向小龍 朱圣亮 胡曉輝 陳洪波 陳 蘇

(湖北省恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院西醫(yī)部泌尿外科，恩施 445000，電子郵箱：xxlong05201096@126.com)

膀胱腫瘤是泌尿系最常見(jiàn)的腫瘤，對(duì)于早期膀胱腫瘤，目前最主要的治療方法是腫瘤電切術(shù)聯(lián)合藥物膀胱灌注治療，但由于膀胱腫瘤具有易復(fù)發(fā)性，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，因此早期診斷及治療對(duì)于提高膀胱腫瘤患者的預(yù)后具有重要的意義。微量元素是人體中所必需的物質(zhì)，其與腫瘤的關(guān)系逐漸引起醫(yī)療界的重視。硒是人體必需的微量元素之一，研究表明，硒與腫瘤(前列腺癌、卵巢癌等)的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后具有重要的關(guān)系[1-2]，但目前關(guān)于硒與膀胱癌的相關(guān)研究較少。本研究通過(guò)檢測(cè)膀胱癌患者血清中硒的含量，探討其與膀胱癌發(fā)生及患者預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年1月至2017年2月在恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院泌尿外科住院的117例膀胱癌患者作為研究對(duì)象(觀察組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者無(wú)其他系統(tǒng)腫瘤史，入組前未行放化療，無(wú)精神疾病病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他系統(tǒng)腫瘤患者，嚴(yán)重心肺功能不全不能耐受手術(shù)者，有嚴(yán)重精神疾患者，膀胱腫瘤未行腫瘤電切術(shù)治療者。其中男性67例、女性50例，年齡39～82(60.3±1.5)歲，術(shù)前均經(jīng)B超、CT診斷為膀胱腫瘤，術(shù)后病理診斷均為尿路上皮癌，其中Ⅰ期65例、Ⅱ期47例、Ⅲ～Ⅳ期5例(因不能行膀胱全切術(shù)而行姑息性治療)。另選取同期在本院健康體檢的67例志愿者作為對(duì)照組。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)泌尿系相關(guān)疾病及其他腫瘤相關(guān)疾病，無(wú)精神疾患病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有放化療病史者。其中男性41例、女性26例，年齡41～78(59.9±1.6)歲。兩組研究對(duì)象的性別和年齡差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，具有可比性。本研究通過(guò)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查，在研究前均將本研究?jī)?nèi)容詳細(xì)告知研究對(duì)象，所有研究對(duì)象均對(duì)本研究知情并簽署知情同意。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集及硒含量的檢測(cè)：用含肝素抗凝的采血專用管抽取所有對(duì)象晨起空腹靜脈血3 mL，將試管中的樣本顛倒混勻，3 000 r/min離心4 min，保留上層血清，立即采用貝克曼-庫(kù)爾特AU5811全自動(dòng)生化儀(產(chǎn)品編號(hào)：YZB/JAP 3087-2011)檢測(cè)血清硒含量。儀器校準(zhǔn)：每年由該儀器維修工程師參照廠方的技術(shù)規(guī)范對(duì)儀器進(jìn)行一次校準(zhǔn)。微量元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(光譜純?cè)噭?由武漢元景商貿(mào)公司資助，試劑均在有效期內(nèi)使用。項(xiàng)目校準(zhǔn)：血清硒含量檢測(cè)前，先將試劑盒置于儀器上校準(zhǔn)穩(wěn)定后再應(yīng)用；試劑批號(hào)更換后，重新校準(zhǔn)檢測(cè)條件。所有步驟均在常溫下按照儀器使用說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作人員均為本院專業(yè)的檢測(cè)工作者。

