徐宏建，李 昕，么恩悅，鄭 健，趙洪波，張永根*

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，黑龍江哈爾濱 150030；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)習(xí)與示范中心，黑龍江哈爾濱 150030）

干酒精糟及其可溶物（DDGS）是利用玉米等谷物生產(chǎn)酒精的副產(chǎn)物，是固液分離后的濾渣和蒸發(fā)濃縮后的濾液經(jīng)混合干燥而制成的飼料[1]。DDGS具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，在泌乳牛和育肥牛生產(chǎn)中可以替代豆粕或菜籽粕[2]。在DDGS加工過(guò)程中，干燥過(guò)程是決定其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和利用價(jià)值的關(guān)鍵步驟，尤其是對(duì)過(guò)瘤胃蛋白含量十分重要。加熱過(guò)程中會(huì)發(fā)生美拉德反應(yīng)，過(guò)熱處理使飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值降低。傳統(tǒng)濕化學(xué)方法無(wú)法將分子結(jié)構(gòu)與化學(xué)信息聯(lián)系起來(lái)，傳統(tǒng)的“濕”化學(xué)分析嚴(yán)重依賴于化學(xué)反應(yīng)，改變飼料本質(zhì)結(jié)構(gòu)無(wú)法預(yù)測(cè)真實(shí)化學(xué)成分[3]。利用傳統(tǒng)的化學(xué)方法既費(fèi)時(shí)費(fèi)力又破壞了飼料內(nèi)部的蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)，且動(dòng)物試驗(yàn)周期又較長(zhǎng)，不利于飼料企業(yè)生產(chǎn)中快速測(cè)定其成分含量及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)定。為提高DDGS的應(yīng)用效果并合理配制日糧，應(yīng)將快速檢測(cè)及評(píng)定營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的新方法應(yīng)用到DDGS的檢測(cè)及其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)定中。因此，尋求一種可直接反映飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值熱損害程度的敏感指標(biāo)尤為重要。傅里葉變換紅外光譜技術(shù)（FTIR）是一種能夠快速、直接、不破壞各種飼料樣本固有的分子結(jié)構(gòu)特征的分析技術(shù)[4]。許多預(yù)測(cè)模型只考慮到化學(xué)成分含量，沒(méi)有考慮到飼料化學(xué)結(jié)構(gòu)和分子結(jié)構(gòu)的特性，而這些內(nèi)部結(jié)構(gòu)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、能量?jī)r(jià)值、蛋白質(zhì)利用價(jià)值密切相關(guān)[5]。通過(guò)分析蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的改變可以探究熱處理對(duì)蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和利用價(jià)值的影響，還可以探究新型飼料加工工藝對(duì)其分子結(jié)構(gòu)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、消化特性的影響。本試驗(yàn)旨在探究不同熱處理對(duì)DDGS蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、瘤胃降解特性的影響及蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、瘤胃降解特性之間的相關(guān)關(guān)系，以期將此光譜信息作為熱處理中一個(gè)敏感指標(biāo)進(jìn)而簡(jiǎn)單、快速、無(wú)破壞性地分析DDGS的熱損害程度，并預(yù)測(cè)其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的瘤胃降解特性和小腸消化過(guò)程。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 濕酒精糟及其可溶物（WDGS）采集于黑龍江省哈爾濱市雙城區(qū)某飼料加工廠。WDGS在實(shí)驗(yàn)室條件下分別在110、120、130 下烘干0.5、1、1.5 h，共9種不同熱加工處理的DDGS。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧 選用東北農(nóng)業(yè)大學(xué)阿城實(shí)驗(yàn)基地的3頭裝有永久性瘤胃瘺管的健康荷斯坦奶牛（體重600 kg左右）進(jìn)行瘤胃降解試驗(yàn)。試驗(yàn)期間每日08:00和16:00飼喂2次，自由飲水。試驗(yàn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需要量參照NRC（2001）《奶牛營(yíng)養(yǎng)需要》。

