謝志彬，劉新妍，張永輝

（1.河北省唐山市遷西縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北唐山 064300；2.河北省唐山市遷西縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北唐山 064300；3.河北省定州市東旺鎮(zhèn)人民政府，河北定州 073000）

抗菌肽是由動(dòng)物、植物或微生物等新陳代謝產(chǎn)生的小分子多肽，廣泛分布于自然界中 （朱勇等，2006），是機(jī)體免疫體系重要組成部分，可激活動(dòng)物免疫應(yīng)答，抵抗外源致病菌，從而提高動(dòng)物的免疫力（黃榮春等，2017），且由于自身的微生態(tài)特性，作為多肽物質(zhì)，健康安全（趙紅霞等，2003）。豬藍(lán)耳病由PRRSV病毒引起，臨床以仔豬腹瀉消瘦、母豬流產(chǎn)、耳朵發(fā)紺、呼吸困難為癥狀，是國(guó)家強(qiáng)制免疫疾病。目前藍(lán)耳病的防控主要是以疫苗免疫為主，但由于市面上疫苗種類(lèi)繁多，質(zhì)量參次不齊，疫苗免疫后免疫效價(jià)低下，保護(hù)率較低（黃靜等，2011）。因此，本文通過(guò)研究日糧中添加抗菌肽粗提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、體內(nèi)藍(lán)耳病毒抗體水平以及免疫功能的影響，以期為抗菌肽在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 抗菌肽粗提取物由上海牧昌生物科技有限公司提供；藍(lán)耳疫苗由南京天邦生物科技有限公司提供；初生仔豬15日齡免疫。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選取120頭健康、體況水平相近的斷奶二元仔豬隨機(jī)分為4組，每組2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15頭，試驗(yàn)期為30 d，整個(gè)試驗(yàn)期間豬群自由采食飲水，按豬場(chǎng)常規(guī)管理程序進(jìn)行管理。具體分組見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)分組與處理

1.3 試驗(yàn)日糧 參照NRC（1998），并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐配制不含抗生素的玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧（表2）。

1.4 指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo) 試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)分別進(jìn)行空腹稱(chēng)重，計(jì)算全期平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料肉比（F/U）。

1.4.2 藍(lán)耳病毒抗體檢測(cè) 試驗(yàn)結(jié)束，每組隨機(jī)選取20頭豬，前腔靜脈采集全血，分離血清，采用美國(guó)IDEXX公司的藍(lán)耳病抗體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行抗體檢測(cè)，并計(jì)算S/P值，用來(lái)表示藍(lán)耳病抗體效價(jià)。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.4.3 免疫功能的測(cè)定 免疫球蛋白IgA、IgG、IgM采用ELISA試劑盒測(cè)定，均購(gòu)于Sigma公司；血清中總蛋白 （TP）、白蛋白 （ABL）、甘油三酯（TG）等采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件中單因素方差分析（ANOVA），用LSD方法多重比較，分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)的差異顯著性，結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果

2.1 抗菌肽粗提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響 如表3所示，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)2組、3組末重分別提高6.9%、8.8%（P＜0.05），日增重分別提高10.4%、12.4%（P＜0.05），料重比分別降低6.4%、5.7%（P＜0.05）。對(duì)照組和試驗(yàn)1組之間差異不顯著（P ＞ 0.05）。

表3 抗菌肽粗提取物對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 抗菌肽粗提取物對(duì)斷奶仔豬藍(lán)耳病毒抗體水平的影響 由表4可知，試驗(yàn)2組、3組抗體效價(jià)顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)1組，其中較對(duì)照組分別提高了46.5%、72%（P＜0.05），藍(lán)耳病毒抗體陽(yáng)性率各組之間差異不顯著（P＞0.05），但各試驗(yàn)組較對(duì)照組均有所提高。

2.3 抗菌肽粗提取物對(duì)斷奶仔豬免疫功能的的影響 由表5可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)3組總蛋白含量提高16.4%（P＜0.05），試驗(yàn)2組、3組甘油三酯含量分別提高10.9%、13.4%（P＜0.05），試驗(yàn)1組、2組、3組膽固醇含量均顯著降低（P ＜ 0.05），試驗(yàn)2組IgG含量提高12.6%（P＜0.05），試驗(yàn)2組、3組IgA含量分別提高35.6%、51.1%（P＜0.05）。

