雷靜，程郁菁，王川，陳鄂湘，喻劍虹，李璞

（國(guó)藥集團(tuán)武漢血液制品有限公司，湖北武漢 430207）

破傷風(fēng)是由破傷風(fēng)桿菌侵入人體傷口造成的一種特異性感染，是致死性傳染病，其高毒力的痙攣毒素可阻斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，引起肌肉強(qiáng)直和典型的全身痙攣[1]。破傷風(fēng)抗毒素（TAT）是由馬血清制成的，部分人會(huì)出現(xiàn)過敏反應(yīng)，而破傷風(fēng)人免疫球蛋白（TIG）是人血制品，基本沒有過敏反應(yīng)。破傷風(fēng)人免疫球蛋白主要用于預(yù)防和治療破傷風(fēng)，尤其適用于對(duì)破傷風(fēng)抗毒素（TAT）有過敏反應(yīng)者。

狂犬病毒轉(zhuǎn)移的發(fā)生起源于被感染宿主的傷口，引起咬傷傷口處唾液病毒的沉積。一旦感染發(fā)展，而沒有有效的治療，具有接近100%的致死率。但是，在被咬傷暴露傷口之前或在傷口暴露后很短時(shí)間內(nèi)給予疫苗的注射，能有效避免這種結(jié)果的發(fā)生[2]?？袢∪嗣庖咔虻鞍字饕糜诒豢袢蚱渌倓?dòng)物咬傷、抓傷患者的被動(dòng)免疫。

疫苗和免疫球蛋白是相輔相成的作用，疫苗屬于抗原，通過刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體后起到有效的防護(hù)作用，需要較長(zhǎng)時(shí)間產(chǎn)生抗體，但效力持久；免疫球蛋白屬于抗體，能快速起效但效力較短。近年來(lái)，臨床對(duì)血液制品的需求持續(xù)攀升，國(guó)內(nèi)血液制品行業(yè)無(wú)論是原料血漿采集量，還是血液制品產(chǎn)量、品種都在逐年增長(zhǎng)[3]。2017年狂免、破免產(chǎn)品簽發(fā)情況見表1。

表1 2017年狂免、破免產(chǎn)品簽發(fā)情況

了解各漿站原料血漿的狂犬病/破傷風(fēng)抗體效價(jià)水平，是制備用于預(yù)防和治療狂犬病/破傷風(fēng)的人免疫球蛋白產(chǎn)品的前提[4]。為了解疫苗接種者血清中狂犬/破傷風(fēng)抗體水平，以評(píng)價(jià)血漿站的預(yù)防接種效果，現(xiàn)對(duì)各漿站2015—2017年狂犬疫苗/破傷風(fēng)疫苗接種者進(jìn)行血清抗體測(cè)定，為漿站提高抗體效價(jià)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血漿樣品

由武穴武源單采血漿站、鄖陽(yáng)單采血漿站、武生松滋單采血漿站、武生云夢(mèng)單采血漿站、湖南君山單采血漿站提供。

1.2 試劑、儀器設(shè)備

人狂犬病病毒IgG抗體測(cè)定試劑盒（寧波天潤(rùn)生物藥業(yè)有限公司、泰安京泰生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)）、破傷風(fēng)IgG抗體測(cè)定試劑盒（寧波天潤(rùn)生物藥業(yè)有限公司、泰安京泰生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)），試劑盒均為合格品并在有效期內(nèi)使用。Opsys MR酶標(biāo)儀（DYNEX Technologies, Inc.），PW-960型洗板機(jī)（深圳市匯松科技發(fā)展有限公司），CU-600型電熱恒溫水槽（武漢恒豐中欣生物科技發(fā)展有限公司）。

1.3 檢測(cè)方法

采用ELISA法，按照試劑盒說明書操作，陰性對(duì)照OD值≤0.1時(shí)，試驗(yàn)成立?？瞻讓?duì)照位置：A1；陰性對(duì)照位置：A6；9 IU/mL陽(yáng)性對(duì)照位置：A2、A3；6 IU/mL陽(yáng)性對(duì)照位置：A4、A5。9 IU/mL陽(yáng)性對(duì)照稀釋：稀釋液10 μL+陽(yáng)性對(duì)照90 μL；6IU/mL陽(yáng)性對(duì)照稀釋：稀釋液 40 μL+陽(yáng)性對(duì)照60 μL；樣品稀釋：稀釋液100 μL+樣品5 μL。酶標(biāo)板讀板結(jié)果判定：OD值≥（A2+A3）/2，抗體效價(jià)≥9 IU/mL；（A4+A5）/2≤OD值＜（A2+A3）/2，6 IU/mL≤抗體效價(jià)＜9 IU/mL；OD值＜（A4+A5）/2，抗體效價(jià)＜6 IU/mL。

