蔣順琬，陳峙，賴文強(qiáng)，張勇，孫淑芬，麥慶春，陳大宇

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2019.35.004

[摘要] 目的 比較清熱化瘀與清熱益氣化瘀中藥浸漬治療急性軟組織損傷家兔的前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）的影響。方法 由華西醫(yī)學(xué)中心動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供40只SPF級(jí)雄性家兔，建立家兔急性軟組織損傷動(dòng)物模型，將其編號(hào)后，隨機(jī)分為空白組、造模組、清熱化瘀組以及清熱益氣化瘀組，觀測(cè)其皮下瘀血、肌肉腫脹和肌肉顏色，檢測(cè)24 h、72 h時(shí)各組受損肌肉組織的PGE2含量變化。結(jié)果 造模24 h、48 h、72 h時(shí)觀測(cè)損傷癥候指數(shù)并評(píng)分，72 h時(shí)，與空白組（0.00±0.00）分和造模組（3.08±0.26）分比較，清熱化瘀組（2.02±0.86）分和清熱益氣化瘀組（1.97±1.73）分損傷癥狀明顯改善，但兩組之間，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;檢測(cè)造模24 h、72 h后的PGE2含量，72 h后造模組（98.79±2.78）與清熱益氣化瘀組（73.42±4.12）pg/mL和清熱化瘀組（76.99±4.85）pg/mL比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但清熱化瘀組與清熱化瘀組之間，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P>0.05）。結(jié)論 相比清熱化瘀浸漬藥液，清熱益氣化瘀浸漬藥液對(duì)家兔軟組織受損部位的PGE2抑制效果更好，對(duì)急性軟組織損傷的消炎和修復(fù)有明顯作用。

[關(guān)鍵詞] 急性軟組織損傷;淸熱化瘀;益氣清熱化瘀;中藥浸漬液;中藥外治;PGE2

[中圖分類號(hào)] R274.3 ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A ? ? ? ? ?[文章編號(hào)] 1674-0742（2019）12（b）-0004-04

Effect of Heat of Blood and Invigorate Qi， Clear Heat and Remove Blood Stasis Chinese Medicine on Experimental Animal PGE2

JIANG Shun-wan， CHEN Zhi， LAI Wen-qiang， ZHANG Yong， SUN Shu-fen， MAI Qing-chun， CHEN Da-yu

Department of Orthopaedics， the Fourth Clinical Medical College of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine （Shenzhen Hospital of Traditional Chinese Medicine）， Shenzhen， Guangdong Province， 518030， China

[Abstract]Objective Effects of heat of blood and invigorate Qi， clear heat and remove blood stasis Chinese medicine on prostaglandin E2 （PGE2） in rabbits with acute soft tissue injury. Methods 40 SPF male rabbits were provided by the Animal Experimental Center of Huaxi Medical Center ， Animal models of acute soft tissue injury in rabbits were established. After being numbered， they were randomLy divided into blank group， model group， heat of blood group and invigorate Qi， clear heat and remove blood stasis group. The subcutaneous blood stasis， muscle swelling and muscle color were observed And Changes of PGE2 content in damaged muscle tissue of each group at 24 h，72 h were measured. Results The injury syndrome index was observed and scored at 24 h， 48 h， and 72 h. At 72 h， compared with the blank group （0.00±0.00）points and the model group （3.08±0.26）points， the heat of blood group （2.02±0.86）points combined with invigorate Qi， clear heat and remove blood stasis group （1.97±1.73）points were significantly improved， but the difference between the two groups was not significant （P>0.05）. The PGE2 content after 24 h， 48 h and 72 h was detected， and the model was established after 72 h. The group （98.79±2.78）pg/mL was significantly different from the invigorate Qi， clear heat and remove blood stasis group（73.42±4.12） pg/mL and the heat of blood group （76.99±4.85）pg/mL the difference was statistically significant（P<0.05）， but the heat of blood group and the heat of blood group no statistically significant difference （P>0.05）. Conclusion The phlegm-heating sputum immersion liquid and the invigorate Qi， clear heat and remove blood stasis sputum immersion liquid can reduce the soft tissue inflammation of the damaged part by inhibiting the increase of PGE2 content， and contribute to the recovery of acute soft tissue injury.

