喻建輝，余春濤，江平嶼

（江西汪氏蜜蜂園有限公司，江西南昌 330100）

糖尿病是因胰島素絕對或相對不足而引起體內糖代謝紊亂的一種疾病，目前難以有效防治[1]。惡性腫瘤、心腦血管病是我國較為嚴重的慢性非傳染疾病，而糖尿病也尾隨其后，成為了現(xiàn)在三大慢性非傳染性疾病之一，正嚴重威脅著人類健康[2]。目前，無論是國內還是國外，對于糖尿病的防治措施都沒有比較有效的方式，對于患者來說，長期服用藥物治療，無論是中藥還是西藥，都會因為其副作用而對身體其他器官造成一定的損害。于是，尋找一種對人體有效而且安全的糖尿病預防產品便成為了如今防治糖尿病研究治療的當務之急和未來發(fā)展趨勢。蜂膠是蜜蜂從植物花苞及樹干上采集的樹膠，混入其上顎腺分泌物和蜂蠟等物質而成的一種具有芳香氣味的膠狀固體物質[3]。蜂膠中的成分非常復雜，目前的研究發(fā)現(xiàn)，鑒定出的物質有300多種，在鑒定出的物質當中，有黃酮類和醛酮類物質，氨基酸、芳香酸及其衍生物，還有萜烯類及其他多種烴類物質，此外還包括礦物質元素與維生素、酶等物質[4-5]。根據(jù)其他研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠的生物學活性、藥理活性也被廣泛應用[6]，其中，在提高人體免疫力、清除自由基、抗氧化方面有較多應用，還可以消炎、促進傷口愈合及降低腫瘤發(fā)生風險。另外，在心腦血管方面也有應用，能夠降低血糖，對受損心肌及肝臟都有一定的保護作用。由于這些功效的研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠在化妝品、食品、藥品等方面都有著廣泛的應用。

蜂膠在血糖調節(jié)方面有一定的作用，有學者的研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠對胰島素的敏感性有良好作用，能增加其敏感性，胰島抵抗水平也有較大改善，因此可以用于血糖調節(jié)作用[7]。日本研究人員對蜂膠調節(jié)血糖作用進行了幾項動物實驗研究，用巴西蜂膠喂食糖尿病小鼠。經一段時間后發(fā)現(xiàn)，小鼠體內葡萄糖運轉效率加快，胰島素抵抗作用也有顯著改善，血糖水平就此得到有效調節(jié)[8-9]。

試驗通過采用不同劑量的蜂膠軟膠囊灌胃四氧嘧啶誘導的高血糖模型小鼠，觀察其體重、空腹血糖及糖耐量，探討其輔助降血糖功能。

1 材料和方法

1.1 樣品

蜂膠軟膠囊，由江西汪氏蜜蜂園有限公司提供，內容物為棕色軟膏狀，于4℃下保存，供試驗用。

1.2 試驗動物及環(huán)境

SPF級昆明種小鼠，由湖北實驗動物中心提供。21～24g，雌性100只，濕度70%～75%，溫度25～27℃。

1.3 劑量設計

人體每日推薦攝入量為3.0 g/日劑量的設計需參考人體，以其每日推薦量來確定，其每日推薦攝入量為3.0 g/日，相對劑量設計來說，也就是0.05 g/（kg·bw），根據(jù)該推薦量設置3個劑量組，10倍的低劑量組0.5 g/（kg·bw），20倍的中劑量組1.0 g/（kg·bw），30倍的高劑量組1.5 g/（kg·bw），用蒸餾水配至所需濃度，對照組給予蒸餾水。

1.4 儀器與試劑

One TouchⅡ血糖儀，美國強生公司產品；四氧嘧啶，美國Simga公司產品。

1.5 試驗方法

1.5.1 正常動物降糖試驗

正常動物降糖試驗，在供試驗的昆明種小鼠中選用健康成年雌性小鼠30只，所選用的小鼠需禁食3 h，期間可自由飲水，保證正常生理活動，之后該小鼠需按血糖水平進行分組，測定血糖時采用取尾血測定，分組采用隨機的方法分為2組即對照組和劑量組，每組15只，采用1.5 g/（kg·bw）受試物給予劑量組小鼠，該方法需要保證對照效果，此時相對于劑量組，對照組需給予蒸餾水，蒸餾水的劑量需要和受試物相同，連續(xù)灌胃30 d，對照組和劑量組都需要采用禁食處理，方法同前，空腹血糖值作為測定指標，通過其空腹血糖值觀察受試物對正常動物空腹血糖的影響。

