李峰

【摘要】 目的：研究檢測p53蛋白在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)及意義。方法：在2017年9月-2018年9月選擇100例EGFR-Ⅱ呈陰性的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者作為觀察Ⅰ組，選擇100例EGFR-Ⅱ呈陽性的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者為觀察Ⅱ組，同期選擇100例乳腺組織正常的體檢者作為對照組。對以上各組p53蛋白水平進(jìn)行檢測和對比。結(jié)果：觀察Ⅰ組和觀察Ⅱ組的p53表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;觀察Ⅰ組、觀察Ⅱ組的p53表達(dá)陽性率均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中，檢測p53蛋白具有明顯的表達(dá)，且不會受到EGFR-Ⅱ表達(dá)的影響，因而在臨床診斷中有著重要的意義和價值。

【關(guān)鍵詞】 p53蛋白 人類表皮生長因子受體2 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌

[Abstract] Objective： To study the expression and significance of p53 protein in breast invasive ductal carcinoma. Method： From September 2017 to September 2018， 100 patients with EGFR-Ⅱ negative breast invasive ductal cancer were selected as observation group Ⅰ， 100 patients with EGFR-Ⅱ positive breast invasive ductal cancer were selected as observation group Ⅱ， and 100 patients with normal breast tissue were selected as control group. The levels of p53 protein in the above groups were detected and compared. Result： There was no significant difference in p53 expression between observation group Ⅰ and observation group Ⅱ （P>0.05）. But the positive rate of p53 expression in observation group Ⅰ and observation group Ⅱ were higher than those in control group （P<0.05）. Conclusion： In invasive ductal carcinoma of breast， the expression of p53 protein is obvious， and it is not affected by the expression of EGFR-Ⅱ， so it is of great significance and value in clinical diagnosis.

[Key words] p53 protein Human Epithelial growth Factor receptor 2 Invasive ductal carcinoma of mammary gland

First-authors address： The Central Hospital of Xiaogan， Xiaogan 432000， China

女性疾病當(dāng)中，包含著多種惡性腫瘤，其中乳腺浸潤性導(dǎo)管癌比較常見，近年來發(fā)病率也在不斷上升[1-2]。此類疾病隨著不斷進(jìn)展，可能會產(chǎn)生新的變化或轉(zhuǎn)移等，因此要盡早診出此類疾病，從而采取積極的措施控制和治療。p53、EGFR-Ⅱ均是診斷該病的重要指標(biāo)，臨床上一般通過觀察這幾種指標(biāo)的陰性或陽性表達(dá)，進(jìn)而判斷疾病。不過，如果受到一定因素的影響，這些指標(biāo)也能出現(xiàn)偏差，產(chǎn)生假陽性或假陰性等情況。所以，應(yīng)當(dāng)綜合考慮多種指標(biāo)，明確相互之間的關(guān)系，以提高診斷準(zhǔn)確率[3]?；诖耍疚脑?017年9月-2018年9月分別選擇EFGR-Ⅱ呈陰性和陽性，以及乳腺組織正常的體檢者各100例，研究檢測p53蛋白的表達(dá)和意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

在2017年9月-2018年9月選擇100例EGFR-Ⅱ呈陰性的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者作為觀察Ⅰ組，選擇100例EGFR-Ⅱ呈陽性的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者為觀察Ⅱ組，EGFR-Ⅱ陽性標(biāo)準(zhǔn)：（1）細(xì)胞膜可見棕色、黃色染色;根據(jù)顏色計分，1分：淡黃色;2分：黃色、棕黃色;3分：棕黑色。（2）根據(jù)染色細(xì)胞數(shù)占比計分，0分：<10%;1分：10%～30%;2分：30%～70%;3分：>70%。根據(jù)兩種計分結(jié)果計算成績，0分：陰性;1～6分：陽性[4]。同期選擇100例乳腺組織正常的體檢者作為對照組。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠期或哺乳期;合并其他嚴(yán)重婦科疾病;其他惡性腫瘤。300例研究對象中，觀察Ⅰ組年齡33～72歲，年齡（52.6±3.3）歲;觀察Ⅱ組年齡32～74歲，平均（52.8±3.2）歲;對照組年齡33～73歲，平均（52.5±3.4）歲。所有患者均知情同意。三組研究對象年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），有可比性。

1.2 方法

p53蛋白水平的檢測方法和步驟如下：使用福州邁新公司的DAB顯色劑、二抗、p53及EGFR試劑。采取標(biāo)準(zhǔn)方法獲取標(biāo)本，使用10%的中性福爾馬林溶液進(jìn)行24 h的固定。常規(guī)取材并透明脫水處理，用石蠟包埋，連續(xù)作4 μm厚度的切片。其中HE染色1片，利用光鏡觀察，依據(jù)WHO相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級。SP法免疫組織化學(xué)染色2片，利用光鏡觀察并判定結(jié)果[5]。

