蒙椿海,馬 靜
(廣西中醫(yī)藥大學基礎醫(yī)學院,廣西 南寧 530200)
穿心蓮(Andrographis)為爵床科穿心蓮屬植物,性寒、味苦,具有清熱解毒、涼血消腫之功效,廣泛分布于熱帶、亞熱帶區(qū)域,20世紀50年代從東南亞引入我國,主產地在我國廣西、廣東、四川、安徽、福建等省份[1],以干燥地上部分入藥。穿心蓮的主要成分為穿心蓮內酯、新穿心蓮內酯、14-脫氧-11,12-脫氫穿心蓮內酯(14-DDA)、14-去氧穿心蓮內酯(14-DA)、花青素及花青素a、b、c等[2-3],具有抗炎、抗病毒、抗菌、抗癌、保肝利膽等藥理作用[4-5]。自上世紀以來,穿心蓮在中國、印度、泰國和馬來西亞等亞洲國家被廣泛用于治療喉嚨痛、流感和上呼吸道感染[6]。
穿心蓮內酯是一種二萜內酯類化合物,對滑膜炎、乳腺炎及免疫功能等具有重要作用[7-10],但其作用機制仍然不明,本文就近年來穿心蓮內酯的抗炎作用機制綜述如下。
核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)是一種核轉錄因子,主要包括5個亞單位:Rel(cRel)、p65(RelA,NF-κB3)、RelB 和 p50(NF-κB1)、p52(NF-κB2),以異二聚體形式存在于細胞質中,其中p65(RelA)、RelB、cRel、p50和p52能特異性結合B細胞上免疫球蛋白k輕鏈基因的上游增強子序列,并激活其基因轉錄。NF-κB信號通路可調控白細胞介素1(IL-1)、白細胞介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等細胞因子的炎癥反應,產生免疫、炎癥和應激反應[11]。細胞膜上的固有免疫識別受體Toll樣受體4(TLR-4),激活后可將細胞外信號轉導到細胞內,進而激活IL-1受體相關激酶1(IRAK-1)和TRAF-6,進一步使NF-κB誘導酶激活,活化的核因子-κB從細胞質轉移到核內,啟動相關靶基因進行轉錄,然后釋放下游TNF-α、IL-6等炎癥因子。Zhang等[12]研究表明,穿心蓮內酯作用于椎間盤退變患者的髓核細胞中,可以通過TLR4/MyD88/NF-κB介導的信號通路,減輕促炎因子IL-1β誘導的髓核細胞變性,從而達到抗炎的作用。He等[13]發(fā)現,穿心蓮內酯可能是通過抑制p38 MAPKs活化,抑制iNOS和COX-2表達,從而發(fā)揮抗炎特性。
Akt又稱蛋白激酶B(PKB),是蛋白激酶的一種,位于JNK級聯信號通路的上游。JNK(c-Jun氨基末端激酶,c-Jun N-terminal kinase)又被稱為應激活化蛋白激酶,屬于絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶;活化的JNK可以促進Akt的磷酸化,炎癥信號可以激活JNK[14]。抑制血管平滑肌細胞(VSMC)炎癥可能是心血管疾病治療的主要靶點,Chen等[15]研究發(fā)現,TNF-α誘導的血管平滑肌炎癥細胞可以激活Akt和JNK信號通路,使p65磷酸化;JNK是非常重要的上游調節(jié)器,對調節(jié)TNF-α刺激的VSMC中引起的Akt磷酸化起著關鍵作用。穿心蓮內酯可以抑制TNF-α刺激的VSMCs的炎癥刺激,抑制JNK的激活,減少Akt的磷酸化,從而通過JNK-Akt-p65介導的信號通路抑制血管炎癥。
JAK和STAT是許多細胞因子受體系統(tǒng)的重要組成部分,主要作用是調節(jié)生長、存活、分化以及抗病原性。IL-6(或gp130)受體家族,可協同調控B細胞分化、漿細胞發(fā)生以及急性期反應。Parichatikanond等[16]從穿心蓮中提取得到二萜類化合物脫氫穿心蓮內酯(AP1)、穿心蓮內酯(AP2)和新穿心蓮內酯(AP3),發(fā)現AP2和AP3可以顯著抑制人血液中LPS刺激的COX-2活性,AP2可下調JAKs和STATs基因的表達,調節(jié)人血液中LPS誘導的TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-10分泌水平,作用于各種類型的免疫細胞并介導炎癥反應。另外,活化的COX是前列腺素活化的重要介質[17],AP2可以降低COX活性,阻斷了炎癥介質的合成,進而阻止前列腺素合成參與炎癥反應。
