陳巧佩 楊欽靈 潘平山 趙江陽 周暉登 王立芳

(廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院1 檢驗科，2 產(chǎn)科，南寧市 530003，電子郵箱：chenqiaopei@163.com)

目前，體外受精-胚胎移植(invitrofertilization-embryo transfer，IVF-ET)已成為治療不孕癥的主要手段，術后臨床妊娠率不斷提高，但移植術后早產(chǎn)率也與之俱增。廣西地處中國的西南部，孕婦早產(chǎn)率，尤其是IVF-ET術后的早產(chǎn)率更高，嚴重影響了優(yōu)生優(yōu)育的推進[1]。因此，積極尋找早產(chǎn)的病因是產(chǎn)科醫(yī)生面臨的重要問題。目前引起早產(chǎn)的原因尚未完全明了，可能與遺傳、免疫、感染等因素相關[2]。本文檢測IVF-ET術后早產(chǎn)孕婦及自然妊娠早產(chǎn)孕婦、孕周相當正常妊娠孕婦的外周血中干擾素(interferon，IFN)-γ、白細胞介素(interleukin，IL)-2、IL-4的表達差異，探討免疫調節(jié)異常與IVF-ET術后早產(chǎn)的關系，為預防、診治IVF-ET術后早產(chǎn)提供一定的理論與臨床參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2015～2017年在我院分娩的79例產(chǎn)婦的資料，均排除嚴重心肝腎疾病、糖尿病、甲狀腺功能異常、腫瘤、血液性疾病及免疫性疾病及正在服用免疫藥物者。根據(jù)妊娠結局分為IVF-ET術后早產(chǎn)組32例，自然妊娠早產(chǎn)組31例，正常足月妊娠組16例。根據(jù)有無感染(絨毛炎癥、宮內感染)，將IVF-ET術后早產(chǎn)和自然妊娠早產(chǎn)產(chǎn)婦分為感染組及非感染組。IVF-ET術后早產(chǎn)感染組16例，年齡(29.68±2.24)歲，分娩時孕周(32.69±3.05)周；IVF-ET術后早產(chǎn)組非感染組16例，年齡(30±2.48)歲，分娩時孕周(33±2.22)周；自然妊娠早產(chǎn)感染組15例，年齡(28.6±2.75)歲，分娩時孕周(31.07±3.15)周，自然妊娠早產(chǎn)非感染組16例，年齡(28.88±2.78)歲，分娩時孕周(31.63±3.14)周；正常妊娠組均為無臨床感染的孕婦，年齡(28.25±1.61)歲，分娩時孕周(39.13±1.09)周。5組年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 細胞因子檢測方法 各組產(chǎn)婦于妊娠20～25周時采集其外周靜脈血2～4 ml，取血清置于-80℃中保存?zhèn)溆?。采用定量酶?lián)免疫吸附法檢測外周血血清IFN-γ、IL-2、IL-4水平，酶聯(lián)免疫吸附試劑盒購自eBioscience公司(IFN-γ批號：85-BMS228，IL-2批號：85-BMS221/2，IL-4批號：85-BMS225/2)，嚴格按照產(chǎn)品說明書操作。

1.3 統(tǒng)計學分析 應用SPSS 16.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析。計量資料以(x±s)表示，多組均數(shù)比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t法。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

5組IFN-γ水平比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。IVF-ET術后早產(chǎn)感染組、自然妊娠早產(chǎn)感染組、正常妊娠組IL-4水平高于IVF-ET術后早產(chǎn)非感染組、自然妊娠早產(chǎn)非感染組(均P<0.05)；IVF-ET術后早產(chǎn)感染組IL-4水平高于自然妊娠早產(chǎn)感染組、正常足月妊娠組(均P<0.05)；正常妊娠組、自然妊娠早產(chǎn)非感染組、IVF-ET術后非感染組IL-4水平依次降低(均P<0.05)。各組均未檢測到IL-2表達。見表1。

表1 各組血清IFN-γ、IL-2及IL-4水平比較(x±s，pg/ml)

注： LDL表示檢測低于IL-2的下限值(18.8 pg/ml)，無法得到具體數(shù)值。*除自然妊娠早產(chǎn)感染組與正常足月妊娠組外，其余組間兩兩比較均P<0.05。

