羅 瑩 劉連強(qiáng) 張志軍 周永斌王文治 李鳳美

（天津市林業(yè)果樹研究所，天津北辰300380）

菌種是食用菌生產(chǎn)的基礎(chǔ)，菌種的好壞直接決定著食用菌栽培的成敗[1-2]。食用菌菌種一般包括母種、原種、栽培種，原種制作是食用菌生產(chǎn)中的重要環(huán)節(jié)。一般原種所使用的培養(yǎng)料多為谷粒（如麥粒、玉米粒等）、木屑、棉籽殼等[4-6]。雖然谷粒菌種具有儲存時間長，菌種萌發(fā)快等優(yōu)點(diǎn)，但菌種制作過程復(fù)雜，對制種人員的操作經(jīng)驗(yàn)和技能要求都有較高，而且發(fā)菌期間污染率高；以木屑、棉籽殼等為培養(yǎng)料制作的原種，菌種萌發(fā)慢，在接種時須成塊，否則菌種菌絲體斷裂，直接影響三級種的質(zhì)量。以陶粒為主料制備的原種，與普通原種相比制作簡單、菌絲生長速度快、污染率低、菌種質(zhì)量好，而且接種操作便捷，大大提高了菌種的生產(chǎn)效率。為此筆者進(jìn)行陶粒菌種配方的優(yōu)化及制備技術(shù)研究，以期為陶粒菌種制作應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試白靈菇菌株

白靈菇菌株白靈菇1號、白靈菇2號均由來自天津市薊州區(qū)栽培戶白靈菇子實(shí)體分離所得，天津市林業(yè)果樹研究所保存。

1.2 試驗(yàn)配方

1.2.1 陶粒浸泡液配方

①土豆200 g，葡萄糖20 g，水1000 mL。②葡萄糖2%，蛋白胨0.5%，磷酸二氫鉀0.1%，硫酸鎂0.1%。③自來水。

1.2.2 陶粒原種培養(yǎng)料配方

①陶粒75%，麩皮12%，玉米芯12%，石膏1%。②陶粒75%，麩皮12%，棉籽殼12%，石膏1%。③陶粒75%，麩皮12%，稻殼12%，石膏1%。④陶粒75%，麩皮12%，豆秸12%，石膏1%。⑤陶粒75%，麩皮12%，棉稈12%，石膏1%。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 制作浸泡液

按配方配制陶粒浸泡液，常溫保存，備用。

1.3.2 浸泡陶粒

將陶粒放置于不同的泡沫箱。中午11：00加入浸泡液浸泡，浸泡至隔天的9：00取出，瀝水，稱重。

1.3.3 配制原種培養(yǎng)料

培養(yǎng)料配方：陶粒75%，麩皮12%，稻殼12%，石膏1%（浸泡液配方試驗(yàn)用）。在浸泡后的陶粒中加入稻殼、麩皮、石膏，混勻，調(diào)整培養(yǎng)料含水量，最后裝入菌種瓶。

1.3.4 滅菌接種

采用高壓滅菌的方法，在壓力0.15 MPa，溫度126℃維持3～3.5 h。瓶溫降至25℃時在超凈工作臺上進(jìn)行接種操作。平均每支試管母種接3～5瓶。

1.3.5 發(fā)菌管理

接種后的原種瓶，置恒溫箱或菌種培養(yǎng)室避光發(fā)菌，前期溫度嚴(yán)格控制在25～28℃，菌絲萌發(fā)后并長滿料面以后溫度控制在22～25℃。發(fā)菌期間及時檢查，并挑出污染的菌種妥善處理。經(jīng)過25～30 d培養(yǎng)，菌絲基本長滿瓶。

1.3.6 菌絲生長狀況觀察及測定

菌絲長滿上層料面后開始測量菌絲生長速度，每隔一天觀察菌絲吃料深度、長勢、滿瓶天數(shù)和污染情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 浸泡液配方比較試驗(yàn)結(jié)果

