吳玙彤，張楊子，王 璇，梁鈺笛，吳 仙，文正常，潘淑惠

芽孢桿菌、雙歧桿菌、腸球菌、乳酸菌、乳酸菌和酵母菌等微生物被用作益生菌被廣泛應(yīng)用，而芽孢桿菌、腸球菌和酵母菌是家畜中最常用的微生物。在蛋雞中添加益生菌可以提高蛋雞生產(chǎn)性能，包括飼料效率、產(chǎn)蛋量和蛋品質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)消化率、腸道菌群調(diào)控、免疫調(diào)節(jié)和抑制病原體生長（Panda等，2003）。此外，益生菌在家禽脂質(zhì)代謝調(diào)控方面發(fā)揮重要作用，研究表明，益生菌可以降低蛋黃中膽固醇含量（Xu等，2006）。益生菌的應(yīng)用效果可能取決于微生物種類組成、活性、添加劑量、使用方法和時(shí)間、日糧原料組成、日齡和環(huán)境應(yīng)激因素等方面。另一方面，益生菌菌株最關(guān)鍵的特性是抗酸和抗膽鹽，能到達(dá)腸道，并在那里表達(dá)其促進(jìn)健康。但體內(nèi)研究表明，大多數(shù)益生菌菌株只能在人腸道內(nèi)暫時(shí)定居（Tannock，1999）。Mathys等（2007）研究發(fā)現(xiàn)，酸性乳酸片球菌在體外酸性和膽鹽條件下顯示出強(qiáng)大的生存力。因此本研究旨在評估乳酸片球菌對22～46 w蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和養(yǎng)分消化率的影響，同時(shí)研究其對30、38和46 w雞蛋蛋黃膽固醇含量的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)分組與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)將22周齡的222只海蘭褐殼蛋雞隨機(jī)分為3組。對照組飼喂基礎(chǔ)飼料，不添加益生菌，處理1組在前12周飼喂基礎(chǔ)日糧+100 mg/kg乳酸片球菌，后12周飼喂基礎(chǔ)日糧+50 mg/kg乳酸片球菌，處理2組蛋雞全程飼喂基礎(chǔ)日糧+100 mg/kg乳酸片球菌。蛋雞采用單雞蛋籠飼養(yǎng)，室內(nèi)溫度維持在20～22℃，光照周期由18周的光照12 h每周升高1 h，直至光照達(dá)到每天16 h。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧原料組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 生產(chǎn)性能和養(yǎng)分消化率 分別在26、30、34、38、42和46周齡以籠為基礎(chǔ)記錄采食量。每只蛋雞每天的飼料消耗量是根據(jù)整個(gè)試驗(yàn)期總飼料消耗量和試驗(yàn)天數(shù)計(jì)算的，每天收集產(chǎn)蛋個(gè)數(shù)、破蛋個(gè)數(shù)，同時(shí)稱量蛋重。產(chǎn)蛋24周后，每組隨機(jī)選擇10只蛋雞用于代謝試驗(yàn)。將二氧化鈦?zhàn)鳛橹甘緞占Z水平為5 g/kg，連續(xù)收集5 d糞便。分析飼料和糞便中的干物質(zhì)、粗脂肪、能量、鈣和磷，計(jì)算表觀消化率和沉積率。

1.3 蛋品質(zhì) 從試驗(yàn)第23周開始每隔4周收集一次雞蛋，每個(gè)重復(fù)選擇4枚用于研究雞蛋比重、蛋殼厚度、蛋殼比例、哈夫單位、蛋白占比、蛋黃顏色、蛋形指數(shù)、蛋黃占比。同時(shí)測定30、38和46 w雞蛋蛋黃膽固醇含量（試劑盒測定）。參考Kalavathy（2009）方法分析蛋黃脂肪酸組成及含量。

1.4 數(shù)據(jù)分析 采用SPSS 19.0版單因素方差分析（One-way ANOVA）處理數(shù)據(jù)，采用 Tukey’s法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05作為差異顯著的標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 生產(chǎn)性能 由表2可知，各組采食量無顯著差異（P＞0.05），同時(shí)對產(chǎn)蛋率的影響較小（92.1%～ 94.1%）。 在 35～ 46周 時(shí)，隨 著乳酸片球菌添加量的增加，產(chǎn)蛋率線性升高（P＜0.05）。日糧添加乳酸片球菌顯著提高平均蛋重、總蛋重和飼料效率（P＜0.05），而破蛋率顯著降低（P＜0.05）。處理2組較對照組顯著改善了蛋雞料重比（P＜0.05），但與處理1組無顯著差異（P ＞ 0.05）。

表2 乳酸片球菌對22～46周蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 蛋品質(zhì) 由表3可知，各組間蛋白相對重量、哈夫單位、蛋黃相對重量、蛋黃指數(shù)均無明顯差異（P＞0.05）。在第一個(gè)飼養(yǎng)階段（23～34周），日糧添加益生菌顯著增加了雞蛋比重、蛋殼厚度、蛋殼相對重量、改善了蛋黃顏色評分（P＜0.05）。試驗(yàn)第二階段（35～46周），與對照組和處理1組相比，處理2組蛋黃比重、蛋殼厚度、蛋殼相對重量顯著提高（P＜0.05）。無論日糧乳酸片球菌添加水平如何，兩種處理均能顯著提高蛋黃顏色評分（P＜0.05）。

