陳前安，吳光聲，王燕霞

(1. 浙江省醫(yī)療健康集團(tuán)杭州醫(yī)院，浙江 杭州310000；2. 杭州市第二醫(yī)院，浙江 杭州310000)

由于新生兒出生時(shí)肝糖原不足，腦組織不能獲得足夠的葡萄糖，新生兒低血糖的發(fā)生率較高，嚴(yán)重的低血糖會(huì)導(dǎo)致新生兒腦損傷，可遺留視覺障礙、腦癱、枕葉癲癇等后遺癥[1]。對(duì)于多數(shù)健康新生兒，早期暫時(shí)性低血糖并不會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重后遺癥的發(fā)生，但持續(xù)或反復(fù)發(fā)生的低血糖容易導(dǎo)致腦細(xì)胞受損[2]。血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)是特異性定位在神經(jīng)元胞漿內(nèi)的烯醇化酶的同工酶的一種，S100B蛋白主要集中于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞、垂體前葉細(xì)胞，是一種腦特異性的鈣結(jié)合蛋白[3]。腦損傷時(shí)，血腦脊液屏障損傷，神經(jīng)元中的NSE、S100B蛋白進(jìn)入血液中[4]。本次研究通過檢測(cè)新生兒低血糖腦損傷(hypoglycemia brain damage，HBD)患兒的S100B、NSE水平，探討分析新生兒S100B、NSE水平與HBD與之間的關(guān)系，為臨床新生兒HBD的早發(fā)現(xiàn)、早治療提供理論依據(jù)?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取于2014年1月至2016年12月來浙江省醫(yī)療健康集團(tuán)杭州醫(yī)院治療的HBD新生兒96例，根據(jù)不同臨床表現(xiàn)，將96例患兒分為觀察組(44例)和對(duì)照組(52例)。觀察組為癥狀性HBD患兒，對(duì)照組為無癥狀HBD患兒。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患兒均符合新生兒HBD診斷標(biāo)準(zhǔn)，靜脈血葡萄糖<2.2mmol/L(40mg/dL)；②出現(xiàn)腦電圖異常、肌張力下降、反應(yīng)遲緩、陣發(fā)性紫紺、呼吸暫停、驚厥、嗜睡等臨床表現(xiàn)的歸為觀察組患兒；③血糖低于正常值，無腦電圖異常及臨床表現(xiàn)的為對(duì)照組。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除先天性代謝性疾病所導(dǎo)致腦損傷的患兒；②排除新生兒缺氧缺血性腦病所導(dǎo)致腦損傷的患兒；③排除核黃疸、顱內(nèi)感染、先天性腦發(fā)育異常所導(dǎo)致腦損傷的患兒。選取同期足月健康新生兒80例為健康對(duì)照組，三組新生兒一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本次研究所有家屬均知情同意，均簽署知情同意書。本次研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2調(diào)查方法

分別與入院后24h、48h、72h采集三組新生兒的股靜脈血和足跟毛細(xì)血管血連續(xù)測(cè)定微量血糖，低血糖的新生兒每6h監(jiān)測(cè)微量血糖直至恢復(fù)正常水平，統(tǒng)計(jì)記錄低血糖持續(xù)時(shí)間。

1.2.1 S100B、NSE水平的測(cè)定

入院后24h、72h取所有新生兒股靜脈血2mL室溫靜置1h，3 000r/min離心15min，取上清液。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法測(cè)定血清S100B蛋白水平，使用上海藍(lán)基公司生產(chǎn)的Human S100B ELISA試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清NSE水平，實(shí)用羅氏411全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀和原裝試劑，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.2.2腦電圖檢查

所有新生兒于入院24～72h內(nèi)，由院內(nèi)腦電圖專業(yè)技師操作，完成首次腦電圖檢查。將腦電圖異常情況分為輕度(腦電圖缺乏交替波形，出現(xiàn)一過性低波幅或頻率不對(duì)稱)、中度(出現(xiàn)局灶性少量陣發(fā)性棘、建波彌漫性低波幅)、重度(出現(xiàn)大量爆發(fā)性中長(zhǎng)程病樣放電、顯著不對(duì)稱，嚴(yán)重低電壓或電窒息)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1 研究對(duì)象一般情況

觀察組共44例患兒，男性患兒20例，女性患兒24例，胎齡37～42周，平均胎齡(38.78±1.75)周，出生體重出2 300～4 580g，平均體重(3 172±1 329)g，生后20～40h，平均為(30.49±10.15)h；對(duì)照組共52例患兒，男性患兒26例，女性患兒26例，胎齡38～42周，平均胎齡(39.50±1.32)周，出生體重出2 300～4 700g，平均體重(3 290±1 439)g，生后20～40h，平均為(31.17±9.95)h；健康對(duì)照組，男性患兒40例，女性患兒40例，胎齡38～42周，平均胎齡(39.80±1.85)周，出生體重2 350～4 680g，平均體重(3 210±1 380)g，生后20～40h，平均為(30.97±10.05)h。三組新生兒的一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.20，P=0.58；F=2.06，P=0.34；χ2=0.27，P=0.87；F=0.89，P=0.59)，具有可比性，見表1。

