劉云濤 何建剛 肖長義 曾鈺欽 潘敬芳 吳嬌

(1三峽大學(xué)附屬仁和醫(yī)院內(nèi)分泌科，湖北 宜昌 443000；2湖北長盛川青磚茶研究所)

早期研究發(fā)現(xiàn)黑茶提取物可促進(jìn)糖尿病(DM)大鼠受損胰島細(xì)胞的增殖，并且其抗氧化應(yīng)激作用也對胰島β細(xì)胞發(fā)揮了保護(hù)作用〔1〕。新近臨床研究發(fā)現(xiàn)飲茶能改善超重、肥胖的多囊卵巢綜合征患者的胰島素抵抗〔2〕，并且飲茶對改善人體脂質(zhì)代謝具有重要作用〔3〕，但其確切機制尚未闡明。湖北長盛川青磚茶是在古峽州茶區(qū)-三峽地區(qū)特有的黑茶。本研究旨在觀察湖北長盛川青磚茶對2型DM(T2DM)患者胰島素抵抗、脂代謝的影響。

1 對象與方法

1.1研究對象 2016年5月至2018年3月三峽大學(xué)附屬仁和醫(yī)院內(nèi)分泌科門診及住院部患者，體檢中心體檢者。所有人群行口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)，篩選出正常糖耐量個體40例為對照組，平均年齡(58.35±4.78)歲，男21例，女19例。T2DM合并血脂異?；颊呓o予胰島素類似物降糖，使空腹血糖(PG)控制在5.0～7.2 mmol/L，餐后2 h血糖5.0～10.0 mmol/L。血糖達(dá)標(biāo)后胰島素用量(insulin dosage)不超過40 U/d。胰島素用量超過40 U/d者未進(jìn)入本研究。血脂異常入選標(biāo)準(zhǔn)：參照2016年中國成人血脂異常防治指南。血糖達(dá)標(biāo)穩(wěn)定2 w后將DM合并血脂異常者隨機分為長盛川青磚茶組和基礎(chǔ)治療組。符合條件的T2DM合并血脂異常者77例，平均年齡(59.92±4.92)歲，男40例，女37例，隨機分為青磚茶組39例、基礎(chǔ)治療組38例。T2DM患者均符合1999年WHO T2DM的診斷標(biāo)準(zhǔn)，均DM飲食，入選者均排除1型DM、特殊類型DM。通過血常規(guī)、尿常規(guī)、大便常規(guī)及潛血試驗、胸片、肝腎功能、腫瘤標(biāo)志物測定排除肝腎功能不全及腫瘤、感染。在3個月內(nèi)未發(fā)生DM酮癥酸中毒及其他急性并發(fā)癥。

1.2研究方法 相關(guān)生化指標(biāo)測定：受試者禁食8 h后于清晨抽取空腹肘靜脈血測FPG、血脂、糖化血紅蛋白(HbA1c)。HbA1c用日本ARKRAY HA8160分析儀及其配套試劑檢測；FPG、腎功能、血脂使用美國雅培ARCHITECT C8000全自動生化分析儀檢測。胰島素使用德國羅氏Cobase411全自動電化學(xué)發(fā)光分析儀檢測。白細(xì)胞介素(IL)-6使用weiBioTek Cere酶標(biāo)儀酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測。對氧磷酶(pon)3試劑盒購自武漢華美生物工程有限公司，采用ELISA檢測。鳶尾素(Irisin)采用ELISA檢測，使用美國R&D公司試劑盒。

1.3藥物治療及干預(yù) 長盛川青磚茶組在使用胰島素治療同時，飲用長盛川青磚茶茶包30 g/d，持續(xù)3個月，基礎(chǔ)治療組胰島素類似物治療?；颊呔鵇M、低脂飲食，經(jīng)胰島素使用劑量調(diào)整培訓(xùn)后門診和(或)電話隨訪調(diào)整insulin dosage，調(diào)控血糖。進(jìn)入本研究前所有研究對象未飲用其他茶類，有飲用者停飲2個月后進(jìn)入本研究。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行t檢驗、方差分析及Pearson相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1一般臨床資料和臨床生化指標(biāo)的比較 青磚茶組、基礎(chǔ)治療組胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)、空腹胰島素(FIns)、IL-6、三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平顯著高于對照組(P<0.05或P<0.01)，pon3、Irisin、超氧化物歧化酶(SOD)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)顯著低于對照組(P<0.05或P<0.01)，見表1。

表1 三組臨床、生化指標(biāo)水平比較

與對照組比較:1)P<0.05，2)P<0.01

2.2相關(guān)、回歸分析 血清pon3、Irisin、SOD水平與HOMA-IR呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05或P<0.01)，F(xiàn)PG、HbA1c、FIns、IL-6與HOMA-IR呈顯著正相關(guān)(P<0.05或P<0.01)；回歸分析顯示：pon3、Irisin、IL-6是HOMA-IR的獨立影響因素。回歸方程：HOMA-IR=-4.278×pon3-1.152×Irisin+1.058×IL-6+202.321。HOMA-IR與其他指標(biāo)的相關(guān)分析，見表2，HOMA-IR影響因素的多元逐步回歸分析，見表3。