1.5.2 四氧嘧啶高血糖模型小鼠降糖試驗及糖耐量試驗

試驗需建立了一個高血糖模型，在建立高血糖模型前，需要有一個小鼠正?；顒拥幕A血糖，在供試驗的昆明種小鼠中選用健康成年雌性小鼠15只，同樣禁食3 h，之后測定該小鼠的血糖水平，作為試驗過程中的基礎血糖水平。高血糖模型的建立，同樣對試驗小鼠禁食處理，時間24 h，也保證其正常的飲水，尾靜脈注射四氧嘧啶40 mg/（kg·bw），然后測定其血糖水平，該小鼠需要經過一段時間的生理活動，時間為5 d，之后進行禁食處理，時間為3 h，篩選的依據(jù)為小鼠的血糖水平，篩選血糖水平較高的小鼠60只，即血糖值大于10 mmol/L的小鼠，然后將該60只小鼠隨機分為4組，1個高血糖模型對照組和3個劑量組，每組15只，3個劑量組對應地分別給予低劑量組0.5 g/（kg·bw），中劑量組1.0 g/（kg·bw）和高劑量組1.5 g/（kg·bw）的受試物，該方法需要保證對照效果，此時相對于劑量組，對照組需給予蒸餾水，蒸餾水的劑量需要和受試物相同，對試驗小鼠連續(xù)灌胃30 d，對照組和劑量組都需要采用禁食處理，方法同前，然后用2.0 g/（kg·bw）葡萄糖溶液給各組小鼠灌胃，測定血糖值時采尾血測定，測定時應采取多個時間點，該試驗中在0，0.5，2.0 h 3個時間點取尾血測血糖值，根據(jù)血糖值來分析觀察受試物對四氧嘧啶高血糖模型小鼠空腹血糖及糖耐量的影響。

1.6 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)用DBASEⅢ軟件建立數(shù)據(jù)庫，用STATA軟件分析處理。

2 結果與分析

2.1 對正常小鼠體重的影響

蜂膠軟膠囊對正常小鼠體重的影響見表1。

表1 蜂膠軟膠囊對正常小鼠體重的影響

由表1可見，給予1.5 g/（kg·bw）劑量該軟膠囊試樣30 d，動物體重與對照組比較差異無顯著性，說明該蜂膠軟膠囊對正常小鼠體重無影響。

2.2 對正常小鼠空腹血糖影響

蜂膠軟膠囊對正常小鼠空腹血糖的影響見表2。

表2 蜂膠軟膠囊對正常小鼠空腹血糖的影響

由表2可見，給予1.5 g/（kg·bw）劑量該軟膠囊試樣30 d，動物空腹血糖與對照組比較差異無顯著性，說明該蜂膠軟膠囊對正常小鼠空腹血糖無影響。

2.3 對四氧嘧啶高血糖模型小鼠體重的影響

蜂膠軟膠囊對高血糖模型小鼠體重的影響見表3。

由表3可見，給予低劑量組0.5 g/（kg·bw），中劑量組1.0 g/（kg·bw）和高劑量組1.5 g/（kg·bw）劑量該軟膠囊試樣30 d，動物體重與對照組比較差異有顯著性。說明該蜂膠軟膠囊對高血糖模型小鼠體重有增加作用。

表3 蜂膠軟膠囊對高血糖模型小鼠體重的影響

2.4 對四氧嘧啶高血糖模型小鼠空腹血糖的影響

蜂膠軟膠囊對高血糖模型小鼠空腹血糖的影響見表4。

表4 蜂膠軟膠囊對高血糖模型小鼠空腹血糖的影響

受試物對該模型小鼠的影響需對比其造模前的情況，造模前小鼠的血糖水平與造模后進行對比，隨機取15只造模前的小鼠測空腹血糖，其血糖水平為6.2±1.1 mmol/L，根據(jù)表4的結果顯示，造模后各組動物空腹血糖均呈現(xiàn)出一個增長的現(xiàn)象，與造模前的6.2±1.1 mmol/L比較，差異較明顯，有顯著性（p＜0.01），根據(jù)這種對比現(xiàn)象的結果可以看出，模型成立。給予0.5，1.0，1.5 g/（kg·bw）劑量該軟膠囊受試物試樣30 d，這3個劑量組的空腹血糖和模型對照組相比較，均呈現(xiàn)下降的現(xiàn)象，差異較明顯，有顯著性（p＜0.01），在血糖水平上來說，這3個劑量組的血糖水平相對于模型對照組來說，均表現(xiàn)出比較明顯的下降趨勢，差異較明顯，有顯著性（p＜0.01）。也就是說，在對四氧嘧啶高血糖模型小鼠的空腹血糖方面，該蜂膠軟膠囊有一定的降低效果。