1.2.2 腫瘤患者的治療方法：觀察組腫瘤患者先行經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術(shù)后均規(guī)律行吡柔比星(30 mg/次)膀胱灌注治療，均灌注16次(每周1次，灌注8次后更改為每月1次，再次連續(xù)治療8次)，除此之外未予其他特殊治療。所有患者均隨訪2年，每3個(gè)月定期行膀胱鏡檢查，觀察膀胱腫瘤復(fù)發(fā)情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以(x±s)表示，兩組間比較采用成組設(shè)計(jì)t檢驗(yàn)或t′檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q法；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比表示，比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法；采用Kaplan-Meier法描繪生存曲線，生存率差異比較采用log-rank檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 觀察組與對(duì)照組之間，不同病理分期腫瘤患者之間血清硒含量的差異 觀察組患者的血清硒含量為(2.12±0.37)μmol/L，低于對(duì)照組的(3.89±0.56)μmol/L(t′=23.140，P<0.001)。Ⅰ 期、 Ⅱ 期、 Ⅲ～Ⅳ期膀胱腫瘤患者的血清硒含量呈降低趨勢(shì)，其中 Ⅱ 期、Ⅲ～Ⅳ期患者的血清硒含量均低于Ⅰ期患者(均P<0.05)，但Ⅱ期與Ⅲ～Ⅳ期患者的血清硒含量相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 不同臨床病理分期膀胱癌患者血清硒含量的比較(x±s,μmol/L)

2.2 血清硒含量與膀胱癌患者預(yù)后的關(guān)系 術(shù)后隨訪2年，中途因其他疾病死亡3例，因不能耐受而結(jié)束治療及隨訪4例，其余110例患者均完成隨訪，隨訪完成率為94.0%。根據(jù)腫瘤患者治療前血清硒含量的均數(shù)2.21 μmoL/L，將膀胱腫瘤患者分為富硒組(血清硒含量高于均數(shù))62例及少硒組(血清硒含量低于均數(shù))48例。富硒組術(shù)后2年有2例復(fù)發(fā)膀胱癌，復(fù)發(fā)率為3.2%，少硒組術(shù)后2年有8例患者復(fù)發(fā)膀胱癌，復(fù)發(fā)率為16.7%，富硒組術(shù)后2年膀胱癌復(fù)發(fā)率低于少硒組(χ2=4.399，P=0.036)。 Kaplan-Meier分析結(jié)果顯示，兩組患者在術(shù)后的前12個(gè)月的累積生存率無(wú)明顯差異，而術(shù)后12個(gè)月后，少硒組的累積生存率逐漸下降，富硒組的累計(jì)生存率下降較平緩，生存曲線較高。富硒組術(shù)后2年的累積生存率高于少硒組患者(χ2=6.052,P=0.014)，見(jiàn)圖1。

圖1 不同血清硒含量的膀胱癌患者術(shù)后累積生存曲線圖

3 討 論

微量元素廣泛存在于自然環(huán)境中，通過(guò)大氣、水、食物等進(jìn)入人體，是人體生命活動(dòng)所必需的物質(zhì)。隨著對(duì)微量元素的作用研究的不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)機(jī)體內(nèi)微量元素的異常與疾病的發(fā)生發(fā)展具有重要聯(lián)系。有研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體內(nèi)微量元素過(guò)多或過(guò)少均與腫瘤密切相關(guān)，直接影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后[3]。硒主要以硒代半胱氨酸的形式參與蛋白質(zhì)合成和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的形成，可阻止過(guò)氧化物的自由基形成[4]。有研究表明，硒對(duì)前列腺癌的發(fā)生具有重要的作用[1]，同時(shí)，低硒飲食可明顯降低小鼠肝、腎等組織中硒結(jié)合蛋白1的表達(dá)[5]，而后者與多種腫瘤如前列腺癌[6]、胃癌[7]等的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，推測(cè)血清中硒可能通過(guò)影響硒結(jié)合蛋白的合成而影響機(jī)體內(nèi)一系列信號(hào)傳導(dǎo)通路，從而影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展[8]，但其具體機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

