□ 杜小利 高學(xué)智 陜西省榆林市榆陽(yáng)區(qū)食品檢驗(yàn)檢測(cè)中心

國(guó)際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)（IUPAC）規(guī)定“檢出限是以濃度表示，指由特定的分析方法能夠合理地檢測(cè)出最小分析信號(hào)XL求得的最低濃度CL或最低質(zhì)量qL”。[1]檢出限分為儀器檢出限、方法檢出限、樣品檢出限，其中，方法檢出限是樣品根據(jù)某方法步驟制備后，儀器可檢測(cè)出的最小濃度或是含量，其結(jié)果與樣品性質(zhì)、預(yù)處理、濃縮倍數(shù)、測(cè)定條件、儀器都有關(guān)系[2]。

1 實(shí)驗(yàn)前處理

根據(jù)NY/T 761-2008對(duì)樣品進(jìn)行萃取和凈化。試樣稱取25.00 g，過(guò)程參照標(biāo)準(zhǔn)，最后用丙酮定容至5 mL，上樣。

2 方法檢出限評(píng)估

2.1 3倍于空白值標(biāo)準(zhǔn)偏差

根據(jù)3倍于空白值標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算公式計(jì)算檢出限，公式如下。

公式中，在99.6%的置信區(qū)間下，K取3；cL最低檢出濃度；實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下，具體結(jié)果見(jiàn)表1。

（1）以20個(gè)丙酮溶劑為空白樣品，依據(jù)NY/T 761-2008，對(duì)該空白樣品進(jìn)行前處理，求20個(gè)空白樣品信號(hào)平均值。

（2）向空白樣品添加敵敵畏農(nóng)殘標(biāo)液，添加濃度為0、0.05、0.2 ㎎/㎏，經(jīng)預(yù)處理后，上機(jī)測(cè)定，儀器響應(yīng)信號(hào)分別為2 196.75、14 039、53 640 μV，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果計(jì)算曲線斜率，從而得到靈敏度S。

2.2 信噪比法測(cè)定

信噪比法是通過(guò)已知低濃度的被測(cè)物的檢測(cè)信號(hào)與基線噪音比較，比值為2或3時(shí)，所對(duì)應(yīng)的檢測(cè)濃度為檢出限[3]。噪音值大小直接關(guān)系到檢測(cè)限大小，本文噪音值是取自樣品信號(hào)值附近最大的噪聲信號(hào)。

實(shí)驗(yàn)安排如下：參照NY/T 761-2008處理蘋果樣品兩份，并加標(biāo)，加標(biāo)量為0.05㎎/㎏（一般為校正曲線最低濃度點(diǎn)）。參照如下公式計(jì)算，具體結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3 EPA方法

EPA方法假定不同濃度下加標(biāo)測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)偏差為常數(shù)，實(shí)驗(yàn)室能夠測(cè)量和以99%置信度報(bào)告的某物質(zhì)被檢出的最低濃度，被定義為檢出限。實(shí)驗(yàn)安排為，參照NY/T 761-2008處理8份蘋果樣品，分別加標(biāo)，加標(biāo)量為0.08㎎/㎏。有限次數(shù)測(cè)定（8次），假設(shè)其結(jié)果符合t分布，參照如下公式計(jì)算，n為樣品的平行測(cè)定次數(shù)；SD為n次測(cè)定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差；a為顯著水平，0.01；t((n-1),(1-a=0.99))為自由度是n-1，置信度為1-a=99%時(shí)的t-分布的單邊臨界值；具體結(jié)果見(jiàn)表3。

表1 3倍于空白值標(biāo)準(zhǔn)偏差檢出限各參考值

表2 信噪比法檢出限

CMDL=SD×t((n-1),(1-α=0.99))

3 結(jié)論

有文獻(xiàn)認(rèn)為檢出限相差兩倍左右，為無(wú)顯著性差異[4]。3倍于空白值標(biāo)準(zhǔn)偏差、信噪比法測(cè)定、美國(guó)EPA方法三種檢出限計(jì)算結(jié)果分別為0.011、0.023、0.018 ㎎/㎏，筆者發(fā)現(xiàn)3倍于空白值標(biāo)準(zhǔn)偏差檢出限測(cè)定結(jié)果最優(yōu)，信噪比法與EPA方法檢出限結(jié)果稍大，三種檢出限方法計(jì)算結(jié)果差距在兩倍左右，故認(rèn)為三種方法結(jié)果無(wú)顯著性差異。三種方法雖無(wú)明顯差異，但是因具體數(shù)值還是有區(qū)別，故當(dāng)用檢出限評(píng)估不同實(shí)驗(yàn)室、不同人員、不同方法的優(yōu)劣時(shí)，還需要統(tǒng)一檢出限計(jì)算方法。值得注意是檢出限僅是粗略的表征體系性能，不能用于定量分析，當(dāng)判定樣品中待測(cè)分析物的含量時(shí)，需要計(jì)算測(cè)定下限，定量下限一般為檢出限的10/3倍[5]。

表3 美國(guó)EPA方法估算的檢出限