王 紅，廖敏杰，官倩倩 △

（1.湖北省荊州市婦幼保健院，湖北 荊州 434020； 2.湖北百科格萊制藥有限公司，湖北 荊門 448000）

一致性評價和仿制藥開發(fā)過程中，粒度是原料藥、輔料和制劑中間體粉體學(xué)研究的重要技術(shù)指標(biāo)。傳統(tǒng)的粒度測量方法中，以過篩最常見，雖然成本低，但難以給出具體的粒度分布。隨著技術(shù)的進(jìn)步，多種新型測量儀器的應(yīng)用也使得對粒度的把握更加準(zhǔn)確?，F(xiàn)在較通用的方法是采用激光粒度儀進(jìn)行粒度測試，給出的粒徑稱為等效散射光粒徑。激光衍射粒度儀主要是利用了光的散射原理測量粒徑，是基于顆粒體積的計算技術(shù)，將不規(guī)則顆粒假設(shè)為等體積球模型。本研究中根據(jù)2015年版《中國藥典（四部）》[1]并參考文獻(xiàn)[2-10]，對布洛芬原料藥的粒度分析方法進(jìn)行了研究。根據(jù)布洛芬的物理性質(zhì)，選擇激光衍射粒度儀濕法進(jìn)樣進(jìn)行布洛芬原料藥粒徑的檢測并進(jìn)行方法驗證，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Mastersize3000型激光粒度分析儀（配備標(biāo)準(zhǔn)粒子，英國馬爾文儀器有限公司）；KQ-250型超聲振蕩器（昆山超聲儀器有限公司，功率為250 W）；XW-80A型旋渦混合器（上海隆拓儀器設(shè)備有限公司，2 800 r/min）。

1.2 試藥

布洛芬原料藥（湖北百科格萊制藥有限公司，批號分別為 C100-1711133M，C100-1711136M，C100-1711138M，45等級；C100-1711144M，C100-1711145M，C100-1612041A，C100-1612042A，C100-1612048A，60等級）；鹽酸和聚山梨酯-80均為分析純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器操作條件及步驟

選擇濕法，激光粒度分析儀參數(shù)設(shè)置，顆粒折射率為1.44，遮光度為10% ～20%，分散介質(zhì)為水（折射率為1.33），校正模型為通用模型，測量時間為12 s，泵速為2 000 r/min。清洗完成后，將飽和布洛芬溶液倒入樣品倉，進(jìn)行掃描扣除背景參數(shù)；再將樣品溶液倒入樣品倉中，遮光度為10% ～20%，開始掃描。在測量完一個樣品后，以水清洗系統(tǒng)，重復(fù)操作。

2.2 溶液制備

飽和布洛芬溶液：將2 000 mL水加入具塞廣口瓶中，加入濃鹽酸1 mL，混勻后加入布洛芬約1.0 g，強(qiáng)烈振搖，靜置使溶液平衡，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。

2%聚山梨酯-80溶液：加聚山梨酯-80 20 mL和布洛芬0.5 g，置1 000 mL容量瓶中，搖勻后用水定容。強(qiáng)烈振搖，靜置使溶液平衡，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過。取續(xù)濾液，即得。

樣品溶液：取適量布洛芬樣品，置100 mL燒杯中，加上述2%聚山梨酯-80溶液10 mL，用旋渦混合器混合30 s，超聲處理1 min，即得。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 準(zhǔn)確度試驗

取標(biāo)準(zhǔn)粒子，按上述方法掃描測定，重復(fù)測量6次。結(jié)果的RSD為 1.00% （n=6）。標(biāo)準(zhǔn) d（0.5）為 61.594 ±3.080，6次測得結(jié)果的RSD小于規(guī)定的5%，詳見表1。

表1 準(zhǔn)確度試驗結(jié)果[粒徑分布（%），n=6]

