張富宏 趙東利

甲狀腺癌發(fā)病率約為全身癌癥中的1%～5%，女性發(fā)病率約為男性的3倍[1]。Wnt配體屬于1個(gè)包含至少19種分泌型蛋白的家族，該蛋白家族在細(xì)胞的分化、增殖以及組織形成中都發(fā)揮重要作用，Wnt-5a是Wnt信號(hào)非經(jīng)典通路中最主要因子之一，該物質(zhì)能夠通過與細(xì)胞膜上受體的結(jié)核來活化蓬亂蛋白，進(jìn)而發(fā)揮細(xì)胞極性建立、骨架重排等增殖活動(dòng)。本文作者通過研究發(fā)現(xiàn)，Wnt-5a在甲狀腺癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)態(tài)，且Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率與甲狀腺癌患者的腫瘤大小、TNM分期及是否存在淋巴結(jié)浸潤(rùn)存在相關(guān)性，同時(shí)Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率能夠?qū)颊哳A(yù)后進(jìn)行一定判斷，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 資料

選取2013年1月至2016年1月于我院及西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院進(jìn)行治療的87例甲狀腺癌患者為實(shí)驗(yàn)組，取其癌組織及癌旁組織，另選取30例同期于我院進(jìn)行體格檢查的健康個(gè)體為對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組患者中男性31例，女性56例，年齡20～78歲，平均年齡(51.03±2.63)歲，87例患者中甲狀腺乳頭狀癌34例，濾泡癌21例，髓樣癌20例，未分化癌12例，對(duì)照組中男性12例，女性18例，年齡21～79歲，平均年齡(50.96±2.68)歲，兩組患者一般資料如性別、年齡等對(duì)比差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①實(shí)驗(yàn)組患者經(jīng)超聲檢測(cè)及病理學(xué)檢測(cè)確診為甲狀腺髓樣癌；②病歷資料齊全；③經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)實(shí)施該調(diào)研；④患者及其家屬對(duì)本次調(diào)研過程、方法、原理清楚并簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并精神障礙者；②既往甲狀腺手術(shù)史者；③合并化療治療者；④合并其他惡性腫瘤患者；⑤妊娠及哺乳期女性；⑥合并慢性疾病如心肌梗死、腦卒中、心力衰竭患者。

1.2 方法

取實(shí)驗(yàn)組患者癌組織及癌旁組織標(biāo)本，取對(duì)照組患者甲狀腺癌組織標(biāo)本，分別置于-80 ℃條件下保存，待標(biāo)本采集完畢后統(tǒng)一進(jìn)行處理，首先使用10%甲醛溶液固定，95%乙醇浸泡12 h，無(wú)水乙醇浸泡2 h，二甲苯透明處理1 h，而后石蠟包埋后切片，切片厚度約為4 μm，對(duì)切片進(jìn)行蘇木精-伊紅染色，免疫組化后于高倍鏡下分析結(jié)果，按照其顯色強(qiáng)度及陽(yáng)性細(xì)胞范圍進(jìn)行半定量評(píng)分；同時(shí)對(duì)所有患者進(jìn)行為期2年的隨訪，記錄其生存時(shí)間并與其Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率相關(guān)性進(jìn)行分析。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

分別對(duì)3組樣本進(jìn)行組織切片、染色及觀察，按照如下標(biāo)準(zhǔn)對(duì)其組織陽(yáng)性率進(jìn)行評(píng)判：①顯色深淺，不顯色或顯色極淺為0分，淺黃色為1分，黃色為2分，棕黃色為3分，棕褐色為4分；②陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞為0分，陽(yáng)性細(xì)胞占視野1%～25%為1分，25%～50%為2分，50%～75%為3分，75%以上為4分，上述兩項(xiàng)之和得分大于3分者為陽(yáng)性，陽(yáng)性率=(陽(yáng)性數(shù)/總例數(shù))×100%[2]；然后就實(shí)驗(yàn)組患者不同臨床特征與其組織Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率相關(guān)性進(jìn)行分析對(duì)比。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 不同組織中Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率比較

經(jīng)評(píng)估對(duì)比，發(fā)現(xiàn)Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率癌組織>癌旁組織>對(duì)照組，組間對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，具體數(shù)據(jù)見表1。

注：與正常組織相比，*為P<0.05，與癌旁組織相比，#為P<0.05。

2.2 Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性與甲狀腺癌患者臨床病理相關(guān)性分析

經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性與甲狀腺癌患者性別、年齡無(wú)相關(guān)性(P>0.05)，與甲狀腺癌患者腫瘤大小、TNM分期及是否存在淋巴結(jié)浸潤(rùn)存在相關(guān)性(P<0.05)，見表2。

2.3 Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性與甲狀腺癌患者預(yù)后相關(guān)性分析

經(jīng)術(shù)后隨訪，發(fā)現(xiàn)Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性患者2年隨訪死亡率為27.63%(21/76)，Wnt-5a表達(dá)陰性患者2年隨訪死亡率為9.09%(1/11)，兩組對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

