張鑫海，李 棟，薛瑞婷，岳子燕

（呂梁學(xué)院生命科學(xué)系，山西呂梁 033000）

殼寡糖是一種脫乙酰甲殼素，在自然界廣泛存在。甲殼綱中的節(jié)肢動物如螃蟹、蝦、昆蟲和其他海洋生物的外骨骼是殼聚糖的良好來源，殼寡糖是一種帶正電荷的天然堿性多糖，也是最豐富的天然高分子化合物之一（Crini，2005）。此外，殼聚糖作為一種無毒、可降解的生物聚合物，含有氨基和羥基，具有很多生物學(xué)功能，如凝血、抗炎、抗腫瘤、降低膽固醇和血壓等（占今舜等，2011 ；Goiri 等，2010）。由于殼聚糖的不溶性，其在單胃動物特別是幼齡動物的應(yīng)用有限，但殼寡糖它分子量小、溶解性好、黏度低（Chae 等，2005）。有研究表明，殼寡糖可以降低腸道病原菌的活力，增強腸道免疫功能（Vishu Kumar 等，2005）。此外，Tang 等（2005）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加250 mg/kg 殼寡糖可以提高血清生長激素、胰島素樣因子和蛋白質(zhì)的合成，提高生長速度。然而，目前關(guān)于殼寡糖在斷奶仔豬上的研究較少，本試驗選擇25 d 斷奶的仔豬作為研究動物，研究日糧中添加不同水平的殼寡糖對其生長性能，腸道免疫、腸絨毛形態(tài)及盲腸微生物含量的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計 試驗選擇25 d 斷奶仔豬[ 平均體重為（7.25±1.02）kg] 1125 頭，隨機分成5 組，每組5 個重復(fù)，每個重復(fù)45 頭。對照組飼喂以玉米- 燕麥- 豆粕為主的基礎(chǔ)日糧，試驗組在基礎(chǔ)日糧中分別添加200、400、800 和1600 mg/kg 殼寡糖。試驗分為兩個階段，1 ～17 d 和18 ～35 d，共進行35 d。各階段基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗期間仔豬自由采食和飲水，整個試驗期間不進行調(diào)欄，飼養(yǎng)管理和免疫程序按照商品豬飼養(yǎng)管理操作進行，殼寡糖分子質(zhì)量為2 kDa，購自博智匯力生物科技有限公司。

表1 1 ～35 d 日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 生長性能 每天記錄豬只的健康狀況，參考Pierce 等（2005）的研究方法對糞便進行評分。分別在試驗第17 和35 天下午5 點按照重復(fù)對豬只進行稱重，每周統(tǒng)計1 次飼料耗量，試驗結(jié)束后計算1 ～17 d、18 ～35 d 及試驗全期（1 ～35 d）仔豬日增重、日采食量和飼料報酬（增重/ 采食量）。

1.3 代謝試驗 在試驗結(jié)束的前3 d，每個重復(fù)隨機選擇5 頭豬采用全收糞法進行代謝試驗，詳細試驗方法參考Landero 等（2011）的研究報道。

1.4 血液指標(biāo) 試驗結(jié)束當(dāng)天，每個重復(fù)隨機選擇8 頭豬頸靜脈采血，采用血細胞計數(shù)法分析白細胞、紅細胞和淋巴細胞數(shù)量。同時分離血清，采用試劑盒法（南京建成）測定血清白蛋白、球蛋白和免疫球蛋白G（IgG）含量。

1.5 絨毛形態(tài)和盲腸微生物 試驗結(jié)束當(dāng)天，豬只采血后屠宰，分離十二指腸、空腸、回腸和盲腸。收集盲腸內(nèi)容物，用于分析盲腸大腸桿菌和乳酸桿菌的含量。參考Hou 等（2006）的研究方法分析十二指腸、空腸和回腸絨毛高度及隱窩深度，計算絨毛高度/ 隱窩深度。

1.6 統(tǒng)計分析 采用SPSS（19.0）版單因素方差分析，各組差異用Turkey 法進行多重比較，P＜0.05 判定為差異顯著，試驗結(jié)果以均值表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧添加不同水平殼寡糖對斷奶仔豬生長性能和糞便評分的影響 由表2 可得到，殼寡糖組較對照組顯著提高了18 ～35 d 斷奶仔豬的日增 重（P ＜0.05），對1 ～17 d 及1 ～35 d 仔 豬日增重?zé)o顯著影響（P ＞0.05）；不同殼寡糖添加水平對各階段仔豬日增重均無顯著影響（P ＞0.05）。殼寡糖組與對照組對斷奶仔豬各階段日采食量均無顯著影響（P ＞0.05）。對照組和400 mg/kg 殼寡糖組較其他組顯著降低了斷奶仔豬18 ～35 d 飼料報酬（P ＜0.05），但各組對斷奶仔豬1 ～17 d 和1 ～35 d 飼料報酬無顯著影響（P＞0.05）。

表2 殼寡糖對斷奶仔豬生長性能的影響

由表3 可知，殼寡糖組較對照組顯著降低了1 ～17 d 斷 奶 仔 豬 糞 便 評 分（P ＜0.05），而200 mg/kg 殼寡糖組較其他組顯著降低了1 ～35 d 斷奶仔豬糞便評分（P ＜0.05），各組對18 ～35 d 斷奶仔豬糞便評分的影響無顯著差異（P ＞0.05）。

表3 殼寡糖對斷奶仔豬糞便評分的影響

2.2 日糧添加不同水平殼寡糖對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表4 可知，對照組和200 mg/kg 殼寡糖組較其他組顯著降低了干物質(zhì)、有機物、氮的表觀消化率（P ＜0.05），而800 和1600 mg/kg 殼寡糖組較其他組顯著提高了灰分表觀消化率（P ＜0.05）。各組對中性洗滌纖維表觀消化率無顯著影響（P ＞0.05）。

