尉希清 劉帥 牛珩 胡玲愛 張金國(guó)

(濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心內(nèi)科 山東省心臟疾病診療重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)寧 272129)

冠心病(CHD)具有較高的致死率和致殘率，嚴(yán)重危害患者的生命健康〔1〕。近年來經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療術(shù)(PCI)已成為CHD患者最有效的治療方法之一〔2〕。但支架內(nèi)再狹窄(ISR)已成為CHD PCI治療的瓶頸問題，因此探索有效的解決ISR的方法成為目前介入心臟病學(xué)的研究熱點(diǎn)之一。ISR的發(fā)病機(jī)制主要包括內(nèi)膜增生、血管重塑、彈性回縮，其中以內(nèi)膜增生最為重要〔3〕。我們課題組既往研究表明黃芪甲苷(ASTⅣ)可抑制腫瘤壞死因子(TNF)-α誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)增殖、遷移〔4〕，ASTⅣ還能抑制球囊損傷大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜的增生〔5〕，但其具體機(jī)制尚不明確。本研究通過應(yīng)用不同劑量的ASTⅣ干預(yù)半定量分析頸動(dòng)脈內(nèi)膜血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)-BB及活性氧(ROS)的表達(dá)，探索ASTⅣ抑制頸動(dòng)脈內(nèi)膜增生的具體機(jī)制。

1 材料及方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1主要實(shí)驗(yàn)儀器 組織切片機(jī)、石蠟冷凍機(jī)、Leica石蠟包埋機(jī)、超薄切片機(jī)、冰凍切片機(jī)、組織展片烤片機(jī)(德國(guó)Leica公司)；電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)；MoticBA600全自動(dòng)掃描顯微鏡及照相系統(tǒng)(中國(guó)麥克奧迪公司)；Sunrise酶標(biāo)儀(奧地利Tecan公司)；Image-proplus software5.0圖像分析軟件(美國(guó) Media Cybernetics 公司)；2F Fogarty導(dǎo)管(美國(guó) Edwards Lifescience 公司)；GENMED SCIENTIFICS INC.USA的細(xì)胞(ROS)超氧陰離子原位比色法定量檢測(cè)試劑盒(上海杰美基因公司)。

1.1.2主要試劑 3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷(APES)(武漢博士德生物工程有限公司)；DAB顯色試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)；ASTⅣ(純度98.34% 批號(hào)：121224，西安旭煌生物技術(shù)有限公司)；即用型鏈霉親和素-過氧化物酶復(fù)合物(SABC)免疫組化試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司)；兔抗鼠PDGF-BB一抗(Abcam公司)；兔抗鼠內(nèi)膜增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)一抗(Santa Cruz公司；山羊抗兔二抗：Santa Cruz公司)；

1.1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 50只成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠用于構(gòu)建球囊損傷頸動(dòng)脈內(nèi)膜模型，SPF級(jí)，購(gòu)于山東濟(jì)寧魯抗藥業(yè)有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證：SCXK-魯 20130001。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用符合倫理學(xué)規(guī)范。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組及處理方式 50只健康雄性成年SD大鼠隨機(jī)分成五組：模型組、ASTⅣ〔20 mg/(kg·d)〕組、ASTⅣ〔40 mg/(kg·d)〕組、ASTⅣ〔60 mg/(kg·d)〕組和假手術(shù)組各10例。假手術(shù)組(n=10)：只結(jié)扎左頸外動(dòng)脈,用等劑量的清水灌胃，而不插入球囊；頸動(dòng)脈球囊損傷模型組(n=10)：插入頸動(dòng)脈球囊造成頸動(dòng)脈內(nèi)膜損傷，給予等劑量清水灌胃，而不給任何藥物干預(yù)；ASTⅣ〔20 mg/(kg·d)〕組(n=10)：頸動(dòng)脈球囊損傷+ASTⅣ〔20 mg/(kg·d)〕灌胃；ASTⅣ〔40 mg/(kg·d)〕組(n=10)：頸動(dòng)脈球囊損傷+ASTⅣ〔40 mg/(kg·d)〕灌胃；ASTⅣ〔60 mg/(kg·d)〕組(n=10)：頸動(dòng)脈球囊損傷+ASTⅣ〔60 mg/(kg·d)〕灌胃。實(shí)驗(yàn)中大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷模型制作參照林志鴻等〔6〕的方法，ASTⅣ灌胃劑量參照相關(guān)文獻(xiàn)制定〔7〕。