有研究發(fā)現(xiàn),硒與多種腫瘤的耐藥有關(guān)，硒含量升高可明顯提高腫瘤的化療敏感性[9]。Sieja[2]通過(guò)對(duì)卵巢癌患者術(shù)后行化療的同時(shí)予以補(bǔ)充硒的治療方式，發(fā)現(xiàn)治療緩解率明顯升高，說(shuō)明硒對(duì)提高惡性腫瘤的化療敏感性具有重要的作用。還有研究發(fā)現(xiàn)，硒可明顯提高化療藥物紫杉醇的敏感性，促進(jìn)癌細(xì)胞的凋亡[10-11]，但對(duì)于其具體機(jī)制尚無(wú)統(tǒng)一的共識(shí)。膀胱腫瘤是泌尿外科最常見(jiàn)的腫瘤，近年來(lái)其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)[12]，嚴(yán)重影響人們的身體健康。目前對(duì)于早期膀胱腫瘤的主要治療方案為膀胱腫瘤電切術(shù)聯(lián)合術(shù)后膀胱灌注治療，但仍有部分患者術(shù)后膀胱腫瘤復(fù)發(fā)，需再次行手術(shù)治療，甚至行膀胱癌根治術(shù)，其原因一方面可能與膀胱癌的高度易復(fù)發(fā)性有關(guān)，另一方面可能與膀胱癌細(xì)胞對(duì)于膀胱灌注藥物的敏感性有關(guān)。因此，積極尋找敏感的蛋白標(biāo)志物來(lái)預(yù)測(cè)膀胱癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，對(duì)于選擇敏感治療藥物及判斷患者的預(yù)后具有重要的意義。

帕提曼·米吉提等[13]研究發(fā)現(xiàn)，低硒含量土壤地區(qū)的宮頸癌發(fā)病率較高。本研究中，對(duì)膀胱癌患者及健康體檢者血清硒含量進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，膀胱癌患者血清硒的含量明顯降低(P<0.05)，與上述研究結(jié)果相似，這提示硒對(duì)膀胱腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有重要的意義，低硒含量可能促進(jìn)膀胱癌的發(fā)生。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，隨著膀胱癌臨床分期的升高，血清硒的含量呈降低趨勢(shì)，其中Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期患者血清硒含量均低于Ⅰ期患者(均P<0.05)，這提示硒可能與膀胱癌的進(jìn)展有一定的關(guān)系，而Ⅱ期與Ⅲ～Ⅳ期患者的血清硒含量相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，這可能與樣本量較少有關(guān)。

膀胱腫瘤患者術(shù)后行膀胱灌注治療是目前預(yù)防膀胱癌復(fù)發(fā)的有效手段，但本研究中，行膀胱灌注治療后仍有部分患者復(fù)發(fā)，提示不同膀胱癌患者對(duì)化療藥物的敏感性可能存在差異。因此，尋找有效的標(biāo)志物來(lái)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性具有重要的意義。本研究對(duì)膀胱癌患者進(jìn)行術(shù)后隨訪發(fā)現(xiàn)，富硒組術(shù)后2年膀胱癌復(fù)發(fā)率低于少硒組(P<0.05)，即血清中硒含量越高，術(shù)后復(fù)發(fā)的概率越小，這可能是由于血清硒含量的升高可提高機(jī)體硒結(jié)合蛋白的表達(dá)水平，而后者可增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性[14]。本研究生存分析結(jié)果顯示，富硒組術(shù)后2年的累積生存率較少硒組高(P<0.05)，且生存率下降較少硒組晚，這可能也與血清高硒含量具有抗腫瘤效應(yīng)有關(guān)。

綜上所述，膀胱癌患者血清硒含量降低，血清中硒含量降低或可促進(jìn)膀胱癌的發(fā)生發(fā)展，且在一定程度上影響膀胱癌患者術(shù)后的復(fù)發(fā)，但其具體機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。值得注意的是，腫瘤的發(fā)生是多因素綜合作用的結(jié)果，今后需要開展更為全面、系統(tǒng)的研究。