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1 化學(xué)成分測(cè)定和康奈爾凈碳水化合物-蛋白質(zhì)體系（CNCPS）組分分析 粗蛋白質(zhì)（CP）、中性洗滌不溶蛋白（NDICP）和酸性洗滌不溶蛋白（ADICP）采用FOSS 8 400全自動(dòng)凱氏定氮儀進(jìn)行測(cè)定。可溶性蛋白（SCP）按照Krishnamoorthy等[6]的方法進(jìn)行測(cè)定。非蛋白氮（NPN）按照Licitra等[7]的方法進(jìn)行測(cè)定。利用CNCPS[8]公式求出蛋白質(zhì)組分中快速降解部分（PA）和中速降解蛋白（PB1）、緩慢降解蛋白（PB2）、不可降解蛋白質(zhì)（PC）的含量。

1.3.2 瘤胃尼龍袋法 根據(jù)Peng等[9]的瘤胃降解試驗(yàn)方法，稱取7 g左右粉碎后的試驗(yàn)樣品分別放入孔徑為50 μm、大小為10 cm×20 cm的已知重量的尼龍袋中，每種樣品3個(gè)重復(fù)。按照“依次投入，同時(shí)取出”的原則放入瘤胃瘺管中，分別在瘤胃中培養(yǎng)0、2、4、8、12、24、36、48 h。取出后的尼龍袋（包括0 h）放在自來(lái)水下沖洗，65 烘干，然后粉碎過(guò)1 mm網(wǎng)篩并測(cè)定各時(shí)間點(diǎn)殘?jiān)鞍踪|(zhì)含量。根據(jù)Peng等[9]的瘤胃動(dòng)力學(xué)模型進(jìn)行計(jì)算：

式中，R（t）為尼龍袋在瘤胃中滯留時(shí)間t后營(yíng)養(yǎng)成分的殘?jiān)Ｓ嗦剩?），U為瘤胃不可降解部分（%），D為瘤胃培養(yǎng)可降解部分（%），Kd為可降解部分的降解速率（%/h），t為瘤胃滯留時(shí)間（h），T0為滯留時(shí)間（h），e為數(shù)學(xué)常數(shù)。

利用SAS 9.4程序Proc Nlin模塊進(jìn)行迭代最小二乘回歸運(yùn)算得到滯后時(shí)間降解參數(shù)。飼料有效降解率（ED，%）的計(jì)算公式：

式中，S為瘤胃培養(yǎng)可溶部分，S（%）=100-U-D，Kp為瘤胃外流速率，為0.06/h。

1.3.3 改進(jìn)三步體外法測(cè)定小腸消化率 參照Gargallo等[10]改進(jìn)三步體外法的方法，稱取7 g DDGS放入尼龍袋，經(jīng)瘤胃消化12 h，測(cè)定降解殘?jiān)牡鞍踪|(zhì)含量。稱取1 g殘?jiān)b入尼龍袋（5 cm×10 cm），將尼龍袋裝入DaisyⅡ培養(yǎng)瓶中。培養(yǎng)瓶中為預(yù)熱的2 L含有1 g/L胃蛋白酶（P-7000，Sigma）pH為1.9的鹽酸溶液。將培養(yǎng)瓶放在ANKOM DaisyⅡ體外模擬發(fā)酵培養(yǎng)箱，39 水浴中振蕩1 h。取出尼龍袋并清凈，加入2 L預(yù)熱的含有3 g/L胰蛋白酶（P-7545，Sigma）和50 μg/L百里香酚的0.5 mol/L磷酸鹽緩沖液。并將培養(yǎng)瓶放在ANKOM DaisyⅡ體外模擬發(fā)酵培養(yǎng)箱，39 水浴中振蕩24 h。取出尼龍袋清洗烘干，測(cè)定小腸消化后殘?jiān)鼧悠返牡鞍踪|(zhì)含量。計(jì)算公式：

式中，dRUP為不可降解蛋白小腸消化率（%），CP12h為瘤胃發(fā)酵后降解殘?jiān)鼧悠分蠧P含量（g/kg），CPi為模擬小腸消化后殘?jiān)鼧悠分蠧P含量（g/kg）。