1.2.2光鏡下觀察頸動(dòng)脈管壁形態(tài)學(xué) 經(jīng)過蘇木素-伊紅(HE)染色的頸動(dòng)脈管壁組織病理切片顯示，細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，細(xì)胞胞質(zhì)呈現(xiàn)紅色。在光學(xué)顯微鏡下，能夠觀察到頸動(dòng)脈組織切片由平滑肌細(xì)胞和纖維結(jié)締組織構(gòu)成。內(nèi)膜位于內(nèi)彈力板以內(nèi)，外膜位于外彈力板以外，位于內(nèi)外彈力板之間的是中膜。在光學(xué)顯微鏡下放大100倍拍照保存。按照文獻(xiàn)描述的方法，應(yīng)用Image-proplus software5.0圖像分析軟件，用鼠標(biāo)分別構(gòu)畫出管腔輪廓和內(nèi)、外彈力板，用計(jì)算機(jī)分別計(jì)算管腔面積和內(nèi)、外彈力板各自的圍繞面積。并進(jìn)一步計(jì)算內(nèi)膜面積(內(nèi)彈力板圍繞面積減去管腔面積)及內(nèi)膜面積/中膜面積比(外彈力板圍繞面積減去內(nèi)彈力板圍繞面積)。管腔面積、內(nèi)膜面積和內(nèi)膜面積/中膜面積比這三項(xiàng)指標(biāo)能夠反映內(nèi)膜增生程度和血管狹窄程度。

1.2.3免疫組化染色 觀察血管壁PCNA和生長(zhǎng)因子PDGF-BB的表達(dá)。

1.2.4血管壁ROS原位比色法定量測(cè)定 斷頸法處死大鼠后取頸總動(dòng)脈約150 mg，將頸動(dòng)脈條的脂肪組織在37℃的磷酸鹽緩沖液(PBS)中除掉，將動(dòng)脈條在4℃冰水中碾碎，以檢測(cè)頸動(dòng)脈中ROS的含量：用200目濾網(wǎng)制作成頸動(dòng)脈組織單細(xì)胞懸液，用pH7.4的PBS洗滌頸動(dòng)脈組織2次，然后用1 500 r/min、4℃離心7 min，通過臺(tái)盼藍(lán)染色觀察頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞存活情況(顯示存活率≥95%)。將細(xì)胞濃度調(diào)節(jié)為106/ml；用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔按分組各加入200 μl單細(xì)胞懸液，每組6個(gè)復(fù)孔，每孔加入Reagent A 20 μl到每個(gè)孔里，細(xì)胞培養(yǎng)板通過輕搖混勻，然后放到37℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4 h。吸出培養(yǎng)液，用PBS洗一次，各吸取Reagent B 100 μl固著液加到每一孔內(nèi)，輕震96孔板，將固著液小心抽去。再重復(fù)前一步驟2次，肉眼或顯微鏡觀察：細(xì)胞呈現(xiàn)藍(lán)黑色，代表ROS濃度增高。再吸取Reagent C 100 μl加到每一孔內(nèi)，輕搖培養(yǎng)板，等待GENMED溶解液分布均勻，常溫下孵育5 min后的細(xì)胞培養(yǎng)板即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，在波長(zhǎng)650 nm各組細(xì)胞的OD值被檢測(cè)。然后構(gòu)建細(xì)胞內(nèi)ROS生成曲線：橫坐標(biāo)為處理藥物及濃度；縱坐標(biāo)為ROS吸光度值。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS13.0軟件行方差分析，組內(nèi)平均數(shù)的兩兩比較采用SNK法。

2 結(jié) 果

2.1形態(tài)學(xué)觀察ASTⅣ對(duì)大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜增生的影響 在放大100倍的光學(xué)顯微鏡下觀察到球囊損傷模型組大鼠頸動(dòng)脈管腔明顯狹窄，內(nèi)膜增生、變厚；使用不同劑量的ASTⅣ干預(yù)，頸動(dòng)脈內(nèi)膜增生顯示劑量依賴性漸減輕(見圖1)。在放大400倍的光學(xué)顯微鏡下觀察到球囊損傷模型組大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜的平滑肌細(xì)胞在靠近管腔側(cè)形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞體積明顯增大，排列紊亂，而且細(xì)胞核明顯變大?？拷鼉?nèi)彈力板側(cè)的平滑肌細(xì)胞核變小，排列緊密，證明ASTⅣ能夠劑量依賴性地抑制大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜增生(見圖2)。