3 討 論

早產(chǎn)是導致80%圍生兒死亡及50%以上存活新生兒患病的主要原因[3-4]。早產(chǎn)的機制復雜，與宮內感染、子宮頸口關閉不全、妊娠合并癥、免疫失衡等有關[2]。IVF-ET術后的臨床妊娠率不斷提高，但移植術后自發(fā)早產(chǎn)率也隨之增高，其早產(chǎn)率為48.4%[1]。我院近5年IVF-ET術后早產(chǎn)率為25%～30%，遠高于5%～15%的自然妊娠早產(chǎn)率[3]。因此，分析IVF-ET術后自發(fā)早產(chǎn)的相關因素，對指導臨床預防早產(chǎn)有重要意義。血清中細胞因子表達異常提示機體免疫功能失調，但其在早產(chǎn)產(chǎn)婦中的變化及其意義尚不清楚。

細胞因子是機體免疫細胞和非免疫細胞合成和分泌的小分子多肽類因子，既是炎癥介質又是免疫調節(jié)因子。Th1細胞介導細胞免疫，主要分泌IL-2、IFN-γ、腫瘤壞死因子-α、IL-12等因子；Th2細胞介導體液免疫，主要分泌IL-4、IL-6、IL-10等因子。Th1型細胞因子有免疫殺傷作用，可抑制胚胎著床、滋養(yǎng)細胞生長，對妊娠無益；而Th2型細胞因子主要介導B細胞增殖，抗體產(chǎn)生，同種排斥反應的免疫耐受，有利于妊娠[5]。因此，正常妊娠時以Th2型細胞因子為主，自然流產(chǎn)時則出現(xiàn)Th1型細胞因子增多的現(xiàn)象。有研究結果顯示，原因不明之復發(fā)性流產(chǎn)產(chǎn)婦的外周血IL-2、IFN-γ水平升高[6]。 Kedzierska-Markowicz等[7]也發(fā)現(xiàn)，早產(chǎn)產(chǎn)婦宮頸分泌物中的IL-1β、 IL-8、 IFN-γ水平高于足月產(chǎn)產(chǎn)婦。但本研究結果顯示，各組產(chǎn)婦IFN-γ水平無明顯差異(P>0.05)，因此IFN-γ水平與早產(chǎn)的關系仍需進一步證實；在各組產(chǎn)婦血清中均沒有檢測到IL-2，可能與試劑盒的檢測靈敏度相關。此外，IVF-ET術后早產(chǎn)非感染組、自然妊娠早產(chǎn)非感染組IL-4水平均低于正常足月妊娠組(均P<0.05)，且以IVF-ET術后早產(chǎn)非感染組IL-4水平最低(P<0.05)。提示在無感染的情況下，IL-4水平降低可能與IVF-ET術后早產(chǎn)有關，這與既往研究結果相似[6]。

IL-4 由活化的Th2細胞產(chǎn)生，是一種抗炎性因子，可誘導T、B淋巴細胞的活化增殖，促進感染的發(fā)生，且與感染的嚴重程度呈正相關[8]。此外，IL-4通過拮抗IFN-γ活性作用而抑制細胞介導的免疫反應，抑制Th1細胞活化，促進T細胞向Th2分化，Th2細胞形成后分泌更多的IL-4，形成循環(huán)[9]。在本研究中，IVF-ET術后早產(chǎn)感染組、自然妊娠早產(chǎn)感染組血IL-4水平均高于IVF-ET術后早產(chǎn)非感染組、自然妊娠早產(chǎn)非感染組，且IVF-ET術后早產(chǎn)感染組血IL-4水平均高于自然妊娠早產(chǎn)感染組、正常足月妊娠組(均P<0.05)，這可能是感染誘發(fā)并激活了自然殺傷細胞等免疫細胞，導致IL-4水平升高，因此在IVF-ET術后，感染所導致的IL-4過度表達也可誘發(fā)早產(chǎn)，這與Dudley等[10]的研究結果相似。

綜上所述，IL-4水平異?？赡芘cIVF-ET術后早產(chǎn)有關，在無感染的情況下，IL-4水平下降或可引起早產(chǎn)，而感染所導致的IL-4過度表達也可誘發(fā)早產(chǎn)。