式中，RUCPNRC根據(jù)NRC-2001模型計(jì)算的不可降解蛋白含量：EDCP為有效降解蛋白含量。

1.3.4 光譜數(shù)據(jù)的采集及分析 在紅外烤燈照射下，將2 mg干燥的樣品與200 mg溴化鉀混合充分研磨混勻后，用紅外專用壓片機(jī)（型號(hào)：769YP-15A粉末壓片機(jī)）進(jìn)行壓片。然后放入傅里葉變換紅外光譜儀（型號(hào)：島津FTIR-8 400S）中讀取信息，掃描范圍為700～4 000 cm-1，分辨率為4 cm-1，掃描次數(shù)為128，5個(gè)重復(fù)。利用OMNIC 8.2軟件對(duì)光譜蛋白質(zhì)區(qū)域酰胺區(qū)段（1 709～1 562 cm-1）進(jìn)行分析，并分別對(duì)酰胺I帶與Ⅱ帶進(jìn)行基線校正（圖1）。對(duì)酰胺I帶區(qū)段進(jìn)行二階導(dǎo)處理，并對(duì)二階段圖譜進(jìn)行平滑，找到原光譜對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)（α螺旋、β折疊）位置，并計(jì)算峰高。

圖1 不同熱處理DDGS蛋白質(zhì)光譜酰胺I帶與酰胺Ⅱ帶的區(qū)域劃分

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)處理采用SAS 9.4程序PROC GLM模塊對(duì)蛋白質(zhì)化學(xué)成分、瘤胃降解參數(shù)及小腸消化率進(jìn)行數(shù)據(jù)分析（P＜0.05表示差異顯著，P＞0.05表示差異不顯著）；利用PROC CORR模塊對(duì)其進(jìn)行相關(guān)性分析（P＜0.05表示顯著相關(guān)）；蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)與其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、瘤胃降解特性和小腸消化率之間的預(yù)測(cè)模型通過(guò)SAS中的PROC REG程序逐步回歸。

2 結(jié) 果

2.1 不同熱加工處理對(duì)DDGS蛋白質(zhì)成分和CNCPS蛋白質(zhì)組分的影響 如表1所示，經(jīng)過(guò)不同程度熱處理的DDGS之間蛋白質(zhì)化學(xué)成分和CNCPS 蛋白質(zhì)組分存在顯著差異（P＜0.05）。其中不同熱處理之間CP含量無(wú)顯著差異。隨加熱程度的增加，NDICP和ADICP呈升高趨勢(shì)，SCP和NPN呈降低趨勢(shì)。在CNCPS蛋白質(zhì)組分中隨著加熱程度的增加PA組分和PB1組分呈現(xiàn)降低趨勢(shì)；PB2組分和PC組分呈升高趨勢(shì)。

2.2 不同熱加工對(duì)DDGS蛋白質(zhì)瘤胃動(dòng)態(tài)降解參數(shù)和小腸消化率的影響 由表2可知，不同程度熱處理DDGS之間蛋白質(zhì)瘤胃降解參數(shù)和小腸消化特性之間存在顯著差異（P＜0.05）。隨著加熱程度的逐漸增加蛋白質(zhì)瘤胃培養(yǎng)可溶部分（CPS）、蛋白質(zhì)可降解部分的降解速率（CPKd）和EDCP呈降低趨勢(shì)，蛋白質(zhì)瘤胃不可降解部分（CPU）則呈升高趨勢(shì)。隨著加熱程度的增加瘤胃dRUP和TDP降低，IDP升高。

2.3 不同熱加工對(duì)DDGS蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的影響 如表3所示，不同熱處理DDGS的蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)之間存在顯著差異（P＜0.05）。隨著熱加工程度的增加酰胺I帶峰高（H_AmideI）和峰面積（A_AmideI）、酰胺I帶與酰胺Ⅱ帶峰面積比（A_AmideI/A_AmideⅡ）和峰高比（H_AmideI/H_AmideⅡ）呈降低趨勢(shì)；而酰胺Ⅱ帶峰高（H_AmideⅡ）和峰面積（A_AmideⅡ）呈升高趨勢(shì)。但α-螺旋峰高（H_α-helix）、β-折疊峰高（H_βsheet）以及α-螺旋和β-折疊的峰高比（H_α-helix/H_β-sheet）卻沒(méi)有明顯的變化趨勢(shì)。