表4 殼寡糖對斷奶仔豬表觀消化率的影響

2.3 日糧添加不同水平殼寡糖對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表5 可知，各組對血液紅細胞、白細胞數(shù)量和球蛋白和IgG 含量無顯著影響（P ＞0.05）。對 照 組較400、800 和1600 mg/kg 殼寡糖組顯著降低了血液淋巴細胞數(shù)量及總蛋白含量（P ＜0.05）。

表5 殼寡糖對斷奶仔豬血液指標(biāo)的影響

2.4 日糧添加不同水平殼寡糖對斷奶仔豬絨毛形態(tài)的影響 由表6 可知，對照組和殼寡糖組對十二指腸和回腸絨毛高度、隱窩深度、絨毛高度/隱窩深度及空腸絨毛高度和絨毛高度/ 隱窩深度的影響均無顯著差異（P ＞0.05）。對照組和200 mg/kg 殼寡糖組較其他組顯著提高了空腸隱窩深度（P ＜0.05）。

表6 殼寡糖對斷奶仔豬腸絨毛形態(tài)的影響

2.5 日糧添加不同水平殼寡糖對斷奶仔豬盲腸微生物含量的影響 由表7 可知，對照組與殼寡糖組對盲腸乳酸桿菌含量無顯著影響（P ＞0.05）。對照組和200 mg/kg 殼寡糖組較其他組顯著提高了盲腸大腸桿菌含量（P ＜0.05）。

表7 殼寡糖對斷奶仔豬盲腸微生物含量的影響 1010cfu/g

3 討論

3.1 殼寡糖對斷奶仔豬生長性能的影響 本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，殼寡糖組較對照組顯著提高了18 ～35 d 斷奶仔豬的日增重，同時日糧添加200 mg/kg 殼寡糖顯著降低了腹瀉率，這與Han等（2012）的研究結(jié)果一致。此外，對照組和400 mg/kg 殼寡糖組較其他組顯著降低了斷奶仔豬18 ～35 d 飼料報酬，這與對照組采食量升高，但日增重降低有關(guān)。

3.2 殼寡糖對斷奶仔豬養(yǎng)分消化率的影響 殼寡糖中含有幾丁質(zhì)，幾丁質(zhì)及其衍生物可以對消化酶進行固化，目前已證實其可以固定化脂肪酶、β- 淀粉酶和胃蛋白酶等（Krajewska，2004）。殼寡糖是一種低聚糖，其性質(zhì)與果寡糖、低聚半乳糖、半乳糖和甘露寡糖相似。目前關(guān)于殼寡糖對動物養(yǎng)分消化率的報道不一致，如Han 等（2012）發(fā)現(xiàn)，日糧添加1 ～4 g/kg 殼寡糖對斷奶仔豬干物質(zhì)、總能和粗蛋白質(zhì)表觀消化率無顯著影響，其認為寡糖是不可消化的有機物，會稀釋用于水解消化的營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。本試驗結(jié)果顯示，除200 mg/kg 殼寡糖組外，其他殼寡糖水平組較對照組顯著提高了干物質(zhì)、有機物、氮的表觀消化率。此外，殼寡糖對雞養(yǎng)分消化率的影響要高于豬，這在Wang 等（2005）、Li 等（2007）的研究報道中得到證實。

3.3 殼寡糖對斷奶仔豬血液指標(biāo)的影響 動物的血液指標(biāo)反映了機體內(nèi)外營養(yǎng)狀況，本試驗分析了殼寡糖對斷奶仔豬血液指標(biāo)的影響。試驗結(jié)果顯示，對照 組較400、800 和1600 mg/kg 殼寡糖組顯著降低了血液淋巴細胞數(shù)量及總蛋白含量，說明殼寡糖對機體免疫有促進作用，這與Okamoto 等（2003）的研究結(jié)果一致。Li 等（2007）研究發(fā)現(xiàn)，殼寡糖可以調(diào)控脂代謝，日糧添加250 mg/kg 殼寡糖可以降低肉雞血清甘油三酯含量，提高高密度脂蛋白膽固醇的水平，但殼寡糖對斷奶仔豬脂代謝是否具有調(diào)控作用還有待進一步研究。

3.4 殼寡糖對斷奶仔豬腸絨毛形態(tài)及盲腸微生物含量的影響 小腸是營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的主要場所，腸黏膜在消化吸收過程中起重要作用。斷奶應(yīng)激可導(dǎo)致腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)變化較快，導(dǎo)致腸絨毛高度降低，隱窩深度增加（Pluske 等，1996）。腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)異常通常與斷奶仔豬生長遲緩有關(guān)，因為絨毛的縮短減少了養(yǎng)分吸收表面積，導(dǎo)致養(yǎng)分吸收不良，生長性能下降。隱窩是干細胞分裂的區(qū)域，絨毛的更新在這個區(qū)域進行，隱窩變大表明組織快速周轉(zhuǎn)和對新組織的更新要求高（Xu等，2003）。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對照組和200 mg/kg 殼寡糖組較其他組顯著提高了空腸隱窩深度，同時也降低了盲腸大腸桿菌的含量，這與Xu 等（2012）、Han 等（2012）的研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

日糧添加殼寡糖可以提高斷奶仔豬養(yǎng)分消化率、降低腹瀉率和盲腸大腸桿菌含量，1 ～35 d 斷奶仔豬日糧中殼寡糖適宜添加水平為400 mg/kg。