劉丹丹 許爾屹 趙偉華

惡性腫瘤疾病對(duì)人類(lèi)健康有高度威脅，其患者存活時(shí)間較短，經(jīng)常發(fā)生死亡事件。伴隨臨床醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，惡性腫瘤疾病的治療手段逐漸增多，其中大部分患者均會(huì)接受化療治療方案，通過(guò)治療來(lái)延緩生存時(shí)間并改善預(yù)后狀況。化療藥物耐藥是惡性腫瘤疾病治療過(guò)程中的主要難點(diǎn)之一，發(fā)生藥物耐藥后容易促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，進(jìn)而危及其生命安全[1]。目前，部分國(guó)外研究提出外泌體在腫瘤耐藥中發(fā)揮著重要作用，對(duì)外泌體實(shí)施處理或有助于改善耐藥問(wèn)題，但國(guó)內(nèi)臨床尚缺乏此方面的試驗(yàn)分析。文章通過(guò)整合國(guó)內(nèi)外相關(guān)報(bào)道，對(duì)其研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜合分析，旨在進(jìn)一步認(rèn)識(shí)其影響作用。

1 外泌體概述

外泌體主要是指人體多類(lèi)型細(xì)胞所分泌的囊泡，其直徑多趨于40～130 nm，內(nèi)含胞質(zhì)生物活性物質(zhì)豐富，主要包括蛋白質(zhì)、DNA、mRNA等，而表面多為脂質(zhì)物質(zhì)。上世界80年代，國(guó)外研究學(xué)者首次發(fā)現(xiàn)該物質(zhì)，并將其歸為外排轉(zhuǎn)鐵蛋白受體范圍，通過(guò)不斷研究在首次發(fā)現(xiàn)4年后將其命名為外泌體。在研究初期，人們普遍認(rèn)為該物質(zhì)為清除胞內(nèi)廢物，但持續(xù)研究表現(xiàn)出其轉(zhuǎn)運(yùn)功能在人體生物學(xué)方面可起到重要作用。在釋放外泌體的細(xì)胞中，腫瘤及腫瘤基質(zhì)細(xì)胞也較為常見(jiàn)，其釋放的外泌體可直接控制疾病的發(fā)生與進(jìn)展，通過(guò)檢測(cè)外泌體能夠輔助惡性腫瘤的診斷及預(yù)后評(píng)估[2]。李棟等[3]研究分析了 TWEAK 刺激后巨噬細(xì)胞外泌體中miRNA-7的表達(dá)水平，試驗(yàn)結(jié)果表示miRNA-7 在 TWEAK 刺激巨噬細(xì)胞分泌的外泌體中發(fā)揮重要作用，可通過(guò)抑制上皮性卵巢癌細(xì)胞中EGFR信號(hào)通路抑制其侵襲和遷移。顏曉慧等[4]報(bào)道分別收集26例健康成人、29例肺結(jié)核患者與94例肺癌患者為試驗(yàn)對(duì)象，提取其血清外泌體miRNA并開(kāi)展臨床檢驗(yàn)，研究結(jié)果顯示出血清外泌體miR-21有助于肺癌的臨床檢出，并提出將其作為診斷標(biāo)志物可積極改善肺癌的診斷效果。吳凡等[5]報(bào)道評(píng)價(jià)了三陰乳腺癌細(xì)胞受脂肪干細(xì)胞來(lái)源外泌體的影響情況，試驗(yàn)分析表現(xiàn)脂肪干細(xì)胞來(lái)源外泌體能夠?qū)θ幦橄侔┘?xì)胞遷移形成明顯促進(jìn)作用，但并未影響其細(xì)胞增殖，并且在阿霉素耐藥方面無(wú)顯著作用。近年來(lái)，部分國(guó)外研究表示腫瘤及腫瘤基質(zhì)細(xì)胞所釋放外泌體與腫瘤化療藥物耐藥有一定程度相關(guān)性，并認(rèn)為開(kāi)展此項(xiàng)研究有助于改善腫瘤耐藥問(wèn)題，但國(guó)內(nèi)研究在此方面仍較為鮮見(jiàn)。許乘鳳等[6]研究中分析了外泌體在乳腺癌細(xì)胞間耐藥信息的傳遞作用，分別選擇了MCF-7/ADR與MCF-7細(xì)胞株，觀察阿奇霉素藥物在腫瘤細(xì)胞中的濃度變化，并記錄培養(yǎng)后P-gp與MDR1基因等表達(dá)情況，研究結(jié)果表現(xiàn)外泌體對(duì)乳腺癌細(xì)胞有確切的耐藥信息傳遞作用，可促使敏感細(xì)胞獲得耐藥性，并不斷傳遞P-gp，主要通過(guò)mRNA與蛋白形式完成傳遞。