2.3.2 精密度考察

方法精密度：稱取布洛芬原料藥（批號為C100-1711138M）適量，共6份，同法制備樣品溶液，置樣品倉中，同法測試。結(jié)果見表2。

中間精密度：不同日期、不同操作員，溶液重新制備。稱取布洛芬樣品（批號為C100-1711138M）適量，6份，同法制備樣品溶液，置樣品倉中，同法測試。結(jié)果見表3。

表3 中間精密度試驗結(jié)果[粒徑分布（%），n=6]

2.3.3 耐用性試驗

改變遮光度：改變樣品溶液濃度，使遮光度值分別為5% ～10%，20% ～25%，其他條件保持不變。稱取布洛芬原料藥（批號為C100-1711138M）適量，3份，同法制備樣品溶液置樣品倉中，同法測試。結(jié)果見表4。改變超聲時間：改變樣品溶液超聲時間為55 s和65 s，其他條件保持不變。稱取布洛芬樣品（批號為C100-1711138M）適量，3份，同法制備樣品溶液，置樣品倉中，同法測試。結(jié)果見表5。

表4 改變遮光度耐用性試驗結(jié)果[粒徑分布（%），n=6]

表5 改變樣品超聲時間耐用性試驗結(jié)果[粒徑分布（%），n=6]

2.4 樣品檢測

稱取8批2種粒徑規(guī)格的布洛芬原料藥樣品，濕法測試。結(jié)果見表6。

表6 樣品檢測結(jié)果統(tǒng)計[粒徑分布（%）]

3 討論

3.1 儀器選擇

目前市場主要導(dǎo)向和國際上應(yīng)用較廣的為Mastersize 3000型馬爾文粒度測試儀，該儀器是基于激光散射技術(shù)表征顆粒樣品粒徑分布的儀器[11]，繼承了Mastersize 2000型儀器的優(yōu)點，并拓寬了其測試范圍至 0.01～3 500 μm，提高了自動化水平和測試速度，是一種快速、準(zhǔn)確、無破壞性的粒子尺寸測量儀器[12]，不需要更換透鏡，每秒可測量10 000次，對任何分布不規(guī)則的樣品均可達(dá)到極高的測量精度，體積小巧，運(yùn)行軟件簡單、直觀，支持個性化的測量設(shè)置與數(shù)據(jù)呈現(xiàn)，完全符合ISO13320標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 干法與濕法選擇

Mastersize 3000型激光粒度分析儀可應(yīng)用濕法和干法測試原料藥的粒徑。干法測試原料藥的粒徑時，需要配備吸塵裝置，對空氣壓力也有要求，且需對吸塵裝置進(jìn)行清洗、更換，故選擇濕法進(jìn)行測試。

3.3 測試參數(shù)選擇

濕法測試影響因素為超聲功率、超聲時間、攪拌速率、分散均勻性。結(jié)合布洛芬原料藥晶型特征，布洛芬在水中不易分散均勻，幾乎不溶于水，因此在混旋時，采用2%聚山梨酯-80對布洛芬進(jìn)行混旋分散均勻后再超聲。在布洛芬飽和水溶液中攪拌混勻測試，超聲時間越長，細(xì)長顆粒越容易折斷變小，超聲時間過短或不超速，在結(jié)晶過程中2個細(xì)小晶型結(jié)合在一起的顆粒又不容易分散，經(jīng)過摸索篩選確定混旋30 s、超聲1 min。做好以上優(yōu)化選擇后要注意，測量前最重要的是充分準(zhǔn)備樣品，包括典型抽樣、分散劑、表面活化劑和混合劑選用，超聲波的使用等；其次是要確保測量區(qū)的主要組成部件即檢測器和樣品池窗口一直清潔，并利用背景屬性測量裝置純化測量；最后是正確輸入被測樣品的折光率和吸收率。粒徑的測試中，方法及儀器不同，測試結(jié)果差異較大，重復(fù)性不好。本研究中采用同樣條件，測試結(jié)果有較好的重復(fù)性和準(zhǔn)確性，為提高原料藥和藥物制劑生產(chǎn)質(zhì)量提供了現(xiàn)實指導(dǎo)意義。