表3 乳酸片球菌對23～46周蛋品質(zhì)的影響

2.3 養(yǎng)分消化率及蛋黃膽固醇含量 由表4可知，各組日糧對干物質(zhì)消化率、能量代謝率和磷的沉積率無顯著影響（P＞0.05）。與對照組相比，處理組鈣沉積率提高8%（P=0.06）。此外，隨著益生菌含量的增加，粗脂肪消化率顯著線性增加（P＜0.05）。各處理對30和38 w蛋黃膽固醇含量無顯著影響（P＞0.05）。但在46 w時(shí)，處理組較對照組顯著降低了蛋黃膽固醇含量，達(dá)到10%（P＜0.05）。此外，在46 w時(shí)，蛋黃膽固醇濃度隨益生菌添加水平的升高顯著線性下降（P＜ 0.05）。

表4 乳酸片球菌對23～46周養(yǎng)分消化率及蛋黃膽固醇含量的影響

2.4 蛋黃脂肪酸含量 由表5可知，蛋黃的主要脂肪酸為油酸（C18：1）、棕櫚酸（C16：0）、亞油酸（18：2n-6）和硬脂酸（C18：0）。100 mg/kg乳酸片球菌組棕櫚烯酸（C16：1）水平較低，而亞油酸（C18：2n-6）和亞麻酸（C18：3n-3）等多不飽和脂肪酸水平較高（P＜0.05）。隨著乳酸片球菌添加水平的增加，亞油酸和PUFA n-6多不飽和脂肪酸在蛋黃中的比例顯著線性升高（P＜0.05）。盡管益生菌組蛋黃中亞油酸、亞麻酸和多不飽和脂肪酸比例有所提高，但對n-6/n-3無顯著影響（P＞0.05）。

3 討論

日糧添加乳酸片球菌顯著提高了平均蛋重、總蛋重和飼料效率，但對產(chǎn)蛋率無顯著影響，這與Kalavathy等（2009）研究結(jié)果一致。本研究觀察到日糧添加乳酸片球菌提高了飼料效率，主要體現(xiàn)在蛋重增加，包括蛋殼比例增加，同時(shí)，蛋殼比例的增加伴隨著蛋殼厚度顯著增加（處理2組提高8%），進(jìn)而導(dǎo)致破蛋率顯著降低。Davis和Anderson（2002）發(fā)現(xiàn)，混合乳酸菌培養(yǎng)液改善了蛋重和蛋殼質(zhì)量。

在本研究發(fā)現(xiàn)，飼喂乳酸片球菌蛋雞鈣沉積率有升高趨勢，同時(shí)處理2組蛋殼質(zhì)量也得到改善。益生菌改善了蛋雞腸道的消化和吸收功能。益生菌對蛋黃重量和蛋殼質(zhì)量的改善可能與腸道環(huán)境良好有關(guān)，這有助于吸收更多的營養(yǎng)物質(zhì)（Panda等，2008）。此外，乳酸片球菌在消化道中創(chuàng)造的酸性環(huán)境有助于礦物質(zhì)的電離和吸收。近年來，益生菌在調(diào)控脂質(zhì)代謝方面的潛力受到廣泛關(guān)注。因?yàn)?，益生菌可以降低蛋黃中的膽固醇含量（Kalavathy等，2009）。但膽固醇降低作用的機(jī)制和數(shù)據(jù)仍存在爭議。益生菌可能通過膽汁酸發(fā)揮其降膽固醇作用，因?yàn)槟懰岷兔撗跄懰嵊筛渭?xì)胞從膽固醇中產(chǎn)生，分別與甘氨酸和?；撬峤Y(jié)合，這些物質(zhì)進(jìn)入小腸被吸收并導(dǎo)向肝臟，膽汁酸循環(huán)的減少最終會導(dǎo)致血清膽固醇濃度降低（St-Onge等，2000）。

表5 乳酸片球菌對蛋黃脂肪酸含量的影響%

與許多關(guān)于蛋黃膽固醇試驗(yàn)相比，益生菌對蛋黃脂肪酸組成影響的研究還比較少。本研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加乳酸片球菌可顯著提高多不飽和脂肪酸比例，包括亞油酸和亞麻酸。蛋雞的脂蛋白代謝可能與未成熟的母雞或公雞有很大差異，這可能在一定程度上解釋了益生菌在降低蛋雞膽固醇和脂質(zhì)含量方面與肉雞的差異。如Yalcin等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，釀酒酵母顯著增加了蛋雞飽和脂肪酸及飽和脂肪酸與不飽和脂肪酸的比值，降低了單不飽和脂肪酸比。另一方面，Kalavathy等（2009）發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加乳酸菌培養(yǎng)物的蛋雞蛋黃脂肪酸組成幾乎無影響。

4 結(jié)論

綜上所述，飼糧中添加乳酸片球菌，在產(chǎn)蛋初期具有改善雞蛋重量、飼料效率、蛋黃顏色和蛋殼質(zhì)量的潛力，同時(shí)可以顯著降低雞蛋破損率。在產(chǎn)蛋后期日糧補(bǔ)充乳酸片球菌也會使蛋黃膽固醇水平有所下降。