甲狀腺癌是現(xiàn)階段頭頸部常見惡性腫瘤之一，該癥約占頭頸部惡性腫瘤的5%左右，在中青年及老年人群中均呈高發(fā)態(tài)勢(shì)，但女性發(fā)病率高于男性，老年人發(fā)病率高于中青年，該病的主要臨床分類包括乳頭狀癌、濾泡狀癌、未分化癌及髓樣癌幾種，其中乳頭狀癌最為常見，約占總發(fā)病人數(shù)的70%。甲狀腺癌的主要臨床癥狀包括甲狀腺腫塊、淋巴結(jié)腫大，晚期腫瘤組織可壓迫交感神經(jīng)節(jié)引發(fā)Horner綜合征和肩部疼痛，若癌細(xì)胞出現(xiàn)轉(zhuǎn)移可侵犯肺、骨等組織，引發(fā)全身癥狀，威脅患者生命。對(duì)甲狀腺癌預(yù)后的判斷能夠?yàn)槠渑R床治療方案的確定打下基礎(chǔ)，也能夠最大程度的節(jié)約醫(yī)療資源，傳統(tǒng)對(duì)甲狀腺癌預(yù)后的判斷多依賴于病理切片檢查及醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)，準(zhǔn)確性較低，隨著近些年分子生物學(xué)的發(fā)展，各類信號(hào)傳導(dǎo)通路在癌癥轉(zhuǎn)移、發(fā)展中的作用逐漸被發(fā)掘出來。

Wnt蛋白是1組富含半胱氨酸的糖蛋白，Wnt途徑是一類對(duì)胚胎發(fā)育起到重要調(diào)控作用的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，通過不同信號(hào)分子間的作用，Wnt蛋白能夠激活細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移、分化、發(fā)育等方面的復(fù)雜信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，Wnt-5a屬于屬于Wnt蛋白中的1種，可調(diào)控正常的血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞的增殖與遷移。臨床研究指出，Wnt-5a蛋白在正常組織中呈弱陽(yáng)性或陰性表達(dá)，而在腺瘤組織或高分化腺癌中呈現(xiàn)中度甚至強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)[3]。Wnt-5a蛋白的異常激活可導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生，學(xué)者石鵬[4]通過將80例前列腺癌組織與80例良性前列腺增生組織進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)，Wnt-5a mRNA在前列腺癌組織中的表達(dá)相對(duì)含量為(2.08±0.22)，在良性前列腺增生中的表達(dá)相對(duì)含量為(0.28±0.02)，二者對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，同時(shí)該作者的分析還指出，Wnt-5a的表達(dá)與前列腺癌患者的血管浸潤(rùn)、淋巴轉(zhuǎn)移等相關(guān)；學(xué)者劉彥[5]也通過將47例甲狀腺癌乳頭狀癌與47例癌旁組織相對(duì)比發(fā)現(xiàn)，乳頭狀癌組織Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率為68.09%，而癌旁組織Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率僅為6.38%，同時(shí)該學(xué)者的分析還發(fā)現(xiàn)Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率與甲狀腺癌患者的TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。

本文作者通過設(shè)立實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的方式，就甲狀腺癌組織中Wnt-5a的表達(dá)對(duì)其預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值進(jìn)行了分析探究，結(jié)果顯示，一方面甲狀腺癌組織中Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于癌旁組織及正常甲狀腺組織(P<0.05)，另一方面Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率與甲狀腺癌患者的年齡、性別無(wú)相關(guān)性(P>0.05)，但與其腫瘤大小、TNM分期及是否存在淋巴結(jié)浸潤(rùn)存在相關(guān)性(P<0.05)，最后研究還指出，Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率與其預(yù)后具有一定相關(guān)性，Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率越高，患者術(shù)后生存率越低。本文作者分析認(rèn)為，Wnt家族蛋白在動(dòng)物胚胎生長(zhǎng)發(fā)育中具有較重要的生物學(xué)意義，在細(xì)胞的增殖、遷移、代謝中發(fā)揮重要作用，Wnt-5a屬于Wnt信號(hào)非經(jīng)典通路中最主要因子之一，該蛋白能夠通過與細(xì)胞膜上受體的結(jié)合，來活化Dsh下游區(qū)，進(jìn)而激活端粒酶來促進(jìn)細(xì)胞極性的建立及細(xì)胞骨架的重排[6]。多項(xiàng)研究均指出，Wnt-5a的過量表達(dá)會(huì)直接造成細(xì)胞的惡性增殖，誘發(fā)腫瘤的出現(xiàn)，如在非小細(xì)胞癌組織中，Wnt-5a基因在腫瘤內(nèi)的表達(dá)明顯上調(diào)，尤其是鱗狀細(xì)胞癌表達(dá)顯著高于腺癌[7]，本文的研究結(jié)果也指出在甲狀腺癌組織中Wnt-5a表達(dá)也明顯上調(diào)，高于正常組織，分析其原因?yàn)閃nt-5a能夠活化細(xì)胞增殖通路，同時(shí)激活鈣調(diào)節(jié)蛋白激酶，使細(xì)胞核發(fā)生一系列反應(yīng)，進(jìn)而出現(xiàn)增殖、遷移、極化等癌變現(xiàn)象，同時(shí)其表達(dá)強(qiáng)度也能夠反映出機(jī)體預(yù)后狀態(tài)的好壞。

總而言之，Wnt-5a在甲狀腺癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)態(tài)，且Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率與甲狀腺癌患者的腫瘤大小、TNM分期及是否存在淋巴結(jié)浸潤(rùn)存在相關(guān)性，同時(shí)Wnt-5a表達(dá)陽(yáng)性率能夠?qū)颊哳A(yù)后進(jìn)行一定判斷。