1.3 觀察指標(biāo)

對以上各組p53蛋白水平進(jìn)行檢測和對比。P53陽性標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞核可見棕色、黃色染色。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析和處理，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察Ⅰ組和觀察Ⅱ組p53表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;觀察Ⅰ組、觀察Ⅱ組的p53表達(dá)陽性率均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

3 討論

從本文的研究結(jié)果當(dāng)中能夠看出，在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者和健康者之間，p53蛋白表達(dá)存在顯著差異（P<0.05）。在EGFR-Ⅱ表達(dá)為陰性和陽性的不同條件下，p53的表達(dá)無顯著差異（P>0.05）。由此能夠看出，通過檢測p53蛋白的表達(dá)，能夠較為準(zhǔn)確地判斷出乳腺浸潤性導(dǎo)管癌，為患者疾病治療提供依據(jù)。乳腺浸潤性導(dǎo)管癌是一種較大的非特殊性異型腫瘤，臨床特征表現(xiàn)不豐富，因而在臨床診斷方面難度較大[6-8]。乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者中，p53基因?qū)休^為明顯的陽性表達(dá)，該基因處于17p13.1位置，有16～20 kb大小，有393個氨基酸構(gòu)成編碼蛋白，分子量53 000，屬于高度保守DNA序列。p53蛋白的野生型具有較短的半衰期，能夠被MDM2快速分解，p53的突變型，無法將MDM2表達(dá)有效激活，因而其對MDM2將不會發(fā)生負(fù)調(diào)控作用，因此在腫瘤細(xì)胞核當(dāng)中，會有p53的突變型聚集。所以，通過免疫組化方法，可在惡性腫瘤組織中檢出突變型p53蛋白[9]。

EGFR是一種Ⅰ型跨膜酪氨酸激酶生長因子受體，屬于單鏈跨膜糖蛋白，其中的氨基酸數(shù)量為1 186個，具體構(gòu)成包括了胞外配體結(jié)合區(qū)、跨膜區(qū)、胞內(nèi)酪氨酸激酶區(qū)[10-11]。EGFR-Ⅱ能夠發(fā)揮酪氨酸激酶活性，和B-細(xì)胞素、轉(zhuǎn)化生長因子α、EGF等發(fā)生特異性結(jié)合，進(jìn)而生成二聚體，將相應(yīng)信號傳導(dǎo)通路激活，對細(xì)胞從G期向S期的過渡加以促進(jìn)。同時，能夠?qū)⒓?xì)胞黏附性降低，作用于細(xì)胞的分化、運動、黏附、生存、侵襲等過程。在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌當(dāng)中，已經(jīng)廣泛發(fā)現(xiàn)了EGFR-Ⅱ的基因擴增、過度表達(dá)的情況。研究表明，腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤血管姓陳、預(yù)后不良等情況下，都可能會發(fā)生EGFR-Ⅱ過度表達(dá)的情況[12]。

利用免疫組化方法，對p53蛋白表達(dá)，以及EGFR-Ⅱ蛋白等進(jìn)行檢測，當(dāng)p53基因突變后，抑制細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的功能喪失，得到了促進(jìn)細(xì)胞增殖的新功能。同時EGFR-Ⅱ過表達(dá)的情況，也對腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生了促進(jìn)增值和抑制凋亡的效果，對腫瘤形成也有促進(jìn)作用。因此在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的發(fā)生與發(fā)展中，p53蛋白和EGFR-Ⅱ都發(fā)揮了較大的影響[13]。另外，在疾病發(fā)展、浸潤、侵襲、轉(zhuǎn)移等過程中，p53蛋白也發(fā)揮作用，可見腫瘤細(xì)胞突變p53蛋白，對于癌細(xì)胞浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等都有促進(jìn)的效果。浸潤性導(dǎo)管癌組織中的EGFR-Ⅱ表達(dá)，和p53蛋白表達(dá)之間并沒有顯著差異[14-15]。雖然二者在疾病的發(fā)生和發(fā)展中，都發(fā)揮了重要的影響，但二者可能是利用不同的信號傳導(dǎo)通路發(fā)揮作用，因而沒有顯著的相互影響。

綜上所述，乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中，檢測p53蛋白結(jié)果呈陽性，且不會受到EGFR-Ⅱ表達(dá)的影響，因而在臨床診斷中有著重要的意義和價值。

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（收稿日期：2019-05-30） （本文編輯：郎序瑩）