表4 抗菌肽粗提取物對(duì)藍(lán)耳病毒抗體水平的影響

表5 抗菌肽粗提取物對(duì)斷奶仔豬免疫功能的影響

3 討論

3.1 抗菌肽粗提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響 仔豬斷奶階段是生長(zhǎng)發(fā)育關(guān)鍵階段，受斷奶應(yīng)激影響，仔豬經(jīng)常出現(xiàn)腹瀉、厭食、營(yíng)養(yǎng)不良等狀況。所以，在斷奶仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育中，合理的營(yíng)養(yǎng)調(diào)控是不可或缺的。有研究表明，仔豬斷奶時(shí)抵抗力下降、腹瀉、生長(zhǎng)性能降低極有可能與抗菌肽的表達(dá)量降低有關(guān)，而在飼料中添加外源性的抗菌肽，可以增強(qiáng)動(dòng)物的免疫力（Chen，2009）。當(dāng)下的養(yǎng)殖環(huán)境對(duì)于豬群的生長(zhǎng)并不友好，許多豬處于亞健康的狀態(tài)，暴露于細(xì)菌和病毒的攻擊中，使豬群的生長(zhǎng)潛能得不到最大的發(fā)揮（丁寶君，2003）。研究表明抗菌肽含植酸酶，可以促進(jìn)仔豬對(duì)飼料中P、Ca和Zn的利用，同時(shí)會(huì)抑制腸道有害細(xì)菌繁殖，從而起到改善腸道微生物生態(tài)的作用，而在日糧中添加2 mg/kg的抗菌肽會(huì)顯著提高斷奶仔豬的日增重（麻延峰，2010）。本研究結(jié)果表明，在飼料中添加不同劑量的抗菌肽對(duì)仔豬的生長(zhǎng)性能影響顯著，添加0.2%與0.4%的抗菌肽，斷奶仔豬的日增重分別提高了10.4%和12.4%，表明其能夠顯著提高仔豬的生長(zhǎng)性能，與相關(guān)報(bào)道相符。

3.2 抗菌肽粗提取物對(duì)仔豬藍(lán)耳病毒抗體水平與免疫功能的影響 研究表明，日糧中添加抗菌肽可提高機(jī)體免疫力，增強(qiáng)免疫效價(jià)，可能與蛋氨酸成分有關(guān)，并且其可提高對(duì)微量礦物質(zhì)的利用。同時(shí)抗菌肽提取物的提高免疫功能與腸道細(xì)菌的膽汁酸解偶聯(lián)活性有關(guān)，能提高腸道微生物群的代謝活性。另外，其作用主要是通過(guò)對(duì)免疫細(xì)胞增殖的促進(jìn)和吞噬細(xì)胞吞噬能力的提升來(lái)實(shí)現(xiàn)的，對(duì)于一些炎癥反應(yīng)具有良好的調(diào)節(jié)作用（吳朝榮，2018）。白建勇等（2015）研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加0.1%抗菌肽，可明顯改善仔豬的血清IgA含量和空腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞的數(shù)量。同時(shí)抗菌肽可促進(jìn)機(jī)體免疫，發(fā)揮特異性細(xì)胞免疫功能。曹斌等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)藍(lán)耳病毒抗原侵入機(jī)體時(shí)，T淋巴細(xì)胞的再循環(huán)機(jī)制立即啟動(dòng)，刺激機(jī)體記憶T淋巴細(xì)胞分泌抗體，增強(qiáng)機(jī)體免疫效價(jià)，同時(shí)可保持對(duì)PRRSV病毒的記憶。本試驗(yàn)日糧中添加0.2%和0.4%抗菌肽粗提取物，可提高血清藍(lán)耳病毒抗體水平，同時(shí)提高免疫功能，這與相關(guān)報(bào)道相符。

4 結(jié)論

日糧中添加抗菌肽粗提取物可顯著提高斷奶仔豬血清中藍(lán)耳病毒抗體水平和機(jī)體免疫功能，改善仔豬生長(zhǎng)性能。