表1 不同熱處理對(duì)DDGS蛋白質(zhì)成分和CNCPS組分的影響

表2 不同熱處理對(duì)DDGS蛋白質(zhì)瘤胃降解特性及小腸消化率的影響

2.4 不同熱加工DDGS中蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值之間的相關(guān)性 如表4所示，不同熱處理DDGS蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與其化學(xué)成分和CNCPS組分之間存在相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）。CP與A_AmideⅡ呈正相關(guān)，與H_α-helix/H_β-sheet呈負(fù)相關(guān)。NDICP、ADICP、PB2和PC組分均與A_AmideI、H_AmideI、A_AmideI/A_AmideⅡ、H_AmideI/H_AmideⅡ呈負(fù)相關(guān)，與H_AmideⅡ呈正相關(guān)。SCP、NPN、PA和PB1均與H_AmideⅡ存在 負(fù)相關(guān)，與 A_AmideI、H_AmideI、A_AmideI/A_AmideⅡ、H_AmideI/H_AmideⅡ存在正相關(guān)。但蛋白質(zhì)化學(xué)成分與CNCPS組分與H_α-helix、H_β-sheet和H_α-helix/H_β-sheet均無(wú)顯著相關(guān)性（P＞0.05）。

如表5所示，不同熱處理DDGS中蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)瘤胃降解特性和小腸消化率之間存在顯著相關(guān)性（P＜0.05）。CPS、CPKd和 EDCP均與 H_AmideI、A_AmideI、H_AmideI/H_AmideⅡ 和 A_AmideI/A_AmideⅡ存在正相關(guān)關(guān)系。CPD均與A_AmideI、A_AmideⅡ、H_AmideI、H_AmideⅡ 存 在 正 相 關(guān) 關(guān)系。CPU與 H_AmideI、A_AmideI、H_AmideI/H_AmideⅡ和A_AmideI/A_AmideⅡ存在負(fù)相關(guān)關(guān)系，與 A_AmideⅡ、H_AmideⅡ存在正相關(guān)關(guān)系。dRUP與A_AmideI/A_AmideⅡ存在正相關(guān)關(guān)系。IDP與H_AmideI、A_AmideI、H_AmideI/H_AmideⅡ 和 A_AmideI/A_AmideⅡ呈負(fù)相關(guān)。TDP與 H_AmideI、H_AmideI/H_AmideⅡ和A_AmideI/A_AmideⅡ呈正相關(guān)。

表3 不同熱處理對(duì)DDGS蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的影響

表4 不同熱處理DDGS蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)化學(xué)成分和CNCPS組分之間的相關(guān)性

2.5 不同熱加工DDGS中蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值之間的回歸關(guān)系 如表6所示，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)光譜參數(shù)可預(yù)測(cè)DDGS蛋白質(zhì)化學(xué)成分、CNCPS組分、瘤胃降解和小腸消化特性。H_AmideI和ⅡH_AmideⅡ、A_AmideI/A_AmideⅡ可共同作為預(yù)測(cè)因子估測(cè)飼料中NDICP含量（R2=0.71，P＜0.01），H_AmideⅡ和 A_A mideI/A_AmideⅡ可共同作為預(yù)測(cè)因子估測(cè)ADICP含量（R2=0.84，P＜0.01）。SCP、NPN、PA 和 dRUP可以通過(guò)預(yù)測(cè)因子A_AmideI/A_AmideⅡ進(jìn)行估測(cè)。PB1、PB2和 CPU與 H_AmideI和 ⅡH_AmideⅡ、A_AmideI/A_AmideⅡ有關(guān)，PC可以通過(guò)H_AmideⅡ和A_AmideI/A_AmideⅡ 預(yù)測(cè)（R2=0.84，P＜0.01）。

表5 不同熱處理DDGS蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與蛋白瘤胃降解特性及小腸消化率之間相關(guān)性

表6 不同熱處理DDGS蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值之間的回歸關(guān)系

3 討 論

3.1 不同熱加工處理對(duì)DDGS蛋白質(zhì)化學(xué)成分和CNCPS蛋白質(zhì)組分的影響 飼料通過(guò)適度加熱可破壞其中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，有助于蛋白質(zhì)的水解與吸收。但溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使賴氨酸等堿性氨基酸的氨基與還原糖發(fā)生美拉德反應(yīng)，減少游離氨基酸含量，從而降低蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。根據(jù)Mckinno等[11]的研究，加熱對(duì)CP含量沒(méi)有顯著影響，但是影響蛋白質(zhì)的化學(xué)成分，加熱可減少飼料中的SCP，并增加氮和中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的結(jié)合，使NDICP和ADICP含量增加，蛋白質(zhì)化學(xué)成分變化與本試驗(yàn)結(jié)果一致。CNCPS組分中，PB2和PC與美拉德反應(yīng)中的熱損傷蛋白有關(guān)[8]，PB2組分升高使得瘤胃可降解蛋白隨之降低，有更多的蛋白通過(guò)瘤胃在小腸中消化。而不可降解組分包括與木質(zhì)素結(jié)合的蛋白和發(fā)生美拉德反應(yīng)的蛋白，這部分蛋白很難被動(dòng)物利用。隨著加熱程度的增加DDGS的NPN和PB1含量降低，PB2和PC含量升高，說(shuō)明加熱使DDGS的瘤胃有效降解率降低。Yu等[12]報(bào)道，加熱過(guò)的亞麻籽SCP降低、PB2和PC增加。不同蛋白質(zhì)組分具有不同的瘤胃降解速率，加熱引起的蛋白質(zhì)組分的變化影響了蛋白質(zhì)在瘤胃中降解和逃逸數(shù)量[13]。