[Key words] Acute soft tissue injury;Clearing away heat and stasis;Yiqi Qingre Huayu;Chinese medicine impregnating solution;Chinese medicine external treatment;PGE2

急性軟組織損傷是在勞動(dòng)、運(yùn)動(dòng)等日常活動(dòng)中極易發(fā)生的一種骨科常見(jiàn)疾患，軟組織損傷的原因可分為扭傷和挫傷兩種，具有發(fā)病急、腫痛、壓痛、叩擊痛以及運(yùn)動(dòng)障礙等癥狀，給患者的日常生活、工作和學(xué)習(xí)帶來(lái)嚴(yán)重的影響[1]。機(jī)體受到外界暴力作用時(shí)產(chǎn)生PGE2，這是一種能引起炎癥反應(yīng)的生物活性很強(qiáng)的物質(zhì)，會(huì)導(dǎo)致局部組織腫脹、疼痛[2-3]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療急性軟組織損傷的方法主要有理療、局部冷療以及消炎鎮(zhèn)痛藥物等。中醫(yī)學(xué)在治療急性軟組織損傷方面一直有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，除了中藥口服之外，中藥外治也是臨床廣泛應(yīng)用的一種治療方法[4]。該次實(shí)驗(yàn)選取40只雄性家兔欲研究清熱益氣化瘀浸漬藥液、清熱化瘀浸漬藥液治療急性軟組織損傷對(duì)家兔PGE2的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1 ?動(dòng)物

SPF級(jí)雄性家兔40只（2.0～2.5 kg），由華西醫(yī)學(xué)中心動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.2 ?藥物及儀器

前列腺E2放免試劑盒（解放軍總醫(yī)院）;清熱益氣化瘀浸漬液（該院制劑，由黃連、黃岑、黃柏、梔子、大黃、紅花、冰片、地榆、黃芪等中藥組成，除冰片之外，其余藥材用清水漂洗1次，家蒸餾水煎取藥液，冰片、人工麝香在95%酒精中融解后，加入煎取液，裝瓶加鋁蓋高壓滅菌后備用）與清熱化瘀浸漬液（該院制劑，由黃連、黃岑、黃柏、梔子、大黃、紅花、冰片、地榆等中藥組成，除冰片之外，其余藥材用清水漂洗1次，加蒸餾水煎取藥液，冰片在95%酒精中融解后，加入煎取液，裝瓶加鋁蓋高壓滅菌后備用）;GC-1200全自動(dòng)γ放免計(jì)數(shù)儀（北京大學(xué)深圳醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室）。

1.3 ?分組及造模

將家兔編號(hào)后，隨機(jī)分為空白組、造模組、清熱化瘀組以及清熱益氣化瘀組，每組10只家兔。其中，造模組、清熱化瘀組以及清熱益氣化瘀組采用重物打擊造模法，實(shí)驗(yàn)前24 h用8%硫化鈉于家兔大腿后側(cè)脫毛，用200 g鐵塊從130 cm高沿空心管自由落體3次幾大家兔大腿后側(cè)軟組織，造成家兔局部軟組織損傷，以肉眼可見(jiàn)打擊部位明顯皮下出血及腫脹，數(shù)分鐘后觸摸有明顯腫脹感為造模成功[5]。造模成功30 min后，各組于受打擊處分別涂抹以下藥液0.5 mL，清熱化瘀組涂抹清熱化瘀浸漬液（該院制劑）、清熱益氣化瘀組涂抹清熱益氣化瘀浸漬液（該院制劑）、空白組涂抹蒸餾水，造模組只造模不涂藥[2]。

1.4 ?指數(shù)評(píng)定

造模后，每天觀察和測(cè)量受損部位腫脹、瘀斑情況并且進(jìn)行評(píng)分，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1;第24小時(shí)、72小時(shí)用放免法檢測(cè)家兔PGE2的含量。

表1 ? 損傷癥狀評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

1.5 ?PGE2含量的測(cè)定

于造模后24 h、72 h分別在各組中任取5只家兔，采用拉椎造成頸椎脫位方法處死，用手術(shù)刀切開(kāi)家兔受打擊部位皮膚，切取受打擊部位肌肉組織，加入生理鹽水漂洗1 min，用濾紙吸干，切取肌肉組織每20 mg加入1 mL生理鹽水，在勻漿器中均勻研磨15 min，倒入試管中，防止高速離心機(jī)離心15 min，取上清液備用，采用放免法測(cè)定勻漿液PGE2含量，具體操作嚴(yán)格按照試劑盒要求完成[2]。

1.6 ?統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，其中計(jì)數(shù)資料（%）進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料（x±s）進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 ?結(jié)果

2.1 ?損傷癥候指數(shù)比較

不同觀察時(shí)間損傷指數(shù)評(píng)分統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2。

