任章章

(隴南市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 隴南 730046)

農(nóng)業(yè)部第2635號(hào)公告表明，2011年6月以來，全國(guó)未檢出亞洲I型口蹄疫病原學(xué)陽性樣品。經(jīng)全國(guó)動(dòng)物防疫專家委員會(huì)評(píng)估，我國(guó)亞洲I型口蹄疫已達(dá)到全國(guó)免疫無疫標(biāo)準(zhǔn)。農(nóng)業(yè)部研究決定，自2018年7月1日起，在全國(guó)范圍內(nèi)停止亞洲I型口蹄疫免疫，停止生產(chǎn)銷售含有亞洲I型口蹄疫病毒組分的疫苗。根據(jù)農(nóng)業(yè)部規(guī)定，甘肅省獸醫(yī)局及時(shí)調(diào)整口蹄疫疫苗采購(gòu)計(jì)劃，新購(gòu)進(jìn)口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活苗用作牛羊免疫。為了掌握肉牛注射口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗后的免疫效果，隴南市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心于2018年8月開展了肉牛接種口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗的免疫效果試驗(yàn)，為肉牛口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗普遍免疫提供了理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 選擇試驗(yàn)肉牛

在隴南市武都區(qū)選擇一個(gè)肉牛育肥場(chǎng)，挑選40頭10-12月齡臨床檢查健康的西門塔爾雜交肉牛作為試驗(yàn)用牛。

1.2 試驗(yàn)用疫苗

口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗(O/MYA98/BY/2010株+Re-A/WH/09株)，中農(nóng)威特生物科技股份有限公司生產(chǎn)。疫苗規(guī)格：100ml/瓶，生產(chǎn)批號(hào)：D181502J，有效期20190523。

1.3 免疫抗體檢測(cè)試劑

口蹄疫O型和A型液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒均由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，O型批號(hào)：20180618101-10，A型批號(hào)：20180604103-2。

1.4 免疫試驗(yàn)方法

1.4.1 免疫接種及采血 40頭試驗(yàn)肉牛在分別采集血樣后注射疫苗，采用頸部肌肉注射，每頭牛注射1 ml，注射完疫苗后打耳標(biāo)并詳細(xì)登記。采集的血樣無菌分離血清備用。

1.4.2 免疫后臨床觀察及采血 免疫后定期觀察試驗(yàn)牛臨床表現(xiàn)。免疫后21 d，分別采集40頭試驗(yàn)牛血樣，無菌分離血清備用。

1.4.3 免疫前后的抗體檢測(cè) 嚴(yán)格按照中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)的口蹄疫O型、A型液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行操作，O型和A型ELISA反應(yīng)板均按每板10頭份進(jìn)行操作，血清稀釋度23-210。

1.4.4 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《2018年國(guó)家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》附件2《口蹄疫監(jiān)測(cè)計(jì)劃》規(guī)定執(zhí)行：口蹄疫O型、A型液相阻斷ELISA，免疫21天抗體效價(jià)≥26為個(gè)體免疫合格，免疫合格個(gè)體數(shù)量占群體總數(shù)的70%(含)以上為免疫合格群體。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 臨床觀察結(jié)果

注射疫苗后定期觀察試驗(yàn)牛的采食、飲水、精神狀態(tài)等臨床表現(xiàn)至21 d，未見任何不良反應(yīng)。

2.2 抗體檢測(cè)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果表明：40頭試驗(yàn)牛免疫前O型口蹄疫抗體檢出20頭，但抗體水平均低于26；用口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活苗免疫后21天，檢出抗體合格樣品34份，合格率85.0%(34/40)。免疫前40頭試驗(yàn)牛A型口蹄疫抗體均未檢出，用口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活苗免疫后21天，檢出A型抗體合格樣品31份，合格率77.5%(31/40)。A型抗體水平普遍比O型低1-2個(gè)滴度。詳細(xì)檢測(cè)結(jié)果見表1。

表1 免疫前后抗體檢測(cè)結(jié)果對(duì)照表

3 討論與小結(jié)

1)從試驗(yàn)結(jié)果來看，用O型、A型二價(jià)滅活苗免疫肉牛21 d后，O型口蹄疫抗體合格率達(dá)85.0%，A型口蹄疫抗體合格率77.5%，A型抗體合格率明顯低于O型，A型抗體水平普遍比O型低1～2個(gè)滴度。分析原因，主要是因?yàn)樵囼?yàn)牛在春季普遍注射過口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗，有一定免疫基礎(chǔ)，而A型是首次免疫，故A型抗體合格率低于O型，且抗體滴度普遍比O型和亞洲Ⅰ型低1～2個(gè)滴度。

2)從檢測(cè)結(jié)果來看，用O型、A型二價(jià)滅活苗免疫肉牛21 d后，仍然有部分不合格個(gè)體，原因可能和動(dòng)物個(gè)體差異有關(guān)，個(gè)別牛應(yīng)各種原因不能對(duì)疫苗產(chǎn)生足夠的免疫應(yīng)答，不能產(chǎn)生足夠的免疫抗體。

3)按照疫苗使用說明，本次試驗(yàn)使用的O型、A型二價(jià)滅活苗注射劑量為每頭牛1 ml，相比較以前的口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗，注射劑量減少了一半，這就為廣大基層防疫機(jī)構(gòu)的疫苗貯存和使用提供的更加有利的條件。注射劑量減少一方面減少了疫苗貯存壓力，減輕了防疫員的勞動(dòng)強(qiáng)度，由于注入的疫苗佐劑隨之減少，另一方面也可減少了免疫不良反應(yīng)的發(fā)生幾率，可顯著提高口蹄疫防控水平。

4)隨著亞洲Ⅰ型口蹄疫的逐漸消失，國(guó)家適時(shí)調(diào)整口蹄疫免疫計(jì)劃，用O型、A型二價(jià)滅活苗代替以前的O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗，是順應(yīng)口蹄疫防控形勢(shì)的必然選擇。本次試驗(yàn)表明：用O型、A型二價(jià)滅活苗免疫肉牛后21天，未見任何不良反應(yīng)發(fā)生，O型、A抗體合格率完全能達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。