車宏偉,楊海寧,2,譚曉川,張宇佳,鄭穩(wěn)生*

(1.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院 藥物研究所 藥物傳輸技術(shù)及新型制劑北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京100050；2.安徽中醫(yī)藥大學(xué),安徽 合肥230012)

中藥白花蛇舌草(HDW)又叫鶴蛇草、羊須草、蛇總管、二葉律、竹葉菜等[1],始載于《廣西植物志》,源于茜草科植物白花蛇舌草Hedyotis diffusa(willd).[Oldenlandiadiffusa (Willd.)Roxb]的干燥全草,其性甘寒、微苦,具有清熱解毒、消痛散結(jié)、利尿除濕等作用,在中醫(yī)臨床常與其他藥物配伍使用治療各種癌癥[2],通常與半枝蓮、蒲公英成藥對使用[3]。鐘立敏等[4]研究表明,HDW能顯著抑制四氯化碳引起的谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高,加速肝細(xì)胞損傷的恢復(fù)。

HDW含有蒽醌類、黃酮類、萜類、多糖等多種化學(xué)成分,現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,其具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、抗化學(xué)誘變、抗炎抗菌、保肝利膽、鎮(zhèn)痛解毒等功效,尤其在抗腫瘤方面具有顯著的效果[5],但因其具體的抗腫瘤成分不明確,多以該藥的粗提部位,如水提部位、醇提部位、脂溶性提取部位等[6-7]進(jìn)行活性研究。

中藥抗癌在臨床上歷史悠久,中醫(yī)認(rèn)為：“難病多毒,怪病多痰?！睆奶嫡撝沃饕捎们鍩峄?常用山慈菇、仙鶴草、白花蛇舌草,體虛而邪入即“邪不祛,正必傷”采用扶正補(bǔ)虛法等手段,多用麥冬、太子參、沙參等[8]。王玨等[9]研究表明中藥貓眼草對人肝癌細(xì)胞HepG2有很強(qiáng)的抑制活性。熊燚等[10]對夏枯草提取物進(jìn)行研究,其結(jié)果表明對不同病理類型的甲狀腺癌細(xì)胞均有不同程度的抑制增殖作用。

近年來從中藥中分離純化得到的有效成分在生物活性方面具有明顯優(yōu)勢,如紫杉醇、長春新堿等已成為臨床常用的植物類化療藥。通過查閱參考文獻(xiàn)了解到,HDW不同溶劑提取部位具有不同的藥理活性,因此本文將HDW不同提取部位與抗腫瘤作用做一綜述,為抗癌藥活性成分的篩選提供目標(biāo)參考。

1 脂溶性部位

脂溶性部位是通過極性較小的有機(jī)溶劑提取,揮干溶劑所得,大部分脂溶性的成分都具有很好的活性,如治療白血病的靛玉紅。

本文通過查閱文獻(xiàn)得知,左琳[11]將HDW石油醚部位用于體外培養(yǎng)的人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞,結(jié)果顯示具有明顯的細(xì)胞毒性,由此可以判斷該藥可用于子宮內(nèi)膜癌的治療。何小女等[12]建立CCl4小鼠急性肝損傷模型,通過灌胃給予HDW的乙酸乙酯部位、生理鹽水做空白,檢測血清中ALT和T-Bil的含量,結(jié)果表明乙酸乙脂萃取部位大劑量組效果最明顯,提示HDW乙酸乙脂部位能有效地減輕肝細(xì)胞的損傷程度,維持肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的完整性,抑制肝臟受損。

許海順等[13]研究表明HDW乙酸乙酯部位、正丁醇部位均具有抗氧化、DPPH自由基清除能力,其中正丁醇部位抗氧化能力最強(qiáng),且呈現(xiàn)出濃度依賴關(guān)系。

2 水提部位

現(xiàn)代藥理試驗(yàn)證實(shí)HDW水提取物有良好的抑制腫瘤作用[14],曾永長等[15]發(fā)現(xiàn)水提部位主要含有多糖、寡糖、寡肽、對香豆酸等成分,其作用機(jī)制可能是直接抑制腫瘤生長或調(diào)節(jié)機(jī)體免疫從而實(shí)現(xiàn)抗腫瘤作用。陳秀珍[16]通過考察HDW水提部位對CEM細(xì)胞生長的行為來推測其作用機(jī)制,結(jié)果顯示HDW水提部位具有顯著抑制作用。孟繁欽等[17]通過體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)研究,發(fā)現(xiàn)HDW粗多糖對人肝癌SMMC-7721細(xì)胞與胃癌SGC-7901細(xì)胞均具有良好的抑制增殖作用。楊培民等[18]研究表明,HDW水提多糖可抑制體外培養(yǎng)人宮頸癌Hela細(xì)胞和肝癌Bel-7402細(xì)胞的生長。

朱大誠等[19-20]通過MTT實(shí)驗(yàn)表明HDW水部位,對白血病多藥耐藥細(xì)胞株CEM/VCR有顯著的生長抑制作用,且與用藥劑量、用藥時間具有依賴性,隨藥物作用時間延長或用藥劑量的增長,其抑制率增大,表明HDW水提物能夠抑制白血病CEM細(xì)胞生長,其作用機(jī)制可能與P53基因高表達(dá)呈正相關(guān),從而促進(jìn)白血病CEM細(xì)胞凋亡。孟慶宇等[21]研究發(fā)現(xiàn),HDW多糖可明顯抑癌基因mRNA表達(dá),降低bcl-xl促凋亡基因m RNA表達(dá),從而抑制人肝癌Bel7402細(xì)胞的生長。陳玉等[22]研究表明HDW總多糖對S180荷瘤小鼠具有較強(qiáng)的抗腫瘤作用。朱大誠等[23-24]研究表明HDW水提物藥物濃度在0.005 μg/m L作用于48

h后能明顯抑制K562細(xì)胞的生長,并且對多藥耐藥細(xì)胞HL-60/ADR的生長具有極強(qiáng)的抑制作用。付丹丹等[25]對HDW粉末進(jìn)行水煎煮得到提取液,結(jié)果表明提取液能夠抑制乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖,對正常的乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A無影響,因此臨床可以用于治療乳腺癌。