2.5 對四氧嘧啶高血糖模型小鼠糖耐量的影響

以0.5，1.0，1.5 g/（kg·bw）劑量該軟膠囊試樣連續(xù)喂養(yǎng)造模成功的模型小鼠30 d，這3個劑量組給葡萄糖后在一定的時間點測定其血糖水平，分別在0，0.5，2.0 h時間點測定血糖值，這3個劑量組的血糖值和模型對照組相比較，均呈現(xiàn)下降的現(xiàn)象，差異較明顯，有顯著性（p＜0.01），見表5；再觀察其給糖后的曲線下面積情況，明顯小于模型對照組，差異較明顯，有顯著性（p＜0.01），見表6。在對四氧嘧啶高血糖模型小鼠糖耐量方面，該蜂膠軟膠囊有一定的增強效果。

蜂膠軟膠囊對高血糖模型小鼠給糖后血糖的影響見表5，蜂膠軟膠囊對高血糖模型小鼠葡萄糖曲線下面積的影響見表6。

表5 蜂膠軟膠囊對高血糖模型小鼠給糖后血糖的影響

表6 蜂膠軟膠囊對高血糖模型小鼠葡萄糖曲線下面積的影響

3 討論

以1.5 g/（kg·bw）劑量該軟膠囊試樣灌胃正常小鼠30 d，結果表明，正常小鼠的體重和空腹血糖方面，該受試物對其并沒有影響。

以低劑量組0.5 g/（kg·bw），中劑量組1.0 g/（kg·bw）和高劑量組1.5 g/（kg·bw）劑量該軟膠囊受試物來灌胃喂養(yǎng)四氧嘧啶誘導的高血糖模型小鼠30 d，結果顯示，在體重方面，與模型對照組小鼠比較，其劑量組均有所增加；在血糖水平方面，其劑量組小鼠空腹血糖也有所降低（p＜0.01）；在糖耐量方面，其劑量組小鼠均有所升高（p＜0.01）。由此可見，該蜂膠軟膠囊有輔助降血糖作用。

4 結論

綜上所述，正常小鼠對該蜂膠軟膠囊敏感度較低，對其體重和空腹血糖并沒有影響，而對于四氧嘧啶誘導造模的高血糖模型小鼠，蜂膠軟膠囊能降低其空腹血糖，而且升高其糖耐量，因此，該蜂膠軟膠囊具有良好的輔助降血糖功能。

據(jù)國內外研究表明，目前已從蜂膠中分離鑒定的化學成分有黃酮類和醛酮類物質，氨基酸、芳香酸及其衍生物，還有萜烯類及其他多種烴類物質。此外，還包括礦物質元素與維生素、酶等物質，尤其是含有重要特征的大量的類黃酮、萜烯類化合物[10]。有多種生物學功能在蜂膠中都有所體現(xiàn)，生物活性物質是其中較為重要的部分，而黃酮類物質就是其中之一，黃酮類物質在發(fā)揮作用的時候并不是全部相同，根據(jù)來源蜂膠的不同，其所含黃酮類化合物的種類也有一定的差異[11]。蜂膠中的一些黃酮類化合物對利用外源性葡萄糖合成糖原的作用也有促進，從而能影響胰島β細胞功能和血糖代謝；糖尿病的發(fā)病機制與其他心腦血管方面有所不同，其糖尿病有許多的并發(fā)癥，其中高糖氧化應激就與其有著密切的關系，它與胰島素抵抗等疾病的發(fā)病機制較為相似[12]。人體是一個很復雜的系統(tǒng)，而且能夠有效地抵御外來有害刺激，當人體遭受到有害刺激時，就會產生過多的氧自由基，人體就會產生氧化應激，從而來增加其清除能力，人體的功能會受收到損傷。正是因為這種氧化之間的平衡受到破壞[13]，脂質的氧化是人體平衡的重要反應，當體內自由基過多的時候，脂質會產生過氧化，再加上鏈式反應，對人體的傷害就增加，氧化應激就會增加該種損傷作用[14]。在保護人體組織系統(tǒng)方面，蜂膠有著其獨特的作用，蜂膠是天然物質，在抗氧化方面有著很明顯的效果，此外，對細菌、真菌及病毒，蜂膠都有比較好的抵抗作用，通過蜂膠作用，人體內脂質的過氧化能得到有效的控制，也能有效地清除人體內多余的自由基，由此可見，蜂膠能有效地改善糖尿病，降低人體內的血糖作用[15]。