賀衛(wèi)華，翟曉虎，汪春雪，姚大偉

現(xiàn)代家禽業(yè)越來(lái)越重視對(duì)環(huán)境的控制，飼養(yǎng)密度是最重要的環(huán)境因素之一。雖然前人對(duì)飼養(yǎng)密度的研究很多，但結(jié)果卻不盡相同。大多數(shù)研究只比較了2～3水平的飼養(yǎng)密度。Zhang等（2017）認(rèn)為，提高飼養(yǎng)密度會(huì)對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能產(chǎn)生有害影響，且隨著飼養(yǎng)密度的增加，體重、采食量和飼料轉(zhuǎn)化率下降。但在家禽實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程，盡管高飼養(yǎng)密度會(huì)導(dǎo)致肉雞生長(zhǎng)性能下降，但由于每平方米肉雞重量增加，最終利潤(rùn)也會(huì)增加。Martrenchar等（2000）指出，11只和 22只 /m2的飼養(yǎng)密度在體重上有輕微差異，在飼料轉(zhuǎn)化率和胴體性能上沒(méi)有顯著差異。同時(shí)，飼養(yǎng)密度高可能對(duì)肉雞健康有害，在亞臨床實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭校唢曫B(yǎng)密度可能損害肉雞福利和腸道健康，導(dǎo)致壞死性腸炎易感性增加（Tsiouris等，2015）。此外，飼養(yǎng)密度過(guò)高可能也會(huì)導(dǎo)致一些應(yīng)激。近年來(lái)，肉用雞生產(chǎn)趨于專(zhuān)業(yè)化，稻殼作為墊料飼養(yǎng)黃羽肉雞是一種常見(jiàn)飼養(yǎng)方法。因此，本試驗(yàn)旨在評(píng)價(jià)5種不同飼養(yǎng)密度對(duì)嶺南黃羽肉雞生長(zhǎng)性能、抗氧化能力、應(yīng)激和免疫狀況的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與處理 試驗(yàn)選擇1日齡嶺南黃羽肉雞1440只，隨機(jī)分為5組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)96只。雞只被飼養(yǎng)在15個(gè)混凝土地板房間，地面鋪有6 cm厚度的稻殼。5個(gè)處理的飼養(yǎng)密度分別為 8、10、12、14和 16只 /m2。在試驗(yàn)期間，肉雞自由采食和飲水，所有房間都在25℃環(huán)境控制下，相對(duì)濕度保持在（55±5）%并提供連續(xù)照明。各階段日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.2 樣品采集與處理 在50 d時(shí)，從每個(gè)處理中隨機(jī)選擇12只肉雞，屠宰前12 h禁食，立即翅下靜脈采血5 mL，置于凝血管中，3000/min，4℃離心10 min，分離血清。然后將雞只屠宰收集肝臟，所有樣品均直接冷凍于液氮中，并保存于-80℃進(jìn)行進(jìn)一步分析。

表1 各階段日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 指標(biāo)分析 第21和50天稱(chēng)量體重，每周統(tǒng)計(jì)飼料用量，以此來(lái)計(jì)算平均日增重、平均日采食量和飼料增重比。采用商品試劑盒測(cè)定肝臟和血清生化指標(biāo)。肝臟用生理鹽水制備10%勻漿，測(cè)定血清和肝臟超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、過(guò)氧化氫酶（CAT）活性及脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）的含量。