表2 HOMA-IR與其他指標(biāo)的相關(guān)分析

1)P<0.05，2)P<0.01；SBP：收縮壓；DBP：舒張壓

表3 HOMA-IR影響因素的多元逐步回歸分析

2.3不同治療方式干預(yù)結(jié)果比較 青磚茶組治療后pon3、Irisin、SOD水平明顯上升，insulin dosage、IL-6、HOMA-IR、TG、FIns水平明顯下降(P<0.05)；基礎(chǔ)治療組治療后臨床、生化指標(biāo)無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表4。

表4 兩組治療前后臨床、生化指標(biāo)比較

與治療前比較:1)P<0.05

3 討 論

低水平的Irisin參與了胰島素抵抗的發(fā)生〔4〕。Liu等〔5〕臨床研究發(fā)現(xiàn)Irisin與胰島素抵抗顯著相關(guān)，在糖代謝正常，但已有胰島素抵抗的人群Irisin即開始降低，并將Irisin作為胰島素抵抗的預(yù)測因子。Irisin能通過增加單磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)的磷酸化調(diào)控葡萄糖攝取從而改善胰島素抵抗〔6〕。實驗發(fā)現(xiàn)給予重組Irisin腹腔內(nèi)注射可降低DM大鼠血糖。人體研究也發(fā)現(xiàn)Irisin在糖代謝中發(fā)揮了有益的作用。臨床研究發(fā)現(xiàn)，隨著Irisin水平逐漸降低，糖耐量受損程度會逐漸加重，并且T2DM患者血清Irisin水平降低，而升高Irisin水平與降低T2DM的風(fēng)險〔7，8〕。這些說明Irisin在胰島素抵抗、糖代謝中發(fā)揮了重要作用，低水平的Irisin參與了胰島素抵抗、DM的發(fā)生。本研究與相關(guān)研究〔5〕結(jié)果一致。這進(jìn)一步證實Irisin在胰島素抵抗中發(fā)揮了重要的作用。本研究與我們前期相關(guān)研究〔9〕及其他學(xué)者相關(guān)研究〔8〕結(jié)果一致。這進(jìn)一步證實低水平的Irisin參與了糖代謝異常的發(fā)生。長盛川青磚茶增加血清Irisin的水平是其改善胰島素抵抗的機制之一。本研究認(rèn)為長盛川青磚茶通過增加Irisin水平改善胰島素抵抗是胰島素用量減少的機制之一。長盛川青磚茶對糖代謝異?；颊咻o助性的治療作用值得深入研究。體外實驗〔10〕發(fā)現(xiàn)Irisin通過影響脂肪生成基因的表達(dá)發(fā)揮了預(yù)防脂肪肝的作用。而人體研究也發(fā)現(xiàn)，Irisin可改善脂質(zhì)代謝〔11〕。Duran等〔12〕臨床研究發(fā)現(xiàn)Irisin與TG有顯著相關(guān)性。本研究與類似研究〔13〕結(jié)果一致，證實長盛川青磚茶改善了脂代謝。長盛川青磚茶對Irisin水平的影響可能參與了脂代謝的改善。

pon3參與了胰島素抵抗的發(fā)生〔14〕。臨床研究也發(fā)現(xiàn)pon3參與了胰島素抵抗、T2DM及其并發(fā)癥的發(fā)生，并且可能在胰島素抵抗及其并發(fā)癥的發(fā)生中發(fā)揮了保護(hù)作用〔15，16〕。既往研究還發(fā)現(xiàn)，DM大鼠肝臟pon3的表達(dá)下降，參與了胰島素抵抗、DM的發(fā)生〔17〕。本研究進(jìn)一步說明pon3與胰島素抵抗密切相關(guān)。本研究提示低水平的pon3參與了胰島素抵抗的發(fā)生。炎癥、氧化應(yīng)激促進(jìn)了胰島素抵抗、糖代謝異常的發(fā)生。pon3可抑制炎癥因子，拮抗氧化應(yīng)激，可能低水平的pon3通過對炎癥、氧化應(yīng)激的影響參與了胰島素抵抗的發(fā)生。長盛川青磚茶改善胰島素抵抗、減少胰島素用量、降低炎癥因子水平、抗氧化應(yīng)激的作用部分通過增加pon3水平完成。磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)能上調(diào)pon3的表達(dá)〔18〕。前期研究也發(fā)現(xiàn)上調(diào)PI3K/Akt能增加DM大鼠肝臟pon3的表達(dá)〔17〕。研究發(fā)現(xiàn)茶多糖能上調(diào)DM大鼠肝臟PI3K/Akt的表達(dá)從而改善胰島素抵抗〔19〕。 前期研究〔17〕表明，長盛川青磚茶能上調(diào)PI3K/Akt從而增加了DM大鼠肝臟pon3的表達(dá)。推測長盛川青磚茶可能通過對PI3K/Akt的影響增加了DM患者血清pon3的水平。

研究發(fā)現(xiàn)高脂喂養(yǎng)pon3基因敲除小鼠血液中TG、LDL、TC水平顯著增加，其機制與pon3缺乏導(dǎo)致膽固醇-7α羥化酶水平影響有關(guān)〔20〕。前期臨床研究也發(fā)現(xiàn)pon3水平與血脂具有顯著相關(guān)性〔15〕。這提示pon3還參與了脂質(zhì)代謝?？赡荛L盛川青磚茶對血脂的影響部分依賴于其對pon3的影響。