3個(gè)造模實(shí)驗(yàn)小組組內(nèi)不同時(shí)點(diǎn)損傷癥候?qū)Ρ?。造模組在24 h、48 h和72 h 3個(gè)時(shí)點(diǎn)，皮下組織淤血、肌肉腫脹、肌肉顏色均由緩慢改善，損傷指數(shù)評(píng)分平緩降低，造模后48 h、72 h與24 h對(duì)比，72 h與48 h對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;清熱化瘀組在幾個(gè)觀察時(shí)點(diǎn)的損傷指數(shù)評(píng)分下降速度較快，受損癥狀明顯的到改善，造模后48 h、72 h與24 h對(duì)比，72 h與48 h對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;清熱益氣化瘀組在幾個(gè)觀察時(shí)點(diǎn)的損傷指數(shù)評(píng)分下降速度快，肌肉組織受損癥狀顯著改善，造模后48 h、72 h與24 h對(duì)比，72 h與48 h對(duì)比，均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

各個(gè)實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)行組間比較。造模后24 h，觀測(cè)各組損傷癥候時(shí)，空白組家兔評(píng)分為0分，其他3組均出現(xiàn)皮下組織淤血、肌肉腫脹、肌肉暗紅，其中造模組評(píng)分最高，清熱化瘀組次之，清熱化瘀組最低，但3組評(píng)分比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。造模72 h后，清熱化瘀組和清熱益氣化瘀組的癥狀改善均好于造模組，但是兩組之間的癥狀評(píng)分比較后，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。造模組在造模后的PGE2含量符合軟組織損傷的變化趨勢(shì)，在組織受損的72 h內(nèi)PGE2含量持續(xù)升高。造模后選擇的3個(gè)觀測(cè)時(shí)點(diǎn)的結(jié)果顯示，清熱化瘀浸漬藥液和清熱益氣化瘀浸漬藥液持續(xù)在改善實(shí)驗(yàn)家兔的受損組織，且清熱益氣化瘀組效果優(yōu)于清熱化瘀組，單兩者評(píng)分比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

表2 ? 不同觀察時(shí)間損傷癥候指數(shù)評(píng)分統(tǒng)計(jì)結(jié)果[（x±s），分]

注：與空白組對(duì)比，P<0.05;與模型組對(duì)比，P<0.05

2.2 ?PGE2含量測(cè)定

造模后24 h、72 h各組PGE2含量比較如表3。

3個(gè)造模實(shí)驗(yàn)小組內(nèi)部不同時(shí)點(diǎn)PGE2含量比較，造模組在造模72 h時(shí)，實(shí)驗(yàn)家兔PGE2含量少量上升，但是與24 h比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;清熱化瘀組實(shí)驗(yàn)家兔在造模后30 min涂抹清熱化瘀浸漬藥液，受損部位的PGE2含量迅速降低，72 h時(shí)與24 h比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;清熱益氣化瘀組造模后涂抹清熱益氣化瘀浸漬藥液，藥物持續(xù)降低受損部位受損部位的PGE2含量，72 h時(shí)與24 h比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

4組進(jìn)行組間比較。造模后24 h，測(cè)定PGE2含量時(shí)，空白組家兔較其余3組明顯低;經(jīng)過(guò)造模的3組家兔的PGE2含量相差不大，清熱益氣化瘀組最低，造模組最高，3組之間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），是由于清熱化瘀浸漬藥液和清熱益氣化瘀浸漬藥液清熱益氣化瘀浸漬藥液的藥效開(kāi)始起作用。造模72 h后，造模組的PGE2含量最高，清熱化瘀組PGE2含量比清熱化瘀組高，造模組與清熱益氣化瘀組和清熱化瘀組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。但清熱化瘀組與清熱化瘀組之間，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。造模組在造模后的PGE2含量符合軟組織損傷的變化趨勢(shì)，在組織受損的72 h內(nèi)PGE2含量持續(xù)升高。造模后24 h、72 h觀測(cè)的結(jié)果可見(jiàn)，清熱化瘀浸漬藥液和清熱益氣化瘀浸漬藥液持續(xù)在降低實(shí)驗(yàn)家兔受損部位的PGE2含量，且清熱益氣化瘀組的下降幅度更大。

表3 ? 造模后24 h、72 h各組家兔PGE2含量比較[（x±s），pg/mL]

