■ 宋新磊 劉國(guó)文 李 勇 席鵬彬 林 剛 王 哲*

（1.吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130012；2.新希望六和飼料股份有限公司，山東青島266100；3.AB Vista亞太有限公司，新加坡329682；4.北京奧特奇生物制品有限公司，北京100600）

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

金霉素預(yù)混劑（20%含量），金河生物科技股份有限公司生產(chǎn)，甘油三酯（TG）含量檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京普利萊（APPLYGEN）基因技術(shù)有限公司，Trizol、反轉(zhuǎn)錄試劑和熒光定量PCR試劑均購(gòu)自天根生化科技（北京）有限公司。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物分組與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)周期為42 d。選取360只體重相近[(42±1.0)g]的1日齡AA雛公雞（購(gòu)自北京華都育種公司提供），隨機(jī)分為2個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，基礎(chǔ)日糧為玉米-豆粕型日糧，按照雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 33-2004)配制，不添加抗生素；試驗(yàn)組日糧為基礎(chǔ)日糧中添加金霉素(有效含量為50 mg/kg)。配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。所有肉雞飼養(yǎng)管理?xiàng)l件一致，自由采食和飲水，按照常規(guī)程序進(jìn)行免疫接種。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 樣品的采集與數(shù)據(jù)記錄

所有試驗(yàn)肉雞在42 d齡屠宰，屠宰前12 h對(duì)整欄試驗(yàn)雞進(jìn)行飲食控制，空腹稱重。屠宰前采集血液并分離血清。屠宰后迅速采集腹脂脂肪組織樣品，于-80℃保存，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

1.4 常規(guī)指標(biāo)

空腹稱重時(shí)記錄活體重（BW）和采食量（TFI），并計(jì)算日采食量（ADFI）和料肉比（FCR）等指標(biāo)。屠宰后記錄屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重和腹脂重，并計(jì)算屠體率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。

1.5 血液生化指標(biāo)

每個(gè)組分別選擇12只個(gè)體血清樣品，使用生化試劑盒分別檢測(cè)血液中甘油三酯（TG）和膽固醇（CHO）的含量。具體檢測(cè)操作按照相應(yīng)試劑盒的說(shuō)明進(jìn)行。

1.6 脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)量

每個(gè)組分別選擇12只個(gè)體的腹脂脂肪組織，使用Trizol試劑提取組織總RNA并檢測(cè)提取質(zhì)量。RNA提取質(zhì)量合格后，反轉(zhuǎn)錄生成cDNA作為熒光定量 PCR 的模板。本試驗(yàn)中 PPARγ、LPL、FABP4、FASN、ACC和CPT-1等基因的表達(dá)量被檢測(cè)，使用的特異性引物見(jiàn)表2。

表2 熒光定量PCR中使用的特異性引物

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

使用Excel 2007軟件對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，采用SPSS2.0統(tǒng)計(jì)軟件（One-Way ANOVA）進(jìn)行顯著性分析。試驗(yàn)結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg）對(duì)肉

雞生長(zhǎng)性能的影響

從表3可見(jiàn)，在相同初始體重的基礎(chǔ)上，試驗(yàn)組（有效含量為50 mg/kg）的最終出欄體重（結(jié)束體重）顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)組的平均日增重、平均日采食量、屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重、腹脂重等有所提高，但差異均不顯著（P＞0.05）；同時(shí)，試驗(yàn)組料肉比低于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）。

表3 日糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg）對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

對(duì)于相對(duì)重量而言，試驗(yàn)組飼糧中添加金霉素（終濃度50 mg/kg），肉雞屠體率顯著降低（P＜0.05），而腹脂率顯著升高（P＜0.05）；另外，試驗(yàn)組的半凈膛率、全凈膛率、腿肌率等略有降低，但差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2 日糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg）對(duì)肉雞采食量和血液生化指標(biāo)的影響

由圖1可以看出，日糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg），飼喂42 d后，較之對(duì)照組，試驗(yàn)組肉雞血液中甘油三酯（TG）和膽固醇（CHO）的含量顯著升高（P＜0.05）；此外，日糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg），可以提高肉雞平均日采食量，但無(wú)顯著差異（P＜0.05）（見(jiàn)圖2）。

