周未花 朱芬芳

人乳頭瘤病毒（HPV）在女性生殖道感染上具有種族及地域差異性［1］，高危型HPV的持續(xù)感染與宮頸癌的發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)，通過對高危型HPV定期檢測可以有效防治宮頸癌。宮頸癌篩查作為一項惠民工程已在全國范圍內(nèi)展開，2017年三門縣由最初的TCT結(jié)合陰道鏡活檢模式轉(zhuǎn)變?yōu)楦呶Ｐ腿巳轭^狀瘤病毒（HPV）聯(lián)合TCT及陰道鏡活檢模式。本調(diào)查旨在了解該地區(qū)的高危型HPV感染情況，為制定有效的宮頸癌干預(yù)措施和診斷治療提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料來源 收集2017年6月至11月本院接受宮頸癌篩查的女性10200例，年齡35～64歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：有性生活史≥1年；檢查前3d未做婦科檢查或陰道給藥；24h內(nèi)無性生活；無宮頸手術(shù)史；無全身免疫性疾??；非妊娠及月經(jīng)期。

1.2 方法 對納入對象行高危型HPV基因分型檢測，陽性對象行TCT檢測，如TCT結(jié)果為陽性的，再行陰道鏡下活檢送檢病理；其中HPV基因型別為16及18型直接行陰道鏡下活檢送檢病理。（1）標(biāo)本采集及保存：暴露宮頸，一次性棉簽擦去陰道及宮頸口分泌物，用采集刷插入宮頸鱗柱交界處，順時針旋轉(zhuǎn)3～4圈后緩緩取出，將采集刷的刷頭取下，裝入有細(xì)胞保存液的樣本瓶中，旋緊瓶口。采集的樣本要求在室溫放置≤2h，4℃保存≤24h，-20℃保存≤3個月，樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融。（2）檢測方法：所有樣本統(tǒng)一外送杭州迪安醫(yī)學(xué)檢驗公司，采用PCR-反向點雜交法，對含有宮頸分泌物采用HPV檢測試劑，對標(biāo)本進行DNA分離提取、PCR擴增、雜交等過程，通過阻封、酶標(biāo)、洗脫及顯色等對感染結(jié)果、亞型進行判斷。（3）儀器及試劑：SLAN96S熒光PCR儀及相關(guān)配套由上海宏石醫(yī)療有限公司提供，HPV基因分型檢測系統(tǒng)及檢測試劑盒均由上海之江公司提供。（4）HPV基因分型：共15種 高危型HPV 基因型別，包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68及82。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料用%表示，組間比較用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 高危型HPV檢出情況 10200例標(biāo)本中高危型HPV檢測陽性1007例，陽性率為9.87%；多數(shù)為單一感染，占9.42%，以58型為主，占20.75%；其次為52和16型，分別占19.17%及18.27%，見表1。

表1 15種高危型HPV的檢出情況［n（%）］

2.2 各年齡段HPV總感染情況 HPV總感染率隨著年齡的增長而升高，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表 2。

表2 各年齡段HPV總感染情況

2.3 各年齡段HPV單一及混合感染情況 HPV單一感染率隨著年齡的增長而升高，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），混合感染率隨著年齡的增長而下降，但各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3 各年齡段HPV單一及混合感染的情況［n（%）］

2.4 各型HPV的活檢結(jié)果 陰道鏡下活檢陽性率以16型及18型最為常見，各型間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表 4。

表4 各型HPV的活檢結(jié)果

3 討論

宮頸癌是婦科最常見的惡性腫瘤之一，世界范圍內(nèi)每年約有50多萬新增病例，其中80%發(fā)生于發(fā)展中國家［2］，我國從2000年起呈現(xiàn)明顯的上升趨勢［3］，其中99.7%宮頸癌患者中能檢出高危型HPV。而從宮頸感染發(fā)展成宮頸癌則需要幾年乃至幾十年的時間，宮頸病變的早期發(fā)現(xiàn)、診斷和治療對宮頸癌的防治具有重要意義。

HPV在宮頸的感染分布上具有地域性。本資料顯示，高危型的HPV檢出率有9.87%，以58型最為常見，占20.75%，其次最52及16型，分別占19.17%和18.27%。有報道湛江區(qū)［4］的高危型HPV檢出率為14.69%，16、18及52型排列前三，而陜西?。?］延安地區(qū)則到達(dá)38.42%，16、58及52最常見。但通過TCT陽性篩選后，陰道鏡下活檢發(fā)現(xiàn)16型的陽性活檢率最高，達(dá)36.41%，18型占31.34%，31型占28.21%，58型占13.88%，52型則占9.84%。美國癌癥 協(xié)會、美國陰道鏡和宮頸病理學(xué)會 、美國臨床病理學(xué)會（ASCP）在宮頸病變篩查指南中特別 強調(diào)了HPV16和 HPV18型［6］，但HPV58型和 HPV52型在國內(nèi)也應(yīng)予重視。

本資料顯示，在年齡分布上，高危型HPV的總檢出率隨著年齡的增長而升高，56～64歲組為11.60%，46～54歲組為9.79%，35～45歲組為9.39%，與湛江地區(qū)［4］和延安地區(qū)［5］相一致，但與溫州地區(qū)［7］有差異。56～64歲婦女處于圍絕經(jīng)期或絕經(jīng)期，體內(nèi)激素水平較低，機體免疫力降低，導(dǎo)致生殖道容易感染HPV且不易自身免疫清除，因此感染率增高。

高危型HPV的單一感染率亦隨著年齡的增長而升高，56～64歲組為4.45%，46～54歲組為3.24%，35～45歲組為1.74%，而混合感染率雖然隨著年齡的增長表現(xiàn)出下降趨勢，分別為0.23%、0.16%及0.07%，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。部分學(xué)者認(rèn)為HPV的混合感染較單一感染時病毒載量高，導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生風(fēng)險增加至31.8倍，發(fā)病時間快，且復(fù)發(fā)率高；但有研究認(rèn)為不同型別的HPV間存在著拮抗作用，不會增加宮頸癌的發(fā)病幾率，具體仍需要臨床大數(shù)據(jù)深入研究。