模型組管腔面積、內(nèi)膜面積、內(nèi)膜/中膜比分別與假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。ASTⅣ〔20 mg/(kg·d)〕、〔40 mg/(kg·d)〕和〔60 mg/(kg·d)〕都抑制了大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜的增生，ASTⅣ〔20 mg/(kg·d)〕、〔40 mg/(kg·d)〕、〔60 mg/(kg·d)〕組的內(nèi)膜面積、管腔面積、內(nèi)膜/中膜比分別與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)，見表1。

圖1 頸總動(dòng)脈球囊損傷14 d后各組血管壁形態(tài)觀察(HE染色，×100)

圖2 頸總動(dòng)脈球囊損傷14 d后各組大鼠血管壁形態(tài)觀察(HE染色，×400)

組別n管腔面積(m2)內(nèi)膜面積(m2)內(nèi)膜/中膜比假手術(shù)組9113 311±10 2555 660±6 0330.15±0.22模型組922 345±11 2321)95 211±11 0231)1.77±0.121)ASTⅣ〔20 mg/(kg·d)〕組964 556±12 3322)51 511±1 1352)0.81±0.112)ASTⅣ〔40 mg/(kg·d)〕 組1074 666±10 9893)40 444±7 8773)0.66±0.163)ASTⅣ〔60 mg/(kg·d)〕 組999 000±11 2883)26 433±7 0333)0.45±0.113)

與假手術(shù)組比較：1)P<0.01；與模型組比較：2)P<0.05；3)P<0.01

2.2ASTⅣ對(duì)PCNA陽性表達(dá)的影響 普通光學(xué)顯微鏡下觀察，PCNA表達(dá)在平滑肌細(xì)胞的胞核中，陽性細(xì)胞核顯示棕色，假手術(shù)組PCNA表達(dá)量很低，陽性表達(dá)指數(shù)(3.88±1.50)%。而PCNA含量在模型組中顯著增高，陽性指數(shù)(75.68±8.50)%。低、中、高劑量ASTⅣ干預(yù)組的PCNA在內(nèi)膜中表達(dá)均降低，陽性指數(shù)分別為(60.68±9.55)%，(50.77±9.10)%，(40.68±9.50)%，分別與模型組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)。見圖3。

2.3ASTⅣ對(duì)頸動(dòng)脈內(nèi)膜中PDGF-BB表達(dá)的影響 PDGF-BB在假手術(shù)組中少量表達(dá)，累積光密度為(0.33±0.10)。球囊損傷后大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜中PDGF-BB表達(dá)明顯增加。球囊損傷的模型組頸動(dòng)脈內(nèi)膜中可觀察到大量表達(dá)的PDGF-BB，累積光密度為(0.78±0.15)，與假手術(shù)組比較，有顯著差異(P<0.01)。低、中、高劑量ASTⅣ干預(yù)組觀察到頸動(dòng)脈內(nèi)膜PDGF-BB表達(dá)均降低，其累積光密度分別為(0.70±0.25)、(0.60±0.33)、(0.55±0.16)，與模型組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且隨著ASTⅣ劑量增加，差異更顯著(見圖4)。

2.4各組大鼠頸總動(dòng)脈中ROS含量的比較 假手術(shù)組頸總動(dòng)脈ROS有少量表達(dá)，OD值(0.264±0.062)，大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷后的模型組ROS表達(dá)明顯增加，OD值(1.168±0.092)，與假手術(shù)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。ASTⅣ低、中、高劑量組大鼠頸總動(dòng)脈ROS表達(dá)均下降，OD值分別為(0.984±0.088)、(0.782±0.075)、(0.328±0.071)，與模型組比較ROS產(chǎn)生明顯降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)。

圖3 球囊損傷頸總動(dòng)脈14 d后PCNA在內(nèi)膜中的表達(dá)比較(免疫組化染色，×400)

圖4 各組大鼠頸總動(dòng)脈內(nèi)膜中PDGF-BB表達(dá)的比較(免疫組化染色，×400)