3.2 不同熱加工處理對(duì)DDGS蛋白質(zhì)瘤胃動(dòng)態(tài)降解參數(shù)和小腸消化率的影響 60%～80%的飼料蛋白在瘤胃中被微生物降解，過(guò)瘤胃蛋白在小腸胃蛋白酶和胰蛋白酶的作用下分解吸收。加熱過(guò)程中美拉德反應(yīng)使可溶部分轉(zhuǎn)化成不溶但可降解部分和瘤胃不可降解部分。研究表明，隨著加熱程度增加菜籽粕中CP的12 h和24 h消失率逐漸降低，致使EDCP降低[14]。加熱也會(huì)降低全棉籽的瘤胃EDCP[15]，這使得進(jìn)入小腸和后消化道的蛋白增加，提高飼料蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，與本試驗(yàn)的結(jié)果一致。瘤胃降解特性中，瘤胃CPS組分隨著加熱程度的增加逐漸減低，瘤胃CPU組分升高，結(jié)果與CNCPS體系預(yù)測(cè)的蛋白質(zhì)在瘤胃中的消化情況一致。CPU組分主要成分為NDICP和ADICP，是由氨基酸與中性和酸性洗滌纖維在加熱過(guò)程中結(jié)合而成的，NDICP可在小腸中繼續(xù)消化吸收，ADICP則很少或者無(wú)法被小腸消化，而且在瘤胃中未被利用的蛋白質(zhì)未必在小腸中轉(zhuǎn)化為可吸收的氨基酸[11]。過(guò)瘤胃蛋白進(jìn)入小腸后，被蛋白酶分解成氨基酸經(jīng)小腸上皮細(xì)胞吸收，構(gòu)成總可吸收蛋白，消化情況與單胃動(dòng)物相似[16]。研究表明，過(guò)熱加工會(huì)降低dRUP和TDP，并與ADICP含量存在負(fù)相關(guān)關(guān)系，加熱產(chǎn)生的ADICP不僅降低瘤胃微生物降解作用還降低小腸酶解消化作用[11]。本試驗(yàn)中加熱使小腸TDP含量增加，飼料蛋白質(zhì)的吸收主要取決于IDP含量，這對(duì)高產(chǎn)奶牛的產(chǎn)奶量有很重要的影響[17]。本試驗(yàn)中加熱使dRUP和TDP略有降低，但是IDP含量增加，因此提高了蛋白的利用率。

3.3 不同熱加工處理對(duì)DDGS蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的影響 植物組織中的光譜結(jié)構(gòu)提供的信息與化學(xué)信息有關(guān)，反映出組織成分、結(jié)構(gòu)、化學(xué)成分和植物生長(zhǎng)的環(huán)境因素[18]。飼料蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值不僅受到蛋白質(zhì)和氨基酸的種類(lèi)和含量的影響，還與蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。熱加工通過(guò)改變蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)來(lái)降低瘤胃降解率增加反芻動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)利用。油菜餅和芥菜餅蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)中AmideI/AmideⅡ一般受到脫油條件、加工處理以及飼料種類(lèi)的影響[19]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，加熱顯著影響A_AmideI/A_AmideⅡ 和 H_AmideI/H_AmideⅡ， 其 變 化呈降低趨勢(shì)。Yu[20]研究發(fā)現(xiàn)，A_AmideI/A_AmideⅡ和H_AmideI/H_AmideⅡ與蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)特性和消化特性密切相關(guān)。在 AmideI中出現(xiàn)的 H_α-helix、H_β-sheet和 H_α-helix/H_β-sheet會(huì)影響飼料蛋白的小腸消化率[21]。加熱過(guò)程中β折疊比例增加引起小腸酶解作用降低，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值下降[18]。本試驗(yàn)中α螺旋和β折疊沒(méi)有呈現(xiàn)出明顯的變化趨勢(shì)，可能是因?yàn)椴煌暳戏N類(lèi)蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)加熱的敏感程度不同。Yu等[12]報(bào)道，加熱會(huì)影響黃亞麻籽的蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)，但對(duì)棕亞麻籽沒(méi)有影響。濕熱法比干熱法對(duì)蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的影響更加明顯[22]。本研究結(jié)果說(shuō)明，不同熱處理DDGS的蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)存在顯著差異，可能是造成不同熱處理DDGS的蛋白質(zhì)利用率不同的原因。