1.4 分析方法

根據(jù)檢測(cè)數(shù)據(jù)，采用柱狀圖對(duì)各漿站破傷風(fēng)、狂犬病人免疫血漿抗體效價(jià)進(jìn)行分析，主要對(duì)9 IU/mL以上、6～9 IU/mL的高效價(jià)血漿所占百分比進(jìn)行三年的對(duì)比。

2 結(jié)果與分析

2.1 特異性免疫血漿效價(jià)檢測(cè)總數(shù)分析

2015—2017年特免血漿檢測(cè)數(shù)據(jù)見表2。從表2中可以看出，破免血漿檢測(cè)總量呈逐年上漲的趨勢(shì)，高效價(jià)血漿所占百分比也在逐漸增高，破傷風(fēng)免疫情況逐漸提高。狂免血漿2016年和2017年檢測(cè)總數(shù)均比2015年下降了32%，高效價(jià)血漿所占百分比也在逐漸降低，這是由于接種疫苗時(shí)間長(zhǎng)了免疫效果下降導(dǎo)致的，需要進(jìn)行狂犬疫苗的加強(qiáng)免疫。

表2 2015-2017年特免血漿檢測(cè)數(shù)據(jù)

2.2 狂犬病特免血漿抗體效價(jià)檢測(cè)結(jié)果分析

對(duì)比武穴、鄖陽(yáng)、松滋、云夢(mèng)漿站三年狂免血漿檢測(cè)的數(shù)據(jù)，結(jié)果見表3。

表3 2015—2017年狂免血漿檢測(cè)數(shù)據(jù)

武穴和鄖陽(yáng)的狂犬血漿檢測(cè)總數(shù)多于松滋和云夢(mèng)，對(duì)幾個(gè)漿站狂犬抗體效價(jià)9 IU/mL以上、6～9 IU/mL的高效價(jià)血漿所占百分比進(jìn)行三年的對(duì)比，結(jié)果見圖1、圖2，從圖中可以看出，武穴和鄖陽(yáng)高效價(jià)血漿所占百分比多于松滋和云夢(mèng)，說明武穴和鄖陽(yáng)狂犬免疫效果較好。

圖1 狂犬抗體效價(jià)≥9 IU/mL

圖2 6 IU/mL≤狂犬抗體效價(jià)＜9 IU/mL

2.3 破傷風(fēng)特免血漿抗體效價(jià)檢測(cè)結(jié)果

對(duì)比君山、松滋、云夢(mèng)漿站破免血漿三年檢測(cè)總數(shù)，結(jié)果見表4。

表4 2015—2017年破免血漿檢測(cè)數(shù)據(jù)

君山的破傷風(fēng)血漿檢測(cè)總數(shù)多于松滋和云夢(mèng)，對(duì)幾個(gè)漿站破傷風(fēng)抗體效價(jià)9 IU/mL以上、6～9 IU/mL的高效價(jià)血漿所占百分比進(jìn)行三年的對(duì)比，結(jié)果見圖3、圖4，從圖中可以看出，君山高效價(jià)血漿所占百分比多于松滋和云夢(mèng)，說明君山的破傷風(fēng)免疫效果較好。

3 討論

從以上數(shù)據(jù)和柱狀圖可以看出：破免收漿量逐年增多，2017年比2015年增長(zhǎng)了103%，原因是目前破免價(jià)格放開，刺激生產(chǎn)廠家增加投產(chǎn)，破免制品價(jià)格提高，預(yù)計(jì)各企業(yè)會(huì)增加產(chǎn)量。雖然狂免收漿量降低，但是隨著經(jīng)濟(jì)的增長(zhǎng)和狂犬病預(yù)防門診規(guī)范處置程度的提高，狂免產(chǎn)品的需求應(yīng)該會(huì)進(jìn)一步增長(zhǎng)。武穴和鄖陽(yáng)漿站高效價(jià)狂免血漿較多，君山漿站高效價(jià)破免血漿較多，武穴、鄖陽(yáng)、君山三個(gè)漿站的采漿量較高，高效價(jià)血漿所占百分比也較多。

圖3 破傷風(fēng)抗體效價(jià)≥9 IU/mL

圖4 6 IU/mL≤破傷風(fēng)抗體效價(jià)＜9 IU/mL

狂犬病、破傷風(fēng)疫苗常規(guī)免疫后進(jìn)行抗體檢測(cè)十分重要，特別是對(duì)暫未產(chǎn)生抗體者，應(yīng)及時(shí)加強(qiáng)免疫，確保免疫效果[5]。為了采集更多的高效價(jià)原料血漿制備出安全有效的狂犬病、破傷風(fēng)人免疫球蛋白制品，使之取之于民、用之于民，建議漿站增大宣傳工作，動(dòng)員更多的獻(xiàn)漿員，同時(shí)主動(dòng)嚴(yán)格執(zhí)行免疫程序，提高回采率，爭(zhēng)取多收獲高效價(jià)血漿。