馮旭

不規(guī)則抗體是指除ABO 血型系統(tǒng)（抗-A、抗-B及抗-AB）以外的其他血型系統(tǒng)的抗體，可由妊娠、輸血、移植等免疫刺激和某些疾病誘發(fā)產(chǎn)生，是引起臨床血型鑒定、交叉配血困難、溶血性輸血反應(yīng)以及新生兒溶血病的主要原因[1，2]。因此，輸血前對患者進(jìn)行不規(guī)則抗體檢測十分必要。本研究對我院2015年1月～2017年12月臨床擬輸血和備血的4 529 例患者進(jìn)行不規(guī)則抗體檢測，探討其在臨床輸血安全中的意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2015年1月～2017年12月臨床擬輸血和備血患者共4 529 例，其中男2 376 例，女2 153 例；既往有輸血史1 481 例；既往有妊娠史 1 849 例。采集每例患者靜脈血2～3ml，EDTA 抗凝。

1.2 試劑與儀器 不規(guī)則抗體檢測試劑（人血紅細(xì)胞）、低離子強(qiáng)度鹽溶液抗人球蛋白微柱凝膠檢測卡均購自長春博迅生物技術(shù)有限公司，低速自動平衡離心機(jī)購自湖南邁克爾實驗儀器有限公司，血型血清學(xué)專用標(biāo)準(zhǔn)化離心機(jī)購自珠海貝索，免疫微柱孵育器、卡式離心機(jī)購自長春博研科學(xué)儀器有限公司，2℃～6℃醫(yī)用冷藏冰箱購自海爾。

1.3 方法 通過抗人球蛋白微柱凝膠檢測卡和不規(guī)則抗體檢測試劑對4 529 例患者進(jìn)行不規(guī)則抗體初篩試驗，操作過程嚴(yán)格按照說明進(jìn)行：將4%不規(guī)則抗體檢測試劑用LISS 液稀釋到0.8%，各取50μl上述Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ稀釋液加入到已標(biāo)記的凝膠卡的微孔內(nèi)，再向各微孔內(nèi)分別加入50μl 患者血漿，置于37℃條件下孵育15min，使用卡式法專用離心機(jī)離心5min，根據(jù)所提供的不規(guī)則抗體檢測試劑的反應(yīng)格局判定結(jié)果。將初篩陽性患者的標(biāo)本送至上級參比實驗室進(jìn)行抗體鑒定。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS 17.0 統(tǒng)計學(xué)軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體的篩查情況 4 529 例患者中不規(guī)則抗體陽性53 例，總陽性率為1.17%。其中2 376例男性患者中陽性16 例（0.67%）；2 153 例女性患者中陽性37 例（1.72%）；女性患者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于男性患者（χ2=10.67，P＜0.001）。 1 481 例有輸血史患者中陽性44 例（2.97%）；3 048 例無輸血史患者中陽性9 例（0.30%）；有輸血史患者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于無輸血史患者（χ2=61.70，P＜0.001）。1 849 例有妊娠史患者中陽性36 例（1.95%）；304 例無輸血史患者中陽性1 例（0.33%）；有妊娠史患者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于無妊娠史患者（χ2=4.05，P＜0.05）。

2.2 不規(guī)則抗體的特異性分布情況 53 例不規(guī)則抗體初篩陽性的患者抗體鑒定結(jié)果顯示，Rh 系統(tǒng)占62.26%，MNS 系統(tǒng)占9.43%，Lewis 系統(tǒng)占7.55%，Duffy 系統(tǒng)占1.89%，自身抗體占13.21%，冷抗體占5.66%。見表1。

表1 53 例不規(guī)則抗體特異性分布

3 討論

隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和檢測手段的不斷更新，目前已發(fā)現(xiàn)并被國際輸血協(xié)會認(rèn)可的血型系統(tǒng)已有36 個[3，4]，其中與臨床輸血安全最為息息相關(guān)且意義重大的為ABO 和Rh 血型系統(tǒng)。由于疾病、創(chuàng)傷等一些原因?qū)е禄颊哓氀⑹а窟^多時臨床上常給予輸血治療。交叉配血是保證臨床輸血安全、及時、有效的重要實驗。然而，在實際工作中，常常是僅針對ABO、Rh（D）同型的受、供雙方進(jìn)行交叉配血試驗，而對輸入的血液是否引入新的稀有抗原以及產(chǎn)生有意義的抗體不得而知，這將在很大程度上影響患者再次輸血時的效果。因此，在輸血前對患者進(jìn)行不規(guī)則抗體檢測顯得尤為重要。

此次研究顯示，在4 529 例患者中不規(guī)則抗體陽性53 例，總陽性率1.17%，與既往報道的不規(guī)則抗體陽性率（0.6%～1.8%）一致[1，5]，提示我們在日常工作中應(yīng)引起對不規(guī)則抗體檢測的重視，避免漏檢給交叉配血帶來困難，影響及時輸血治療。但差異較大時說明輸注抗原不相合的血液并非一定產(chǎn)生不規(guī)則抗體，還與抗原的劑量效應(yīng)有關(guān)[6～8]。另外研究結(jié)果還顯示，不規(guī)則抗體的陽性率存在性別差異，即女性高于男性，分析原因可能是女性患者在某些特殊時期（如接受妊娠等免疫刺激），機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。這一推測在我們此次研究的另一個結(jié)果中進(jìn)一步得以證實，我們發(fā)現(xiàn)女性患者中有妊娠史者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于無妊娠史者（1.95% vs 0.33%，P＜0.05）。不規(guī)則抗體的產(chǎn)生不僅與妊娠、某些免疫性疾病、血液病有關(guān)，還與輸血史有關(guān)，且與輸血次數(shù)成正相關(guān)。有研究結(jié)果顯示，患者每輸入1 個單位的血液制品，體內(nèi)產(chǎn)生不規(guī)則概率為0.8%～1.5%，且隨著輸血次數(shù)的增多，這一概率可增至14%～22%[9]。

對53 例不規(guī)則抗體初篩陽性的患者進(jìn)行抗體鑒定，除7 例為自身抗體，3 例為冷抗體外，其余43例不規(guī)則抗體主要分布在Rh、MNS、Lewis、Duffy 血型系統(tǒng)，其中又以Rh 系統(tǒng)最為常見，這一結(jié)果可能為基層一些缺乏實驗條件的醫(yī)院帶來參考價值。Rh 血型系統(tǒng)的不規(guī)則抗體是引起溶血性輸血反應(yīng)最主要的原因。我們發(fā)現(xiàn)抗-E 產(chǎn)生的概率最高（41.51%），提示抗-E 應(yīng)引起輸血科工作人員的足夠重視。而D 抗原的免疫原性雖然最強(qiáng)，但抗-D出現(xiàn)的頻率低（3.77%），可能與D 抗原在我國漢族人群中分布的頻率高達(dá)99.7%有關(guān)[10]。另外聯(lián)合出現(xiàn)的抗-Ec 和抗-Ce 近年來也逐漸增多，同樣應(yīng)當(dāng)予以重視。

綜上所述，輸血前進(jìn)行不規(guī)則抗體的檢測十分必要，且在條件允許的情況下應(yīng)盡可能多的開展多個血型系統(tǒng)的交叉配合試驗，以盡可能少地輸入新抗原為原則，對不規(guī)則抗體陽性的患者選擇不含有對應(yīng)抗原的血液進(jìn)行輸注，減少發(fā)生輸血不良反應(yīng)，保證患者安全而又及時有效的輸血治療。