3 醇提部位

林久茂等[26]采用85%乙醇對HDW進(jìn)行提取,獲得的提取部位能顯著抑制大腸癌HCT-8/5-Fu細(xì)胞的活力及細(xì)胞遷移、黏附的作用,明顯抑制ABCG2的mRNA表達(dá)。徐丹等[27]采用70%乙醇回流和石油醚脫色兩種不同的提取方法,按照溶劑極性由低到高萃取得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物,所得樣品用比色法檢測其抗5-LOX活性。最終發(fā)現(xiàn)脫色后的白花蛇舌草抗5-LOX活性較好,抗炎主要活性在乙酸乙酯部位,抑制率為66.98%,結(jié)果表明,HDW乙酸乙酯部位可作為抗炎藥物篩選部位。

呂昕等[28]以95%乙醇制備的HDW提取物結(jié)果,表明其在體外具有較好的抑制人體肺腺腫瘤細(xì)胞增殖的作用。靳祎祎等[29]探討HDW乙醇提取物對大腸癌耐藥裸鼠移植瘤生長的影響及其分子機(jī)制,結(jié)果表明其醇提物可以抑制大腸癌耐藥裸鼠抑制瘤的生長,在體內(nèi)對大腸癌耐藥移植瘤具有顯著抑制作用,其機(jī)制可能與調(diào)控大腸癌耐藥細(xì)胞的增殖相關(guān)基因表達(dá)有關(guān)。

葉榕等[30]研究表明HDW乙醇提取物能抑制人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞增殖及Hedgehog信號的傳導(dǎo)。張林超等[31]考察了不同劑量組HDW 80%乙醇提取物,對人腎癌786-0細(xì)胞體外生長及體內(nèi)成瘤的影響,結(jié)果表明各劑量組均對人腎癌786-0細(xì)胞起到明顯的抑制作用。肖云等[32]研究表明小鼠口服給藥HDW乙醇提取物,在一定劑量范圍內(nèi),對小鼠CT26結(jié)直腸癌有明顯地抑制作用,能減緩小鼠結(jié)直腸癌移植瘤的生長,推測其作用機(jī)制可能通過抑制腫瘤血管生成而發(fā)揮抗腫瘤作用。

李濤等[33]采用打孔法和滴注法考察了白花蛇舌草的95%乙醇提取物對革蘭陽性菌和革蘭陰性菌有一定的抑制效果,發(fā)現(xiàn)隨著提取物濃度的增加,其抑菌效果顯著增強(qiáng),尤其對綠膿桿菌的抑菌效果最強(qiáng),大腸桿菌次之,對鐮刀菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果較差,表明HDW抗革蘭陰性桿菌的醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景良好。

王宇翎等[34]發(fā)現(xiàn)HDW總黃酮對球菌和桿菌均具有不同程度抑菌和殺菌作用,且對球菌的作用優(yōu)于桿菌。李明[35]通過研究多糖類化合物對游泳小鼠的抗疲勞作用,證實(shí)了白花蛇舌草多糖能顯著提高肌糖原和肝糖原的貯存,提高血清中SOD水平并降低MDA水平,顯著延長了游泳小鼠的游泳時間。

鄧鳳蕓等[36]采用85%乙醇提取了不同濃度的白花蛇舌草提取物,并用該提取物對體外結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞株、結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞株進(jìn)行抑制實(shí)驗(yàn),對比分析不同濃度的提取物對細(xì)胞株的影響,結(jié)果顯示不同濃度的提取物均可抑制細(xì)胞株的增殖,起到了體外抗腫瘤作用。

4 討論

通過分析文獻(xiàn)可知,大部分從HDW的脂溶性部位、水提部位和醇提部位三方面進(jìn)行研究,結(jié)果表明三者均具有不同的抗腫瘤活性及臨床應(yīng)用,其中乙醇提取物抗腫瘤效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)好于水提取物[37]。劉汝青等[38]通過比較了不同的HDW提取物(水溶性提取物、脂溶性提取物和粗多糖)對鼻咽癌細(xì)胞株CNE1的細(xì)胞毒性,結(jié)果表明,HDW不同提取物均有較好的抗鼻咽癌細(xì)胞株CNE1的作用,其中脂溶性提取物抗鼻咽癌作用最強(qiáng)。

表1 不同提取部位及抗腫瘤情況

通過以上可知,HDW不同提取部位具有廣譜抗癌性,不同溶劑提取部位有特定的抗癌類型(見表1),其中水提取抗癌類型較醇提部位和脂溶性多,并且水提多糖可用于宮頸癌、肝癌的治療。白花蛇舌草作為常用抗癌藥物不僅在臨床應(yīng)用歷史悠久,而且較其他植物資源地理分布廣泛充足。目前,HDW抗癌成分的分析研究還處于初級階段,臨床常用抗癌藥大部分為合成化學(xué)藥物,其副作用大,患者難以接受,因此,對純天然植物提取、分離、制備開發(fā)副作用小、成本低廉的腫瘤抑制劑尤為重要。本文通過對白花蛇草不同部位的抗癌活性作用進(jìn)行整理總結(jié),為不同腫瘤抑制劑的活性成分篩選提供依據(jù)。