王斐

（黑龍江省齊齊哈爾市畜牧總站 161000）

20世紀(jì)90年代以來(lái)，中國(guó)乳牛的存欄量大增，奶牛養(yǎng)殖量不斷增加。高效養(yǎng)牛模式是目前養(yǎng)殖場(chǎng)追求的方式，早期妊娠診斷可提高奶牛繁殖率，從而提高奶牛養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。近年來(lái)，奶牛早孕診斷技術(shù)出現(xiàn)了很多新的方法與技術(shù)。

1 奶牛的早期妊娠診斷主要技術(shù)

1.1 早孕因子診斷法

早孕因子是一種妊娠相關(guān)蛋白復(fù)合物，通過抑制雌性動(dòng)物的細(xì)胞免疫，使胎兒能正常存活，從而達(dá)到避免母體免疫排斥的目的。早孕因子的診斷方法主要是確定早孕因子的含量，以此作為早孕診斷的重要指標(biāo)[1]。

1.2 乳膠凝集抑制試驗(yàn)

當(dāng)精子和卵子結(jié)合形成合子時(shí)，胚胎和胎盤在母牛體內(nèi)發(fā)育，絨毛膜促性腺激素是由絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞和囊胚子葉分泌出來(lái)的，通過乳膠凝集抑制試驗(yàn)測(cè)定懷孕雌性動(dòng)物的尿液和奶中的激素可作為早期妊娠診斷的方法[2]。

1.3 超聲波診斷法

超聲波有A超、B超、D超，其中多普勒超聲被廣泛應(yīng)用。其原理是利用超聲波對(duì)動(dòng)物子宮掃描，根據(jù)信號(hào)判斷動(dòng)物是否懷孕[3]。我國(guó)運(yùn)用超聲波在動(dòng)物早孕的診斷進(jìn)行大量研究。鄧甘珍等在2004年用B超檢測(cè)了137只處于不同妊娠階段的雌性動(dòng)物，在交配后第30天的診斷準(zhǔn)確率為89%，在交配后31～35d的診斷準(zhǔn)確率為97%，35d以上的診斷準(zhǔn)確率為100%。

1.4 宮頸-陰道黏液電導(dǎo)率測(cè)定法

有研究者通過測(cè)定宮頸-陰道黏液電導(dǎo)率在妊娠早期和發(fā)情周期有規(guī)律的變化發(fā)現(xiàn)，健康奶牛發(fā)情時(shí)導(dǎo)電性水平較低，從發(fā)情開始逐漸上升到發(fā)情后期逐漸下降；在發(fā)情后受精過程中，孕牛的電導(dǎo)率變化與空牛不同。發(fā)情周期的每個(gè)階段，懷孕奶牛的導(dǎo)電性都明顯低于未懷孕奶牛。

1.5 血小板計(jì)數(shù)法

在交配7d后懷孕奶牛的血小板顯著下降，而未懷孕奶牛的血小板計(jì)數(shù)無(wú)顯著改變。利用這個(gè)原理在育種前后，根據(jù)血小板計(jì)數(shù)的變化對(duì)198頭奶牛的血小板計(jì)數(shù)進(jìn)行測(cè)定，并與交配后約50d的直接試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果表明，血小板計(jì)數(shù)檢出奶牛妊娠率分別為81%和90%。

1.6 血清酸滴定法

懷孕期間懷孕奶牛產(chǎn)生一些特定的免疫球蛋白，在酸性環(huán)境中與其他蛋白質(zhì)形成不溶性復(fù)合物，實(shí)際中多以血清素滴定法檢測(cè)免疫球蛋白[4]。

1.7 堿性磷酸酶活力測(cè)定法

在桑葚胚階段，懷孕奶牛血液中堿性磷酸酶活性高于未孕奶牛，妊娠第一個(gè)月血清中堿性磷酸酶活性升高，在妊娠第2～3個(gè)月顯著升高。

1.8 放射免疫測(cè)定法

放射免疫分析(RIA)是將放射性方法與免疫方法同時(shí)結(jié)合的一種新型方法。蔡志強(qiáng)等用抗孕激素單克隆抗體建立黃體酮包覆固相RIA測(cè)定奶牛交配后21～58d奶或血樣中黃體酮含量。結(jié)果表明，懷孕的檢出率為90%～95%。RIA方法準(zhǔn)確性、靈敏度高，但設(shè)備昂貴、技術(shù)要求高、輻射危害大，該技術(shù)的臨床應(yīng)用受到一定限制。Wang等分別檢測(cè)了10頭妊娠奶牛和10頭發(fā)情奶牛牛奶中黃體酮的含量，發(fā)現(xiàn)妊娠奶牛黃體酮含量明顯高于發(fā)情奶牛。

2 小結(jié)

目前，早孕診斷的各種方法基本已經(jīng)十分成熟，奶牛早孕診斷方法越來(lái)越多，早孕診斷技術(shù)越來(lái)越成熟。一些較為新式的診斷方法卻使用不多，甚至基層很少使用，有些方法在生產(chǎn)實(shí)踐中無(wú)法得到廣泛有效的應(yīng)用，一些診斷方法的準(zhǔn)確性與可靠性還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。隨著世界奶牛養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展和進(jìn)步，早孕診斷技術(shù)的重要性越來(lái)越凸顯，新技術(shù)的出現(xiàn)也會(huì)使診斷效率越來(lái)越高。