尹春瓊 王寧 白志瑤 董靜 劉永紅 劉玲麗 涂燚杰

干燥綜合征（sjogren syndrome，SS）是一種以淋巴細(xì)胞灶性浸潤(rùn)和外分泌腺功能損傷為特征的病因未明的慢性炎癥性自身免疫性疾病，多發(fā)于40～60歲年齡段人群，發(fā)病率為0.5%～1.0%，居風(fēng)濕科自身免疫系統(tǒng)疾病第2位[1]，女性發(fā)病率高于男性。SS的主要臨床表現(xiàn)為口干、眼干，病情嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致全身多器官及多系統(tǒng)受累[2]。2002年SS國(guó)際分類（診斷）標(biāo)準(zhǔn)和2012年SS美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)分類（診斷）標(biāo)準(zhǔn)中，將抗SSA和抗SSB血清學(xué)陽性作為診斷標(biāo)準(zhǔn)[3-4]。有研究表明，抗SSA/SSB陽性的SS患者超過50%[5]，抗SSA和抗SSB陽性率分別為33%～74%和23%～52%[6]，且單獨(dú)表現(xiàn)抗SSA陽性患者比單獨(dú)表現(xiàn)抗SSB陽性患者更多見，但SS患者抗SSB陽性可提示臨床病情更嚴(yán)重。1968年由Chisholm第一次提出以唇部小唾液腺活檢（簡(jiǎn)稱唇腺活檢）替代大涎腺活檢并廣泛用于診斷SS，具有較高臨床診斷價(jià)值。分析本院門診及住院SS患者的抗核抗體（antinuclear antibody，ANA）、抗SS抗體（包括抗SSA和抗SSB）、抗Ro-52聯(lián)合唇腺活檢病理檢測(cè)結(jié)果，旨在為臨床提供更有意義的檢驗(yàn)組合，減少漏診和誤診，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年9月—2019年9月本院76例門診或住院SS患者，其中男性12例，女性54例；平均年齡（46.0±9.0）歲；所有患者診斷均符合2012年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)SS的分類標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 儀器與試劑 ANA檢測(cè)試劑盒和ANA譜（ANAs）免疫球蛋白G（immonoglobulin G，IgG）檢測(cè)試劑盒（歐蒙印跡法）均購自德國(guó)歐蒙公司，免疫印跡儀為德國(guó)歐蒙公司EUROBlot-MasterⅡ，膜條掃描儀為日本佳能掃描儀 LIDE 120，熒光顯微鏡為德國(guó)歐蒙公司Eurostar Ⅲ plus。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 標(biāo)本采集 用真空負(fù)壓采血管收集SS患者清晨空腹不抗凝肘靜脈血約3～5 mL，以3 500 r/min（離心半徑10 cm）離心15 min，立即分離血清進(jìn)行ANA和ANAs檢測(cè)，并對(duì)所有受檢者進(jìn)行唇腺活檢。操作過程嚴(yán)格按試劑盒說明書及標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程執(zhí)行。

1.3.2 ANA檢測(cè) ANA檢測(cè)采用間接免疫熒光法（indirect immunofluorescence，IIF），血清抗體稀釋度分別為 1：100、1：320、1：1 000、1：3 200，抗體效價(jià)≥1：100即ANA陽性。

1.3.3 ANAs檢測(cè) ANAs檢測(cè)采用線性免疫印跡法（line immuno assay，LIA），患者膜條與標(biāo)準(zhǔn)譜膜條顯色位置對(duì)比，相應(yīng)抗體位置陽性，即視為膜條陽性。

1.3.4 唇腺活檢 由臨床醫(yī)生對(duì)所有SS患者進(jìn)行唇部小唾液腺活檢，病理科醫(yī)生出具報(bào)告。所有實(shí)驗(yàn)室操作人員均曾接受為期半年的專業(yè)進(jìn)修培訓(xùn)并具有主管檢驗(yàn)技師級(jí)以上職稱。經(jīng)唇腺活檢病理檢測(cè)確診標(biāo)準(zhǔn)：唇腺活檢提示局灶性淋巴細(xì)胞性涎腺（focallymphocyticsialadenitis，F(xiàn)LS）的淋巴細(xì)胞灶≥1個(gè)（4 mm2組織內(nèi)至少50個(gè)淋巴細(xì)胞聚集于唇腺間質(zhì)者為1個(gè)灶）為陽性標(biāo)準(zhǔn)，即灶性指數(shù)（focus score，F(xiàn)S）≥1。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 SS各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果 76例SS患者血清樣本中，ANA陽性率最高，唇腺活檢次之，抗SSA/SSB陽性率最低。見表1。

