎo)致心肌壞死的疾病。隨著血管成形術(shù)和新型藥物的廣泛應(yīng)用，多數(shù)心肌梗死患者得到有效救治，但有部分患者經(jīng)歷心室的不良重構(gòu)，增加心肌梗死后心力衰竭的發(fā)生[6]。因心肌梗死后心力衰竭住院率和病死率比較高，早期進(jìn)行診斷和治療具有重要意義。目前臨床常用的評估心力衰竭嚴(yán)重程度的方法有超聲、心電圖、心室射血分?jǐn)?shù)、步行實(shí)驗(yàn)及心臟耐力實(shí)驗(yàn)等，但由于心力衰竭的臨床癥狀和體征不典型，常規(guī)方法不能很好的評估患者病情。

miRNA為內(nèi)源性非編碼小分子單鏈RNA，其機(jī)制為通過降解目標(biāo)mRNA或抑制目標(biāo)mRNA的翻譯而發(fā)揮生物學(xué)作用[7]。miRNA可參與細(xì)胞的增殖、分化、凋亡及組織發(fā)育等多種病理生理過程的調(diào)節(jié)，在心血管疾病的發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用[8]。miR-155是miRNA家族成員之一，其在B細(xì)胞、T細(xì)胞、單核細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞中表達(dá)，參與細(xì)胞的增殖、分化、凋亡及組織發(fā)育等過程的調(diào)節(jié)[9]。miR-155為抑癌基因，在多種惡性腫瘤中表達(dá)異常[10-11]。miR-155在造血和免疫調(diào)節(jié)中也具有重要作用[12-13]，其還參與肺纖維化過程，對肺纖維化具有促進(jìn)作用[14]。miR-155在冠心病的發(fā)病過程中也具有重要作用[15]，miR-155可調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞凋亡，通過巨噬細(xì)胞調(diào)節(jié)對冠心病的發(fā)生產(chǎn)生影響；miR-155與免疫炎癥反應(yīng)關(guān)系也比較密切，可參與天然免疫應(yīng)答反應(yīng)和獲得性免疫應(yīng)答反應(yīng)，通過促進(jìn)炎癥反應(yīng)促進(jìn)冠心病的發(fā)展[16-17]。

血清miR-155診斷心肌梗死后心力衰竭的ROC曲線下面積結(jié)果表明，血清miR-155在心肌梗死后心力衰竭的診斷中具有重要價(jià)值，可作為心肌梗死后心力衰竭的潛在診斷指標(biāo)。NT-proBNP在體外可穩(wěn)定存在24 h，半衰期為60～120 min，具有較高的敏感性，是評估心力衰竭病情嚴(yán)重程度的生物標(biāo)志物。NTproBNP水平越高表示心力衰竭的進(jìn)展越快[18]。LVEF是診斷心力衰竭的重要指標(biāo)，可敏感的反應(yīng)患者的心室功能，為心臟收縮期和舒張期的比值。當(dāng)LVEF＞50%時(shí)表示患者心功能較差[19]；LVEDD也是評估心臟功能的重要指標(biāo)，LVEDD水平升高提示心臟功能減退[20]； 心功能分級也反映患者的心臟功能狀態(tài)，心功能分級越高，表明心功能越差[21]。本研究結(jié)果表明，血清miR-155可作用心肌梗死后心力衰竭病情嚴(yán)重程度的標(biāo)志物。miR-155低表達(dá)組和miR-155高表達(dá)組LVPW比較無差異，考慮可能與本文樣本量有限有關(guān)，需后續(xù)增加樣本量進(jìn)一步研究。

綜上所述，心肌梗死后心力衰竭患者血清miR-155水平升高，在心肌梗死后心力衰竭的診斷和病情評估中具有重要作用，有望成為心肌梗死后心力衰竭診斷和病情嚴(yán)重程度評估的標(biāo)志物。