2 腫瘤細(xì)胞釋放外泌體對(duì)腫瘤耐藥的影響

2.1 腫瘤細(xì)胞釋放外泌體對(duì)腫瘤耐藥的參與作用

腫瘤細(xì)胞自身所釋放外泌體可將miRNAs轉(zhuǎn)運(yùn)至受體敏感細(xì)胞中，因其轉(zhuǎn)運(yùn)可對(duì)腫瘤耐藥形成誘導(dǎo)作用或增強(qiáng)作用，并且在此過(guò)程中外泌體也對(duì)miRNAs形成了保護(hù)性作用。有報(bào)道表示肺腺癌耐藥細(xì)胞中的外泌體表達(dá)增強(qiáng)，而其中miR-21、miR-33水平明顯上升，將此外泌體作用于藥物敏感細(xì)胞后會(huì)明顯誘導(dǎo)細(xì)胞耐藥[7]。

2.2 TD-exosomes運(yùn)轉(zhuǎn)對(duì)腫瘤耐藥的參與作用

TD-exosomes對(duì)多藥耐藥蛋白質(zhì)進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)后，使敏感腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)耐藥表現(xiàn)，影響藥物外排進(jìn)而不斷抑制藥物作用，在依靠外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)便會(huì)直接形成降敏效果，形成腫瘤耐藥誘導(dǎo)或增強(qiáng)作用[8]。通常情況下，惡性腫瘤進(jìn)展時(shí)可形成不同的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，將介導(dǎo)藥物自胞內(nèi)排向胞外，該種轉(zhuǎn)運(yùn)體主要為胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，處于細(xì)胞內(nèi)體、多囊泡小體界膜中。當(dāng)前研究已證實(shí)該轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)對(duì)常用化療藥物作用均有影響作用，在乳腺癌細(xì)胞、前列腺細(xì)胞等試驗(yàn)中均有證實(shí)。另外，TD-exosomes對(duì)腫瘤細(xì)胞同抗癌靶向藥物的結(jié)合作用也有影響，此類(lèi)影響也會(huì)形成腫瘤耐藥情況[9]。例如，在血液系統(tǒng)腫瘤中經(jīng)常應(yīng)用的化療藥物利妥昔單抗，主要通過(guò)細(xì)胞表面CD20通氣藥物Fc段相結(jié)合來(lái)形成毒性細(xì)胞清除作用，但惡性腫瘤釋放外泌體中存在較多CD20，在用藥過(guò)程中不斷形成競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合作用，進(jìn)而減輕藥物作用效果[10]。

3 腫瘤基質(zhì)細(xì)胞中外泌體對(duì)腫瘤耐藥的影響

3.1 腫瘤及腫瘤基質(zhì)細(xì)胞相互作用對(duì)腫瘤耐藥的影響

現(xiàn)階段臨床已證實(shí)評(píng)估患者預(yù)后狀況過(guò)程中腫瘤微環(huán)境是必不可少的影響因素之一，其含有細(xì)胞種類(lèi)較多，包括上皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、纖維細(xì)胞等等。研究報(bào)道證實(shí)食管癌細(xì)胞耐藥可受到其miR27纖維細(xì)胞的影響，非小細(xì)胞肺癌患者在其EGFR突變影響下導(dǎo)致吉非替尼藥物耐藥狀況不同，而吉非替尼耐藥者的CAF平足蛋白表達(dá)顯著較高[11]。