應(yīng)激參數(shù)測(cè)定試劑盒購(gòu)自南京建城生物工程研究生，檢測(cè)血清肌酸激酶（CK）活性、皮質(zhì)酮、熱休克蛋白70含量。同時(shí)用細(xì)胞因子試劑盒分析血清白細(xì)胞介素（IL）-4、10和-1β含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 本試驗(yàn)采用SPSS軟件單因素方差分析（one-way ANOVA），用曲線擬合（二次曲線回歸）對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用Ducan’s多量程檢驗(yàn)比較處理間的顯著性差異，P＜0.05為顯著性差異，所有結(jié)果均用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼養(yǎng)密度對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，飼養(yǎng)密度為8、10只/m2組肉雞的平均日采食量顯著高于飼養(yǎng)密度為12、14、16只/m2組（P＜0.05）。與此同時(shí)，不同飼養(yǎng)密度對(duì)肉雞的日增重和料重比影響無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.2 飼養(yǎng)密度對(duì)肉雞血清應(yīng)激狀態(tài)和血清、肝臟抗氧化指標(biāo)的影響 由表3可知，飼養(yǎng)密度為10只/m2組熱休克蛋白70水平顯著低于飼養(yǎng)密度為14只/m2組（P＜0.05），其中飼養(yǎng)密度為16只/m2組血清熱休克蛋白70水平最高（P＜0.05）。不同飼養(yǎng)密度組間肌酸激酶活性和皮質(zhì)酮濃度無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

在血清和肝臟中，總抗氧化力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）和過(guò)氧化物酶（CAT）水平在不同的飼養(yǎng)密度之間存在顯著差異，其中飼養(yǎng)密度為16只/m2組血清T-AOC和SOD活力最低（P＜0.05），而飼養(yǎng)密度為10和12只/m2組的CAT活力顯著高于飼養(yǎng)密度為14和16只/m2（P＜0.05）。在肝臟中，飼養(yǎng)密度為8只/m2組T-AOC活力顯著高于飼養(yǎng)密度為12、14、16只/m2組（P＜0.05），飼養(yǎng)密度10只/m2組CAT活力顯著高于飼養(yǎng)密度為14、16只/m2組（P＜0.05）。飼養(yǎng)密度為10只/m2組肝臟SOD活性最高（P＜ 0.05）。

表2 飼養(yǎng)密度（只/m2）對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

2.3 飼養(yǎng)密度對(duì)肉雞血清免疫指標(biāo)的影響 如表4所示，隨著飼養(yǎng)密度從8～10只/m2增加到16只/m2，白細(xì)胞介紹-4（IL-4）濃度顯著升高（P＜0.05），而IL-10濃度無(wú)顯著變化（P＞0.05）。與飼養(yǎng)密度為8、10和12只/m2組相比，飼養(yǎng)密度為16只/m2組IL-1β濃度顯著升高（P＜0.05）。

3 討論

3.1 生長(zhǎng)性能 本試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著飼養(yǎng)密度的增加，肉雞平均日采食量呈下降趨勢(shì)，相反，Yin等（2017）研究表明，整個(gè)試驗(yàn)期間，飼養(yǎng)密度對(duì)鵝平均日采食量無(wú)顯著影響，造成這種差異的原因可能是家禽種類(lèi)或飼養(yǎng)條件不同。此外，不同的飼養(yǎng)密度對(duì)肉雞平均日增重和料重比無(wú)顯著影響，這與Rambau等（2016）的研究結(jié)果一致，其認(rèn)為因?yàn)槿赵鲋卦?5～42 d無(wú)顯著變化，而本試驗(yàn)結(jié)果顯示，無(wú)論飼養(yǎng)密度的高低，日增重和料重比在短期內(nèi)都有相對(duì)穩(wěn)定的值。

3.2 應(yīng)激狀態(tài) Soleimani等（2012）認(rèn)為，生物體產(chǎn)生一組被稱(chēng)為熱休克的高度保守的蛋白質(zhì)，對(duì)熱應(yīng)激和非熱應(yīng)激做出反應(yīng)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼養(yǎng)密度為16只/m2組HSP70濃度最高。生理應(yīng)激（飼料限量、熱應(yīng)激和藥物注射）和心理應(yīng)激（個(gè)體隔離）均顯著誘導(dǎo)HSP70在血清中的表達(dá)。較高的飼養(yǎng)密度作為應(yīng)激源之一可能在HSP70的升高中發(fā)揮重要作用，提示機(jī)體處于高應(yīng)激水平。同時(shí)，HSP70似乎參與保護(hù)細(xì)胞因子、缺血、細(xì)胞因子和能量消耗相關(guān)的細(xì)胞損傷（Soleimani等，2012），這意味著高飼養(yǎng)密度導(dǎo)致的高HSP70水平在一定程度上可以保護(hù)肉雞免受這種應(yīng)激帶來(lái)的負(fù)面影響。