陶粒本身不含有菌絲生長所需要的營養(yǎng)，而陶粒吸收的浸泡液才是提供菌絲生長的營養(yǎng)源；陶粒具有特定的空隙結(jié)構(gòu)，浸泡液的黏度，也可能會影響陶粒對浸泡液的吸收。浸泡液配方試驗(yàn)結(jié)果見表1。

圖1 白靈菇1號原種

圖2 白靈菇2號原種

表1 不同浸泡液浸泡陶粒白靈菇菌種菌絲生長情況

試驗(yàn)結(jié)果表明，配方1浸泡液中由于含有馬鈴薯提取物比較渾濁，因此影響了陶粒對浸泡液的吸收，陶粒的吸液量較??；而配方2是將營養(yǎng)物質(zhì)完全溶解于水中，浸泡液均勻而澄清，與配方3的水相比，陶粒吸液量相近。由表1可見，配方1浸泡液浸泡陶粒原種菌絲粗壯、濃密、潔白，滿瓶時間短且污染率低?？梢娪绊懱樟ＴN菌絲生長的主要因素是浸泡液的營養(yǎng)物質(zhì)，與陶粒的吸液量關(guān)系不大。

2.2 原種培養(yǎng)料配方比較試驗(yàn)結(jié)果

陶粒原種培養(yǎng)料中除了陶粒還含有一定比例的其他輔料，這些原料既起到為菌絲提供營養(yǎng)的作用，又具有保水、透氣的作用。

由表2可以看出，5個白靈菇陶粒原種培養(yǎng)料配方中，配方3和配方4白靈菇菌絲長速要比其他配方快。這可能與培養(yǎng)料本身的營養(yǎng)成分含量和顆粒大小有關(guān)，配方3的稻殼中含有豐富的微量元素，而配方4的豆秸含有氮元素，都具有促進(jìn)菌絲生長的作用。

表2 白靈菇陶粒原種培養(yǎng)料配方試驗(yàn)結(jié)果

配方3和4菌絲粗壯、潔白、濃密，而且滿瓶天數(shù)短，污染率低，是較好的白靈菇陶粒原種配方。配方1和5菌絲較細(xì)，說明菌絲活力不足，配方2雖然菌絲粗壯，但是滿瓶天數(shù)較長，說明菌絲生長速度慢，這對于繼續(xù)轉(zhuǎn)接栽培種非常不利。

2.3 不同白靈菇菌株的適應(yīng)性試驗(yàn)結(jié)果

選取了兩株常用的白靈菇菌株1號和2號制作陶粒原種試驗(yàn)。白靈菇1、白靈菇2號菌株活化后，分別接種在棉籽殼栽培料、配方3、配方4的陶粒原種培養(yǎng)料上。試驗(yàn)結(jié)果表明兩株菌株都能在陶粒培養(yǎng)基中正常生長，菌絲長勢相近，生長速度白靈菇1號比白靈菇2號快；同一菌株在3種培養(yǎng)料上的萌發(fā)時間一致的，在陶粒培養(yǎng)基中的菌絲生長速度較快，滿瓶時間比棉籽殼提前7～10 d。

3 小 結(jié)

以陶粒作為主要載體制作菌種是一種新的制種方法。陶粒制菌種減少了棉籽殼、木屑的使用，具有環(huán)保、便捷、高效等優(yōu)點(diǎn)。試驗(yàn)結(jié)果表明，適宜陶粒浸泡液配方是土豆200 g，葡萄糖20 g，加水1000 mL。適宜的陶粒原種栽培料配方是陶粒75%，麩皮12%，稻殼12%，石膏1%（配方3）或陶粒75%，麩皮12%，豆秸12%，石膏1%（配方4）。生產(chǎn)上常用白靈菇菌株1號和2號都能在陶粒培養(yǎng)料中正常生長，且菌絲長勢相近，但白靈菇1號的菌絲生長速度更快。陶粒培養(yǎng)基菌絲滿瓶比棉籽殼提前7～10 d。

試驗(yàn)結(jié)果對陶粒制作白靈菇菌種具有指導(dǎo)作用。