3 討 論

PCI是目前CHD手術(shù)治療的有效方法之一，藥物洗脫支架(DES)的臨床應(yīng)用促使PCI術(shù)后ISR和再次靶血管血運(yùn)重建率顯著降低，但是由于越來越多復(fù)雜冠狀動(dòng)脈病變患者和高危CHD患者接受介入治療，ISR發(fā)生率仍高達(dá)5%～20%〔8〕。再狹窄的發(fā)生涉及多種病理生理學(xué)機(jī)制，包括持續(xù)存在的VSMCs的過度增殖與遷移、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、相關(guān)炎癥反應(yīng)及血管新生內(nèi)膜過度增生。有學(xué)者研究顯示，組織因子暴露為支架置入后刺激血栓形成的重要因素，大約在1 w血小板聚集并形成血栓達(dá)到最高值。血栓形成加重發(fā)生再狹窄，血小板活化過程中釋放的PDGF等刺激中層VSMCs增殖和遷移，導(dǎo)致出現(xiàn)一系列自身修復(fù)反應(yīng)，加重ISR〔9〕。PDGF在VSMCs增殖及遷移、表型轉(zhuǎn)化等過程中發(fā)揮重要作用〔10〕。近年來，嘗試研究的一些抑制PDGF及其受體相互作用或抑制其表達(dá)，導(dǎo)致抑制VSMCs增殖及遷移的試驗(yàn)，具有較好的應(yīng)用前景，只是多數(shù)研究?jī)H局限于細(xì)胞水平，并未在整體動(dòng)物模型上獲得有效驗(yàn)證；且ASTⅣ對(duì)動(dòng)脈損傷后VSMCs增殖及其遷移的影響及相關(guān)機(jī)制較少報(bào)道。

目前國(guó)際上建立血管再狹窄的動(dòng)物模型主要有兩種方法：(1)手術(shù)損傷；(2)手術(shù)損傷+高脂飲食。因?yàn)閷?shí)施單純的手術(shù)損傷方法簡(jiǎn)便易行，而且不可控因素容易控制，因此國(guó)際上目前大多采用單純手術(shù)損傷的方法建立血管再狹窄的整體動(dòng)物模型。既往研究顯示大鼠血管內(nèi)皮損傷后發(fā)生ISR的機(jī)制跟人類支架植入術(shù)后支架內(nèi)再狹窄發(fā)生機(jī)制相似，球囊損傷24 h VSMCs即能出現(xiàn)增殖和遷移，14 d VSMCs增殖達(dá)最高峰，形成可靠的內(nèi)膜增生。本實(shí)驗(yàn)表明我們成功建立了頸動(dòng)脈內(nèi)膜損傷模型。作為黃芪主要活性成分的ASTⅣ,具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、降壓、強(qiáng)心、保護(hù)心肌細(xì)胞、降低血糖、抗細(xì)胞凋亡和抗炎、抗病毒等多方面的藥理作用〔11〕。本研究結(jié)果表明，ASTⅣ顯著降低球囊損傷頸動(dòng)脈內(nèi)膜面積和內(nèi)膜/中膜比值，且顯示劑量依賴性，從形態(tài)學(xué)角度觀察了ASTⅣ在體內(nèi)能夠抑制頸動(dòng)脈內(nèi)膜增生。PCNA合成及表達(dá)在增殖細(xì)胞核可增加，但很少出現(xiàn)在靜止細(xì)胞，其表達(dá)高低表示細(xì)胞進(jìn)行DNA復(fù)制和分裂增殖的程度，在細(xì)胞周期的S期達(dá)最大值，能夠特異性反映S期活性。因此，其表達(dá)量測(cè)定能夠很好評(píng)價(jià)VSMCs的增殖狀態(tài)〔12〕。本研究中，模型組大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷后14 d新生內(nèi)膜中PCNA含量最高，其分布顯示“內(nèi)疏外密”的特點(diǎn)，管腔側(cè)較稀疏，近彈力板側(cè)稠密，表明VSMCs由外膜向內(nèi)膜增殖和遷移，這跟其他研究〔13〕報(bào)道的平滑肌細(xì)胞向內(nèi)膜遷移的結(jié)論一致。在不同劑量ASTⅣ干預(yù)組，新生內(nèi)膜中PCNA表達(dá)下降，表明ASTⅣ抑制了平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，進(jìn)一步抑制了頸動(dòng)脈內(nèi)膜的增生。