表3 飼養(yǎng)密度（只/m2）對(duì)肉雞血清應(yīng)激狀態(tài)和血清、肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

表4 飼養(yǎng)密度（只/m2）對(duì)肉雞血清免疫指標(biāo)的影響

3.3 抗氧化和免疫狀態(tài) 高飼養(yǎng)密度引起的應(yīng)激也影響肉雞抗氧化能力，但對(duì)上述機(jī)理的研究很少。當(dāng)飼養(yǎng)密度達(dá)到一定水平時(shí)，過(guò)度擁擠可能會(huì)導(dǎo)致T-AOC、SOD和CAT水平變化，如飼養(yǎng)密度為12只/m2以下肉雞肝臟中的T-AOC濃度降低。盡管如此，低放養(yǎng)密度為8或10只/m2并不是總能誘導(dǎo)最高的酶活性，正如本文SOD的結(jié)果所示?？偟膩?lái)說(shuō)，這3個(gè)參數(shù)在8和10只/m2的飼養(yǎng)密度之間沒(méi)有顯著差異。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化的主要產(chǎn)物，用于測(cè)定氧化損傷。本研究中，血清和肝臟中MDA含量和GSH- Px活性與飼養(yǎng)密度無(wú)顯著相關(guān)性，說(shuō)明飼養(yǎng)環(huán)境過(guò)度擁擠并不影響血清中MDA含量和GSH-Px活性。Jang等（2014）在肝臟中發(fā)現(xiàn)，高飼養(yǎng)密度組SOD、CAT和GSH-Px mRNA表達(dá)顯著增加，結(jié)果顯示，肝臟健康與抗氧化狀態(tài)之間的關(guān)系，這與本研究結(jié)果一致。

眾所周知，免疫細(xì)胞會(huì)受到應(yīng)激的影響，應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞因子的持續(xù)產(chǎn)生。IL-1促進(jìn)炎癥的發(fā)生，IL-4和IL-10抑制炎癥的發(fā)生。Appels等（2000）研究表明，IL-1在身體處于應(yīng)激下時(shí)持續(xù)分泌。本研究中血清IL-1為主要成分，IL-1β和IL-4隨著飼養(yǎng)密度的增加而增加。與本研究結(jié)果相反，一些研究人員發(fā)現(xiàn)，應(yīng)激不一定會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞因子水平升高。Jang等（2014）發(fā)現(xiàn)，脾臟促炎細(xì)胞因子的表達(dá)不受飼養(yǎng)密度的影響。但分泌細(xì)胞因子是一個(gè)持續(xù)的過(guò)程，在多個(gè)組織中發(fā)生，因此血清IL-1β和IL-4濃度隨飼養(yǎng)密度的增加而增加。高密度飼養(yǎng)使肉雞處于亞健康狀態(tài)，并改變其免疫和抗氧化水平。但這并不一定導(dǎo)致器官指數(shù)的顯著變化。在火雞上的研究表明，飼養(yǎng)密度為18只/m2組異嗜細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值和緊張性靜止持續(xù)時(shí)間高于12只/m2（Uzum和Toplu，2013）。

4 結(jié)論

綜上所述，本研究結(jié)果表明，在有稻殼粉作為墊料的地板上飼養(yǎng)肉雞的密度應(yīng)保持在8～10只/m2，以防止飼養(yǎng)密度過(guò)高帶來(lái)的負(fù)面影響。