注：與空白組對(duì)比，P<0.05;與模型組對(duì)比，P<0.05

3 ?討論

急性軟組織損傷多是因?yàn)槭艿酵獠勘┝ψ矒?、?qiáng)力壓迫等，臨床表現(xiàn)一般為局部皮膚青紫瘀斑、組織疼痛腫脹、肢體行動(dòng)不便等[7]，根據(jù)其病情不同，可將其分為筋斷、筋走、筋結(jié)、筋歪、筋弛、筋攣、筋翻、筋錯(cuò)位等不同類別。中醫(yī)將急性軟組織損傷歸為“傷筋”的范疇，認(rèn)為其病機(jī)為“氣滯與血瘀”，“若因傷折內(nèi)東經(jīng)絡(luò)，血行之道不得宣通。積淤不散，為腫為痛”[8]。PGE2是一種機(jī)體內(nèi)合成的中藥炎癥細(xì)胞因子，與緩激肽或其他炎癥介質(zhì)作用，可加劇體內(nèi)的炎癥反應(yīng)[3]。有研究表明，在炎癥急性期，損傷部位PGE2含量增加，導(dǎo)致毛細(xì)血管的通透性增加，白細(xì)胞趨化，造成組織水腫，抑制PGE2可加速修復(fù)受損組織[9]。因此，中醫(yī)治療急性軟組織損傷主要是活血散淤、消腫通絡(luò)、行氣止痛[10]。中藥外治是治療組織創(chuàng)傷的常用方法，是中醫(yī)治療“筋傷”的一大特色，藥物中的有效成分通過(guò)皮膚吸收直接作用于受傷區(qū)域，可保持受傷區(qū)域的藥物有效成分濃度，起到消炎鎮(zhèn)痛的功效[11-12]。

目前中醫(yī)外治急性軟組織損傷大多用淸熱化瘀浸漬藥液，該次實(shí)驗(yàn)選用的外治藥物還有清熱益氣化瘀浸漬藥液（兩種中藥浸漬液均為該院自制）。以上兩種中藥浸漬液成分大致相同，且均有清熱化瘀、通調(diào)經(jīng)絡(luò)、消腫止痛的功效，只是清熱化瘀浸漬藥液比清熱益氣化瘀浸漬藥液少了黃芪兩味中藥[6]，黃芪能具有行氣益氣的功效，在清熱化瘀的基礎(chǔ)上增強(qiáng)益氣行氣補(bǔ)氣的藥效。清熱益氣化瘀浸漬藥液以黃連為主藥，配以黃岑、黃柏為臣藥。黃連清熱燥濕，干瀉火解毒;黃芩燥濕泄熱，涼血止血，具清熱與止血雙重作用;黃進(jìn)柏清熱燥濕，退熱除疹;地榆涼血止血與黃連相配，加強(qiáng)清熱解干毒之力;紅花活血祛瘀，通調(diào)經(jīng)脈。諸藥配伍以黃連之君泄中焦之火;黃芩泄上焦之火，黃柏泄下焦之火為臣;梔子通泄3焦之火，冰片甘涼解毒，止痛消腫，配以黃芪益氣利水及大黃、紅花活血化瘀、地榆涼血收斂合為佐使;共湊清熱益氣化瘀，通調(diào)經(jīng)絡(luò)，消腫止痛。上述諸藥合用，共奏行氣清時(shí)熱活血、消瘀止痛之效，從而有效緩解急性軟組織損傷帶來(lái)的各種癥狀。該次研究中，家兔造模24 h后PGE2含量升高，經(jīng)過(guò)造模的各組含量相差不大，但給予中藥浸漬液的兩組在72 h后，PGE2含量分別為（76.99±4.85）pg/mL、（73.42±4.12）pg/mL，遠(yuǎn)低于造模組（98.79±2.78）pg/mL。羅宗鍵等人對(duì)大鼠進(jìn)行軟組織損傷造模使用丹歸消腫膏治療，分為高、中、低劑量組以及模型組并進(jìn)行觀測(cè)，發(fā)現(xiàn)PGE2含量受傷后逐漸上升，在24 h升高至高峰，24 h后逐漸降低，給予藥物的3組在72 h后PGE2含量分別為（4.06±0.21）pg/mL、（4.11±0.31）pg/mL、（4.01±0.32）pg/mL，低于模型組（4.38±0.25）pg/mL。家兔和大鼠在軟組織損傷后的PGE2含量在24 h內(nèi)均在上升，之后逐漸下降，但是中藥外治可快速降低PGE2含量，有利于動(dòng)物軟組織恢復(fù)。

通過(guò)該次動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，淸熱化瘀中藥浸漬液與益氣清熱化瘀浸漬藥液對(duì)急性軟組織受損的家兔均有治療作用，它們能抑制PGE2含量增高，減少軟組織受損部位炎癥，緩解損傷部位癥狀，且益氣清熱化瘀浸漬藥液的治療效果更為明顯。

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（收稿日期：2019-09-11）