3.2 腫瘤基質(zhì)細(xì)胞釋放外泌體對(duì)腫瘤耐藥的影響

腫瘤基質(zhì)細(xì)胞所釋放外泌體也會(huì)誘導(dǎo)或增加腫瘤耐藥，現(xiàn)階段國(guó)外研究已發(fā)現(xiàn)了多種基質(zhì)細(xì)胞釋放外泌體對(duì)腫瘤耐藥形成的影響作用。人間充質(zhì)干細(xì)胞釋放外泌體對(duì)多種通路產(chǎn)生活化作用，從而影響到5-氟尿嘧啶用藥，誘導(dǎo)胃癌腫瘤細(xì)胞耐藥而降低藥用效果。成神經(jīng)細(xì)胞瘤可收到單核細(xì)胞來(lái)源外泌體的影響，導(dǎo)致順鉑藥物耐藥性形成或增加。有研究認(rèn)為，腫瘤基質(zhì)細(xì)胞釋放外泌體不僅對(duì)其腫瘤耐藥形成影響，通過(guò)抑制其活性可積極避免耐藥問(wèn)題，增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)藥物的敏感性，而改善患者預(yù)后效果[12]。

4 外泌體與逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的研究分析

化療藥物耐藥一直是惡性腫瘤疾病治療的難點(diǎn)之一，發(fā)生藥物耐藥后容易促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，進(jìn)而危及其生命安全。近年研究提出外泌體在腫瘤耐藥中發(fā)揮著重要作用，對(duì)外泌體實(shí)施處理或有助于改善耐藥問(wèn)題?，F(xiàn)階段研究中外泌體對(duì)惡性腫瘤耐藥的影響分子較多，而此類(lèi)報(bào)道均認(rèn)為通過(guò)對(duì)外泌體進(jìn)行抑制處置可逆轉(zhuǎn)其耐藥問(wèn)題。有研究對(duì)乳腺癌細(xì)胞應(yīng)用貝沙羅汀與沒(méi)藥甾酮進(jìn)行處理，明顯抑制了乳腺癌耐藥蛋白表達(dá)，從而影響其耐藥轉(zhuǎn)運(yùn)，阻滯外泌體釋放，進(jìn)而提升藥物作用。間充質(zhì)干細(xì)胞釋放外泌體實(shí)施轉(zhuǎn)染法處理以提高其anti-miR9表達(dá)，經(jīng)處理后提高多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞中miR9水平，從而影響到替莫唑胺對(duì)腫瘤的耐藥性。

5 結(jié)論

惡性腫瘤疾病對(duì)人類(lèi)健康有高度威脅，其患者存活時(shí)間較短，經(jīng)常發(fā)生死亡事件。伴隨臨床醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，惡性腫瘤疾病的治療方法逐漸增多，其中大部分患者均會(huì)接受化療治療方案，通過(guò)治療來(lái)延緩生存時(shí)間并改善預(yù)后狀況。化療藥物耐藥是惡性腫瘤疾病治療過(guò)程中的主要難點(diǎn)之一，發(fā)生藥物耐藥后容易促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，進(jìn)而危及其生命安全。獲得性耐藥一直是惡性腫瘤中的重點(diǎn)研究課題，其發(fā)生機(jī)制極為復(fù)雜，腫瘤及腫瘤基質(zhì)細(xì)胞來(lái)源外泌體對(duì)其有重要影響作用，不僅能夠?qū)δ退幏肿有纬蛇\(yùn)轉(zhuǎn)傳遞，也直接參與到腫瘤耐藥中，通過(guò)對(duì)此類(lèi)外泌體形成抑制作用，必然能夠逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥問(wèn)題，更有效的發(fā)揮靶向治療效果?，F(xiàn)階段，國(guó)內(nèi)臨床尚較缺乏此類(lèi)試驗(yàn)研究，腫瘤醫(yī)師在日后工作中還需加強(qiáng)對(duì)其研究深度，為克服腫瘤耐藥形成有利支持。