先天性免疫系統(tǒng)是防止病原微生物入侵的第一道防線?!拔kU”信號誘發(fā)炎癥的一種方式是通過激活炎性體,炎性體是暴露在病原體相關分子模式(PAMP)或危險相關分子模式(DAMP)下后在胞質中組裝的多蛋白復合體,并且會激活caspase-1以及后續(xù)裂解活化促炎細胞因子IL-1β和IL-18[18-19]。炎性體復合體通常含有胞質模式識別受體(PRR)、接頭蛋白ASC和pro-caspase-1。NLRP3復合體,它含有NLRP3、ASC、pro-caspase-1 和絲氨酸-蘇氨酸激酶NEK7;細胞質模式識別受體(PRR)NOD樣受體家族,含有3個pyrin結構域(NLRP3),可感知多種病原體相關分子模式(PAMP)和損傷相關分子模式(DAMP)。激活后,NLRP3通過自身寡聚化和含有半胱天冬酶募集結構域(ASC)和半胱天冬酶-1的凋亡相關斑點樣蛋白的募集引發(fā)炎性體的組裝,促進強烈的免疫反應,包括分泌促炎細胞因子和細胞凋亡[20]。Gupta等[21]在探討穿心蓮內酯對OVA誘導哮喘的作用及其可能機制中發(fā)現,在OVA刺激誘導哮喘的發(fā)生過程中,穿心蓮內酯可降低肺組織中細胞因子蛋白水平和mRNA水平,可以通過NLRP3炎性小體的反應,最終使TNF-α和IL-1β水平下降。Zhu等[22]研究了穿心蓮內酯對小鼠腹腔巨噬細胞炎癥介質的影響,通過對一氧化氮(NO)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、白介素-6等炎癥介質,對穿心蓮內酯介導的酶/轉錄因子抑制作用的相關分子機制進行研究,發(fā)現穿心蓮內酯能明顯抑制脂多糖活化的PM中NO和TNF-α的產生,通過抑制關鍵的炎癥酶和介導多種炎癥細胞因子原位表達的信號通路來發(fā)揮抗炎作用。
T細胞受體(TCR)激活可促進許多信號轉導級聯反應,通過調控細胞因子產物、細胞生存、增殖和分化來最終決定細胞命運。有研究表明,不同濃度的穿心蓮內酯可明顯降低潰瘍性結腸炎患者的γ干擾素、白介素(IL)23和白介素(IL)17水平,使輔助性T細胞(Th)1、Th17細胞比例降低,Th2細胞比例增加[18];Liu等[23]研究發(fā)現,穿心蓮內酯不僅降低促炎細胞因子的mRNA和蛋白水平,還可以通過抑制Th1/Th17反應來改善2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)誘導的小鼠結腸炎,提出穿心蓮內酯可用于治療胃腸道炎癥性疾病。
研究發(fā)現穿心蓮內酯可通過靶向細胞周期調控因子、CXCR3和CXCR7趨化因子受體,穿心蓮內酯作用后,趨化因子CXCR3明顯降低,CXCR7也受到影響,提示穿心蓮內酯可能通過調控細胞周期和細胞因子信號來發(fā)揮作用[24]。Nirschl等[25]研究發(fā)現,不同濃度穿心蓮內酯作用于類風濕關節(jié)炎類成纖維細胞樣滑膜細胞(RAFLSs),可引起G0/G1期細胞周期阻滯,檢測到穿心蓮內酯誘導的RAFLSs凋亡,線粒體細胞色素C釋放和caspase-3的活化,由此可見穿心蓮內酯對RAFLSs具有抗生長和促凋亡的作用,可能具有治療類風濕關節(jié)炎的潛力。Ji等[26]發(fā)現穿心蓮內酯能增強趨化因子SDF-1α誘導的白細胞趨化,通過上調CXCR4細胞表面表達,可有助于提高穿心蓮的抗感染功能。
從以上穿心蓮內酯抗炎機制來看,不管是通過TLR4/MyD88/NF-κB介導的信號通路,亦或是通過T細胞受體介導的信號達到抗炎作用,穿心蓮內酯都體現出明顯的作用,但是穿心蓮內酯直接的作用機制靶點目前尚未完全闡釋清楚,還需要我們更多的實驗探索。目前對穿心蓮的研究,已經從抗炎、抗氧化等機制研究拓展到了臨床抗腫瘤、治療心血管等方面的應用,顯示出穿心蓮的應用前景非常廣闊。下一步,我們應對穿心蓮的藥理學作用進一步挖掘和研究,更加豐富其臨床應用,讓穿心蓮在臨床上發(fā)揮更大的價值。