3.4 不同熱加工處理DDGS中蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值之間的相關(guān)性 蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、降解特性和消化率不僅取決于蛋白質(zhì)化學(xué)成分還受到分子結(jié)構(gòu)（酰胺I帶和酰胺Ⅱ帶的峰高、峰面積及比值）的影響[18]。研究蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)有利于了解飼料的瘤胃降解特性和提高動(dòng)物對(duì)其的利用率。Xin等[23]報(bào)道，H_AmideI/H_AmideⅡ與ADICP呈負(fù)相關(guān)，與SCP和NPN呈正相關(guān)，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。本試驗(yàn)中不同加熱程度影響蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的非公價(jià)反應(yīng)，從而改變其分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)。Theodoridou等[24]也報(bào)道，A_AmideI/A_AmideⅡ與可溶性真蛋白存在正相關(guān)。但在二者均未發(fā)現(xiàn)α螺旋和β折疊峰高比與蛋白質(zhì)化學(xué)成分存在相關(guān)性，不同加工方式對(duì)飼料結(jié)構(gòu)造成不同的影響。本試驗(yàn)中蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)瘤胃降解特性和小腸消化特性也存在相關(guān)性。A_AmideI/A_AmideⅡ和 H_AmideI/H_AmideⅡ均與CPU呈負(fù)相關(guān)，與EDCP呈正相關(guān)。在DDGS瘤胃降解特性的研究中也發(fā)現(xiàn)，瘤胃PC與A_AmideI及A_AmideI/A_AmideⅡ存在負(fù)相關(guān)，與AmideⅡ存在正相關(guān)。通過(guò)熱加工、化學(xué)處理和脫油處理可以增加蛋白質(zhì)飼料的過(guò)瘤胃蛋白含量，使更多的可消化蛋白通過(guò)瘤胃在小腸吸收利用。蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)與微生物降解和小腸消化酶的作用密切相關(guān)。Theodoridou等[24]研究表明，小腸消化特性與蛋白質(zhì)酰胺結(jié)構(gòu)不存在相關(guān)性。但本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，A_AmideI和A_AmideⅡ、H_AmideI和H_AmideⅡ與dRUP和TDP呈正相關(guān)，與IDP呈負(fù)相關(guān)，A_AmideI、H_AmideI與IDP存在負(fù)相關(guān)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，不同熱處理DDGS的瘤胃降解特性和小腸消化主要與蛋白質(zhì)酰胺結(jié)構(gòu)存在相關(guān)性，利用蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)可對(duì)蛋白質(zhì)化學(xué)成分和降解消化特性進(jìn)行預(yù)測(cè)，為研究不同熱加工程度對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)和利用價(jià)值的影響提供可靠依據(jù)。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，不同熱處理DDGS的蛋白質(zhì)化學(xué)成分、CNCPS組分、蛋白質(zhì)瘤胃降解特性和小腸消化率差異顯著，其中110 、0.5 h處理組的DDGS蛋白質(zhì)瘤胃有效降解率和小腸消化率最高，TDP含量最高；加熱會(huì)降低DDGS的EDCP和dRUP，增加瘤胃PA和不可利用組分和IDP；不同加熱程度DDGS中光譜參數(shù)與蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值存在顯著相關(guān)性，并可利用DDGS蛋白分子結(jié)構(gòu)的光譜參數(shù)對(duì)蛋白質(zhì)化學(xué)成分、CNCPS組分、蛋白質(zhì)瘤胃降解特性和小腸消化率進(jìn)行預(yù)測(cè)。