既往研究〔14〕表明，PDGF主要來源于巨噬細(xì)胞、VSMCs、內(nèi)皮細(xì)胞、血小板的α顆粒等。PDGF-BB主要在 VSMCs、 內(nèi)皮細(xì)胞、 巨噬細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞中表達(dá)，是間充質(zhì)細(xì)胞(如 VSMCs、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等)的強(qiáng)效有絲分裂原，參與調(diào)控細(xì)胞增殖、遷移、分化、細(xì)胞存活、細(xì)胞外基質(zhì)(ECM) 生成等過程。在可溶性多肽、活性氧、低氧等外界刺激下，PDGF以旁分泌、自分泌的方式與細(xì)胞膜受體結(jié)合發(fā)揮作用。PDGF可促進(jìn)多種細(xì)胞的增殖，如VSMCs、成纖維細(xì)胞、系膜細(xì)胞等，與動(dòng)脈粥樣硬化、支架內(nèi)再狹窄、血管重塑、組織器官纖維化等病理過程密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明PDGF促進(jìn)了球囊損傷的頸動(dòng)脈內(nèi)膜增生，與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致〔15,16〕。Xu等〔15〕研究指出，大鼠動(dòng)脈球囊損傷后，血清PDGF-BB水平亦顯著升高；Kim等〔16〕用25 ng/ml PDGF-BB刺激SD大鼠主動(dòng)脈VSMCs 24 h，采用CCK-8方法分析細(xì)胞增殖情況，結(jié)果表明PDGF-BB顯著刺激VSMCs增殖，PDGF-BB組VSMCs的增殖細(xì)胞數(shù)達(dá)對(duì)照組的1.9倍。應(yīng)用不同劑量的ASTⅣ干預(yù)后，頸動(dòng)脈內(nèi)膜面積、內(nèi)膜/中膜比、PDGF表達(dá)顯著降低，證明ASTⅣ抑制了PDGF-BB在新生內(nèi)膜的表達(dá)，且ASTⅣ對(duì)該生長(zhǎng)因子的抑制與PCNA表達(dá)抑制的趨勢(shì)相一致，但其具體機(jī)制尚不清楚，目前認(rèn)為其可能與ASTⅣ抗氧化反應(yīng)，清除氧自由基的功能有關(guān)。既往研究表明，球囊損傷后發(fā)生再狹窄與機(jī)體的氧化應(yīng)激反應(yīng)密切相關(guān)。經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈成形術(shù)(PTCA)術(shù)后短時(shí)間內(nèi)內(nèi)皮細(xì)胞受損部位釋放大量ROS，引起一系列連鎖反應(yīng)，導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙，釋放眾多細(xì)胞因子，進(jìn)而刺激VSMCs的增殖和ECM重塑〔17〕。ROS通過增加VSMCs中多種生長(zhǎng)因子的表達(dá)，刺激產(chǎn)生PDGF〔18〕。本研究表明ROS升高導(dǎo)致PDGF-BB表達(dá)升高，刺激內(nèi)膜增生，本研究結(jié)果與之一致。不同劑量的ASTⅣ干預(yù)后ROS含量呈劑量依賴性的降低，與Leite等〔19〕研究結(jié)果一致。Leite等〔19〕研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)皮損傷后14 d內(nèi)，促進(jìn)過氧化硝基物質(zhì)大量生成，導(dǎo)致氧化應(yīng)激，VSMCs在血管中膜大量增殖。而期間若給予抑制ROS的物質(zhì)，管腔狹窄率顯著降低，同時(shí)產(chǎn)生ECM減少，并增加產(chǎn)生一氧化氮。ROS可做為第二信使直接參與到VSMCs增殖的信號(hào)通路中。ten Freyhaus等〔20〕研究發(fā)現(xiàn)，加進(jìn)氧化酶抑制劑能夠抑制PDGF誘導(dǎo)的VSMCs增殖、遷移，進(jìn)一步證實(shí)VSMCs的增殖離不開ROS參與。Qiu等〔21〕研究表明，ASTⅣ能夠抑制ROS產(chǎn)生和升高SOD活性，改善同型半胱氨酸導(dǎo)致的內(nèi)皮失功能。ASTⅣ通過抑制ROS產(chǎn)生，抑制PDGF-BB表達(dá)，從而降低了PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs的遷移和增殖，抑制球囊損傷頸動(dòng)脈內(nèi)膜的增生，保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞，發(fā)揮預(yù)防血管再狹窄的作用。

目前有較多關(guān)于植物提取物對(duì)PDGF介導(dǎo)VSMCs增殖及遷移抑制作用的研究，但多是從細(xì)胞實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證，相應(yīng)的ISR動(dòng)物實(shí)驗(yàn)較少。曾有報(bào)道ASTⅣ能夠保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞〔22〕，本研究通過應(yīng)用不同劑量的ASTⅣ干預(yù)球囊損傷大鼠頸動(dòng)脈模型，在整體動(dòng)物水平證實(shí)ASTⅣ抑制了球囊損傷的頸動(dòng)脈內(nèi)膜增生，并以PDGF為靶點(diǎn)，球囊損傷頸動(dòng)脈內(nèi)膜后刺激ROS表達(dá)升高，ROS介導(dǎo)PDGF表達(dá)升高，而ASTⅣ呈劑量依賴性的抑制動(dòng)脈內(nèi)膜ROS介導(dǎo)的PDGF升高，進(jìn)而防止內(nèi)膜過度增生，為ISR的治療提供了新靶點(diǎn)，但其詳細(xì)的機(jī)制仍需進(jìn)一步深入研究。