2.3 日糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg）對(duì)肉雞腹脂脂肪組織中脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

圖3結(jié)果表明，較之對(duì)照組，金霉素（有效含量為50 mg/kg）添加組個(gè)體腹脂組織中相關(guān)脂肪合成和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)的PPARγ、LPL和FABP4基因的mRNA表達(dá)量顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）；然而，相關(guān)脂肪酸合成和脂肪酸分解的FASN、ACC、CPT-1基因的mRNA表達(dá)量在兩個(gè)組間沒(méi)有顯著差異。

圖1 日糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg）42 d后肉雞血液生化指標(biāo)的影響

圖2 日糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg）對(duì)肉雞日均采食量的影響

圖3 日糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg）對(duì)肉雞脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

3 討論

金霉素通過(guò)抑制環(huán)境中的病原微生物、降低腸壁厚度和促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)吸收等作用機(jī)理促進(jìn)肉仔雞的生長(zhǎng)(張日俊等，1998)，而在畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)過(guò)程中具有廣泛的應(yīng)用。但是肉雞通過(guò)采食飼料服用的金霉素，有較高比例以原形式隨排泄物排放至環(huán)境中，且不易被降解，而存在著較大環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)（王冉等，2009）。為了避免長(zhǎng)期飼喂而引發(fā)的畜禽產(chǎn)品中藥物殘留、機(jī)體抗藥性以及排放污染等問(wèn)題，本試驗(yàn)探討了在飼糧中添加金霉素對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能以及腹脂沉積等方面的影響，為肉雞養(yǎng)殖生產(chǎn)中金霉素等抗生素的替代使用與控制提供理論基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支持。

本試驗(yàn)結(jié)果也發(fā)現(xiàn)了金霉素具有促生長(zhǎng)的效果，但與以上的研究結(jié)果不完全一致：飼糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg），可以顯著提高肉雞的活體重（P＜0.05）；具有提高屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重等生產(chǎn)性能的趨勢(shì)，但沒(méi)有達(dá)到顯著差異的水平（P＞0.05）。對(duì)于肉雞的相對(duì)重量指標(biāo)，尤其是屠體率，飼喂金霉素（有效含量為50 mg/kg）后具有顯著的降低效應(yīng)（P＜0.05）。

腹脂是肉雞養(yǎng)屠宰中低價(jià)值的副產(chǎn)品，過(guò)多的腹脂產(chǎn)生會(huì)造成肉雞養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益的降低，同時(shí)造成環(huán)境污染。值得注意的是，本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg），能夠增加肉雞腹脂的沉積，并且顯著提高肉雞腹脂率，造成了屠宰性能的下降。為了進(jìn)一步證實(shí)這一結(jié)果，本試驗(yàn)從生化和分子水平上分別檢測(cè)了血液中甘油三酯和膽固醇含量、脂肪代謝相關(guān)基因的表達(dá)量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)金霉素（有效含量為50 mg/kg）添加組個(gè)體的血液中，甘油三酯和膽固醇的含量顯著增加（P＜0.05），同時(shí)腹脂組織中相關(guān)脂肪合成的PPARγ、LPL和FABP4等基因（Liu等，2017；Cui等，2018）的表達(dá)量顯著上調(diào)（P＜0.05或P＜0.01），與腹脂重增加具有一致的規(guī)律。證實(shí)了金霉素（有效含量為50 mg/kg）促進(jìn)肉雞腹脂沉積的這一結(jié)論，其原因可能是由于金霉素（有效含量為50 mg/kg）促進(jìn)了采食量的增加，誘導(dǎo)腹脂組織中PPARγ、LPL和FABP4等基因的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)了脂肪沉積的增加。

4 結(jié)論

飼糧中添加金霉素（有效含量為50 mg/kg）能夠促進(jìn)肉雞的生長(zhǎng)，顯著提高肉雞的活體重、腹脂率，降低了屠體率；對(duì)于促生長(zhǎng)性能而言，金霉素在促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)的同時(shí)，也具有屠宰性能低、產(chǎn)生過(guò)多腹脂造成經(jīng)濟(jì)效益降低等負(fù)面影響。