趙國(guó)清， 王貴升， 胡永浩*

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，甘肅蘭州 730070；2.山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心,山東濟(jì)南250022）

隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，水貂的養(yǎng)殖數(shù)量逐漸增多，在水貂的養(yǎng)殖過程中，抗菌藥物不合理的使用，帶來許多的弊端，如畜禽免疫力下降、腸道菌群失衡等（陳頎，2017）。因此，研發(fā)替代抗生素的物質(zhì)成為新的研究方向。益生菌富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可以提高飼料在動(dòng)物體內(nèi)的消化與吸收，提高動(dòng)物免疫力和生長(zhǎng)性能（裴躍明，2016），被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物養(yǎng)殖中。關(guān)于益生菌在水貂養(yǎng)殖過程中的應(yīng)用報(bào)道比較少。因此，本試驗(yàn)在60日齡的雄性水貂基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的益生菌制劑，旨在探討其對(duì)水貂生長(zhǎng)性能和免疫指標(biāo)的影響，為益生菌制劑在水貂養(yǎng)殖過程中進(jìn)一步的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 益生菌制劑是由乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌等組成，活菌量均≥100萬cfu/g，由山東寶來利來生物工程股份有限公司生產(chǎn)；細(xì)胞因子IL-2、IL-6 ELISA Kit試劑盒購自上海允麥生物科技有限公司；免疫球蛋白IgG、IgM、IgA ELISA Kit試劑盒購于 Elabscience公司；小型高速離心機(jī)由德國(guó)Eppendorf公司生產(chǎn)；多功能全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀由北京凱奧科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)；常規(guī)的試劑及儀器由本實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及設(shè)計(jì) 采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)試驗(yàn)，選擇 60日齡體重為（960.55±80.45）g 雄性水貂60只，隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只，1組為空白對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，2、3、4組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%、1.0%、1.5%益生菌制劑，試驗(yàn)期60 d，每只水貂單籠飼養(yǎng)，單獨(dú)給料，自由飲水，每日8:30和16:30定期打掃，按照常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫和驅(qū)蟲。

1.3 基礎(chǔ)日糧 參考乜豪（2018）方法配制育成期水貂的基礎(chǔ)日糧，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1，飼糧為干粉型。

1.4 指標(biāo)測(cè)定及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定 在試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)，對(duì)每只水貂進(jìn)行稱重，記錄初始體重和試驗(yàn)?zāi)┲兀⒂涗浽囼?yàn)期間耗料量。測(cè)定計(jì)算各組的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。

表1 日糧組成成分與營(yíng)養(yǎng)水平

1.4.2 免疫指標(biāo)的測(cè)定 在試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)挑選10只水貂，指尖消毒并采血3 mL，置于促凝固管中，靜置、離心，將血清分裝-80℃保存，按照說明書檢測(cè)免疫球蛋白IgG、IgM、IgA和細(xì)胞因子IL-2、IL-6含量。

1.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析，試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，用單因素方差分析差異顯著性，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 益生菌制劑對(duì)水貂生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，試驗(yàn)2、3、4組的ADFI均高于1組，但是差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)3、4組的ADG顯著高于1組 （P＜0.05），分別提高38.8%、31.8%（P＜0.05），2組高于 1組，但差異不顯著（P ＞ 0.05），試驗(yàn) 2、3、4 組之間差異不顯著（P ＞ 0.05）；試驗(yàn) 3、4組的F/G顯著低于1組 （P＜0.05），分別降低18.6%、16.2%（P ＜ 0.05），2組低于 1組，但差異不顯著 （P＞0.05）；試驗(yàn)2、3、4組之間差異不顯著（P ＞ 0.05）。

2.2 益生菌制劑對(duì)水貂免疫指標(biāo)的影響 由表3可知，試驗(yàn) 2、3、4 組血清 IgM、IgA、IL-6 含量均高于 1組，但是差異不顯著（P ＞ 0.05）；試驗(yàn) 3、4組血清中IgG含量顯著高于1組（P＜0.05），分別提高 23.5%、14.8%（P＜0.05），2組高于 1組， 但差異性不顯著（P ＞ 0.05），試驗(yàn) 2、3、4 組之間差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn) 3、4組血清中IL-2含量顯著高于 1組（P ＜ 0.05），分別提高 10.2%、8.2%（P ＜0.05），2組高于 1組，但差異性不顯著（P＞ 0.05），試驗(yàn) 2、3、4組之間差異不顯著（P ＞ 0.05）。

表2 益生菌制劑對(duì)水貂生長(zhǎng)性能的影響

表3 益生菌制劑對(duì)水貂免疫指標(biāo)的影響ng/mL

3 討論

益生菌制劑被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中，具有提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能的作用。崔一喆等（2017）報(bào)道，益生菌可以提高梅花鹿生長(zhǎng)性能。田浪等（2017）等報(bào)道，益生菌可以提高肉雞生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn) 2、3、4組的 ADFI均高于 1組（P＞0.05），試驗(yàn) 3、4組的 ADG分別較 1組提高38.8%、31.8%（P ＜ 0.05），F(xiàn)/G 分別較 1組降低18.6%、16.2%（P＜0.05）。因而證實(shí)益生菌制劑可以提高水貂的生長(zhǎng)性能。益生菌在動(dòng)物腸道中可以抑制致病菌群的生長(zhǎng)繁殖，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在腸道內(nèi)的消化吸收，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化率，從而提高水貂的生長(zhǎng)性能。

免疫球蛋白介導(dǎo)體液免疫，是評(píng)價(jià)免疫機(jī)能的重要指標(biāo)之一，免疫球蛋白IgG在抗感染免疫中起著重要作用，IgA主要參與黏膜免疫，IgM是機(jī)體免疫中最早出現(xiàn)的抗體，具有很強(qiáng)的殺菌功能（張召興，2017）。IL-2又稱T細(xì)胞生長(zhǎng)因子，可以刺激T淋巴細(xì)胞增殖，還可以調(diào)節(jié)B淋巴細(xì)胞和抗體產(chǎn)生，在免疫過程中具有重要作用 （宋麗霞，2011）。細(xì)胞因子IL-6主要參與機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫，是免疫系統(tǒng)中重要的細(xì)胞因子（宋巴達(dá)瑪，2010）。因此，血清中 IL-2、IL-6含量的高低可直接反映機(jī)體的免疫功能。本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn) 2、3、4 組血清中的 IgM、IgA、IL-6 含量均高于 1組（P ＞ 0.05），試驗(yàn) 3、4組血清中 IgG、IL-2含量較1組相比分別提高23.5%、14.8%、10.2%、8.2%（P＜0.05）。因而證實(shí)益生菌制劑可以提高水貂的免疫水平?？赡苡捎谝嫔奈镔|(zhì)可以刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)，促進(jìn)抗體分泌合成，從而增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。與裴躍明等（2016）、乜豪等（2018）報(bào)道的一致。但益生菌制劑提高免疫機(jī)能的機(jī)理尚未明確，有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，在基礎(chǔ)飼料中添加1.0%益生菌制劑可以顯著提高水貂的生長(zhǎng)性能和免疫指標(biāo)。