表1 SS患者血清樣本各項(xiàng)臨床評(píng)價(jià)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果

2.2 自身抗體聯(lián)合唇腺活檢診斷SS結(jié)果 ANA+抗SSA、ANA+抗SSB、ANA+抗Ro-52陽性率均為100.0%，抗SSA+抗SSB陽性率均較好（97.3%），ANA+唇腺活檢的陽性率最低（80.3%）。見表2。

表2 ANA、ANAs聯(lián)合唇腺活檢診斷SS的陽性率

3 討論

我國(guó)SS發(fā)病率為0.3%～0.7%，其中老年人群發(fā)病率高達(dá)3%～4%[2]。SS等慢性自身免疫性疾病的女性發(fā)病人數(shù)明顯高于男性，比例約為7：1，發(fā)病年齡集中在40～60歲，且隨年齡增加發(fā)病率增高。唇腺活檢目前已被廣泛應(yīng)用于SS診斷，尤其是改良式唇腺活檢術(shù)，具有創(chuàng)傷小、無需縫合拆線和傷口愈合快等優(yōu)點(diǎn)，患者依從性較好，易于接受，且操作簡(jiǎn)便，極少出現(xiàn)并發(fā)癥。有研究表明，ANA在多種結(jié)締組織疾病中均有表達(dá)[7]，且陽性率均較高，但在許多健康老年人群中也能檢測(cè)到低效價(jià)ANA，且特異性較差。因此，ANA可作為自身免疫性疾病的初篩指標(biāo)，但不能作為SS的主要診斷指標(biāo)，應(yīng)進(jìn)一步行ANAs檢測(cè)和唇腺活檢病理檢測(cè)確診。

本研究血清ANA、ANAs和唇腺活檢結(jié)果顯示，76例SS患者的ANA陽性率為90.7%；ANAs以抗SSA、抗SSB和抗Ro-52檢出陽性為主，陽性率分別為76.31%、71.05%和68.42%；唇腺活檢陽性率占84.21%。目前臨床診斷SS最常用的自身抗體是抗SSA和抗SSB[8]，其中抗SSB診斷SS特異性更高[9]，但上述兩種抗體均存在局限性，抗SSB對(duì)SS的診斷陽性率相對(duì)較低，而抗SSA在系統(tǒng)性紅斑狼瘡等許多其他自身免疫性疾病中陽性率亦較高，易造成SS的漏診和誤診[10]。抗Ro-52在許多其他自身免疫性疾病中陽性率較高，故抗Ro-52不能作為SS的特異性診斷指標(biāo)。

本組患者各項(xiàng)自身抗體聯(lián)合唇腺活檢結(jié)果表明，抗SSA聯(lián)合抗SSB的陽性率為97.3%，臨床診斷價(jià)值較高；而ANA聯(lián)合ANAs的診斷陽性率高，ANA聯(lián)合唇腺活檢的診斷陽性率為80.3%。由此可見，ANA聯(lián)合ANAs、唇腺活檢可作為自身免疫性疾病初篩的較好指標(biāo)，且陽性檢出率較高。而抗SSA聯(lián)合抗SSB雙陽性對(duì)臨床診斷原發(fā)性SS具有很好的診斷價(jià)值。唇腺活檢手術(shù)并發(fā)癥較小，多為短期可消失的并發(fā)癥，包括淤青、疼痛、出血、感染等，長(zhǎng)期并發(fā)癥為唇部感覺異常，發(fā)生率約為0%～6%[11-12]。唇腺活檢雖然為有創(chuàng)檢查，但可行性好，侵襲性較小，敏感性和特異性均較高，且被較為廣泛的應(yīng)用于SS患者臨床診斷中，與血清學(xué)及眼部檢查等指標(biāo)存在較好的相關(guān)性。尤其針對(duì)年齡較小、抗SSA/SSB陰性以及長(zhǎng)期伴口干、眼干等癥狀的疑似SS患者，唇腺活檢可作為診斷SS的金標(biāo)準(zhǔn)。綜上所述，在SS患者臨床診斷中采用聯(lián)合ANA、抗SSA、抗SSB及抗Ro-52以及唇腺活檢病理檢測(cè)能夠提高SS陽性檢出率及診斷的特異性和準(zhǔn)確率，避免單項(xiàng)檢查所致的誤診、漏診延誤患者治療時(shí)機(jī)，對(duì)SS的篩查和診斷治療有重要臨床價(jià)值，值得臨床推廣應(yīng)用。