Table 1 Comparison of demographic and disease information between two

2.2血糖水平、低血糖持續(xù)時(shí)間比較

三組血糖水平組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=269.69，P<0.01)，其中觀察組、對(duì)照組血糖水平低于健康對(duì)照組(t=-21.06，P<0.01；t=1.75，P<0.01)，觀察組血糖水平低于對(duì)照組(t=9.45，P<0.05)，具體結(jié)果見表2。 觀察組患兒的低血糖持續(xù)時(shí)間明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=6.74，P<0.01)，見表3。

組別例數(shù)(n)血糖含量(mmol/L)FP觀察組440.88±0.36△▲對(duì)照組521.69±0.28▲269.69<0.01健康對(duì)照組804.12±0.80

注：△與對(duì)照組相比，P<0.01；▲與健康對(duì)照組相比，P<0.01。

組別例數(shù)(n)低血糖持續(xù)時(shí)間(h)tP觀察組4437.89±12.06△6.74<0.01對(duì)照組5223.33±9.07

注：△與對(duì)照組相比，P<0.01。

2.3 NSE、S100B蛋白水平比較

24h時(shí)血清NSE、S100B蛋白水平組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，觀察組、對(duì)照組均明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.90，P<0.01；t=5.89，P<0.01；t=6.18，P<0.01；t=5.35，P<0.01)。三組之間72h時(shí)，血清NSE、S100B蛋白水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.97，P>0.05；F=2.86，P>0.05)，具體結(jié)果見表4。

組別 24h 72h NSES100BNSES100B觀察組17.60±4.18△▲27.89±6.01△▲5.97±2.179.48±2.18對(duì)照組11.85±3.10▲16.38±5.14▲5.18±1.629.34±1.89健康對(duì)照組4.60±1.147.89±2.015.26±1.588.68±2.01F325.14306.972.972.86P<0.01<0.01>0.05>0.05

注：△與對(duì)照組相比，P<0.01；▲與健康對(duì)照組相比，P<0.01。

3討論

3.1低血糖與腦損傷

由于新生兒出生后無法從臍血獲得血糖，主要通過喂養(yǎng)、糖原分解及糖異生等途徑維持血糖。由于此時(shí)新生兒肝糖原儲(chǔ)存不足，新生兒如果得不到正確的喂養(yǎng)，很容易出現(xiàn)新生兒低血糖的狀況。早期一過性的低血糖如果得到及時(shí)糾正，并不會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重后果。如果新生兒長(zhǎng)時(shí)間低血糖，患兒腦細(xì)胞不能獲得足夠的葡萄糖，供能不足，容易導(dǎo)致患兒出現(xiàn)一系列的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。新生兒HBD的臨床表現(xiàn)多為抽搐、嗜睡、驚厥、肌張力減低等非特異性表現(xiàn)，重癥患兒容易遺留視覺聽力障礙、腦癱、認(rèn)知障礙、癲癇等后遺癥[5]。同時(shí)，新生兒HBD早期缺乏典型的臨床表現(xiàn)，盡早發(fā)現(xiàn)低血糖新生兒，并對(duì)患兒腦損傷程度進(jìn)行評(píng)估與處理有著重要的臨床意義[6]。

3.2NSE與S100B蛋白

NSE主要存在于大腦神經(jīng)元及神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中，較少存在于其他組織器官，NSE參與腦組織糖酵解的過程，腦損傷時(shí)，NSE從胞質(zhì)中進(jìn)入腦脊液，導(dǎo)致腦脊液里的NSE濃度升高，因此，NSE是觀察腦內(nèi)神經(jīng)元損傷或壞死程度的靈敏指標(biāo)[7]。S100B蛋白是一類主要存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞、垂體前葉細(xì)胞以及周圍神經(jīng)系統(tǒng)的朗格漢斯細(xì)胞中的腦細(xì)胞特異性蛋白[8]。腦損傷后由于血腦脊液屏障的破壞，S100B蛋白釋放入血，水平上升，能夠有效提示患兒是否存在腦損傷。

3.3研究結(jié)果分析

本次研究結(jié)果表明，觀察組患兒的血糖水平低于對(duì)照組和健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；對(duì)照組患兒的血糖水平低于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組患兒的低血糖持續(xù)時(shí)間明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這一研究結(jié)果表明，盡早發(fā)現(xiàn)低血糖新生兒并盡早判斷腦損傷程度有著中藥的臨床意義。觀察組患兒24h時(shí)，血清NSE、S100B蛋白水平明顯高于對(duì)照組和健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)照組患兒24h時(shí)，血清NSE、S100B蛋白水平明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三組之間72h時(shí)，血清NSE、S100B蛋白水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這一研究結(jié)果表明，S100B蛋白和NSE在HBD患兒發(fā)病早期，能夠敏感進(jìn)行診斷，隨著腦損傷程度的恢復(fù)，S100B水平會(huì)隨之下降進(jìn)而恢復(fù)正常[2]。這一研究結(jié)果與康麗娜[8]等的研究結(jié)果一致，提示NSE和S100B蛋白在診斷新生兒HBD腦損傷程度上，具有良好的診斷意義。

綜上所述，新生兒HBD時(shí)，血清NSE、S100B水平升高，與患兒的低血糖程度和持續(xù)時(shí)間有關(guān)，隨著腦損傷程度的恢復(fù)，血清NSE、S100B水平可降至正常，是新生兒HBD早期的敏感診斷指標(biāo)。