王 亮，張新憲，趙迎麗，張立新，王春生

（山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮研究所，山西 太原 030031）

山楂（Crataegus pinnatifida）屬于山楂屬（Crataegus L.），是一種經(jīng)濟(jì)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高的仁果類藥食兼?zhèn)涞纳系妊a(bǔ)品[1]。近年來(lái)，隨著山楂產(chǎn)業(yè)的迅猛發(fā)展，無(wú)論是鮮食還是作為原料果，均對(duì)山楂的品質(zhì)提出了更高的要求；然而實(shí)際生產(chǎn)中多以窯洞和普通商業(yè)冷庫(kù)為代表的傳統(tǒng)貯藏方式為主，由于貯藏設(shè)施與技術(shù)發(fā)展的相對(duì)滯后，不能從根本上解決山楂果實(shí)軟化、褐變乃至品質(zhì)劣變等主要問(wèn)題，導(dǎo)致山楂在貯藏過(guò)程中的品質(zhì)和商品價(jià)值大幅降低，嚴(yán)重制約著山楂產(chǎn)業(yè)的發(fā)展；因此尋找一種新的山楂貯藏保鮮方法至關(guān)重要。

冰溫貯藏是近年來(lái)興起的保鮮新技術(shù)，冰溫是指冰點(diǎn)以上、0 ℃以下的溫度區(qū)域，是機(jī)體凍結(jié)前的最低溫度帶，在該溫度區(qū)域下可使機(jī)體的生理活性降到最低程度，又能維持其正常的新陳代謝[2]，并可顯著抑制貯藏過(guò)程中微生物生長(zhǎng)、脂肪氧化及蛋白質(zhì)降解[3]。冰溫貯藏技術(shù)在‘紅富士’蘋果[4]、庫(kù)爾勒香梨[5]、‘玫瑰香’葡萄[6]、櫻桃[7]、獼猴桃[8]等水果的貯藏中效果良好。1-甲基環(huán)丙烯（1-methylcyclopropene，1-MCP）是一種新型乙烯受體抑制劑，在低濃度下可抑制乙烯生成，且在處理后的水果中未檢測(cè)到其殘留[9]，已經(jīng)在生產(chǎn)上得到較為廣泛的應(yīng)用。近年來(lái)研究人員對(duì)‘金冠’蘋果[10]、‘黃冠’梨[11]、酥梨[12]、藍(lán)莓[13]、獼猴桃[14]等多種水果進(jìn)行采后1-MCP處理研究；在乙烯吸收劑（ethylene absorbent，EA）應(yīng)用方面，Wang Siyao等[15]研究發(fā)現(xiàn)EA處理可抑制在0 ℃冷藏和貨架期藍(lán)莓果實(shí)的軟化，貯藏期可達(dá)30 d。但目前有關(guān)冰溫條件下比較1-MCP和EA二者對(duì)果實(shí)品質(zhì)影響的研究鮮有報(bào)道。

課題組在之前的研究中發(fā)現(xiàn)-1 ℃冰溫條件下結(jié)合0.02 mm微孔保鮮袋貯藏對(duì)山楂有較好的保鮮效果[16]。本研究在山楂果實(shí)冰溫貯藏基礎(chǔ)上，結(jié)合目前生產(chǎn)上廣泛使用的1-MCP乙烯受體阻斷劑和傳統(tǒng)EA 2 種乙烯抑制處理方式，進(jìn)行貯藏效果比較，通過(guò)對(duì)山楂果實(shí)冰溫貯藏期間生理品質(zhì)指標(biāo)以及組織微觀結(jié)構(gòu)進(jìn)行測(cè)定和比較分析，最終篩選出冰溫貯藏條件下更適合山楂果實(shí)的乙烯抑制處理方式及使用劑量，希望能夠有效延緩果實(shí)軟化與衰老，降低生理傷害，實(shí)現(xiàn)延長(zhǎng)果實(shí)貯藏與貨架壽命的目的，以期助力山楂產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

‘敞口’山楂于2015年9月21日采于山西省晉中市祁縣東觀鄉(xiāng)官?gòu)S村，選擇栽培管理規(guī)范、果實(shí)發(fā)育正常、病蟲害少的果園，采前10 d停止?jié)菜也烧?dāng)日無(wú)雨，采摘后當(dāng)天使用低溫冷藏車（（5.0±0.5）℃）運(yùn)回山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮研究所，挑選果型大小基本一致、無(wú)病蟲害、無(wú)機(jī)械傷、表面完全轉(zhuǎn)紅的八成熟果實(shí)為試材，果肉初始硬度為27.3 kg/cm2。

聚乙烯微孔保鮮袋（厚0.02 mm，規(guī)格為65 cm×70 cm的桶狀） 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮研究所；1-MCP（粉劑，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.14%） 美國(guó)羅門哈斯公司；EA（商品名為“高效乙烯去除劑”，高錳酸鉀純度10%，每袋10 g） 山西龍?zhí)锉ｕr技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司；所用化學(xué)試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

冰溫保鮮庫(kù) 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮研究所；Ultrospec 2000紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) 英國(guó)Pharmacia Biotech公司；PR-101α折光儀 日本ATAGO（愛(ài)拓）中國(guó)分公司；GXH-3051H果蔬呼吸測(cè)定儀北京均方理化科技研究所；GC-14C氣相色譜儀 日本島津公司；FT011硬度計(jì) 意大利TR公司。

1.3 方法

1.3.1 處理方法

實(shí)驗(yàn)分為普通冷藏組、冰溫貯藏組（冰溫貯藏對(duì)照組和4 個(gè)冰溫貯藏處理組），其中冰溫貯藏處理組包括0.5 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組、1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組、1 袋EA+冰溫貯藏處理組、2 袋EA+冰溫貯藏處理組，經(jīng)處理后的果實(shí)均在冰溫貯藏條件下進(jìn)行貯藏。

普通冷藏組和冰溫貯藏對(duì)照組：將山楂果實(shí)在冷庫(kù)預(yù)冷至0～1 ℃，每10 kg山楂果裝入襯有微孔保鮮袋的塑料周轉(zhuǎn)箱中預(yù)冷后，扎嚴(yán)袋口，普通冷藏組果實(shí)直接于（0.0±0.5）℃條件下貯藏；冰溫貯藏對(duì)照組果實(shí)在將山楂果實(shí)在冷庫(kù)預(yù)冷至0～1 ℃后，移入冰溫庫(kù)，庫(kù)溫穩(wěn)定至0 ℃后，每3 d下調(diào)庫(kù)溫0.1 ℃，當(dāng)果實(shí)溫度穩(wěn)定在-1.0 ℃時(shí)，進(jìn)行長(zhǎng)期貯藏。

1-MCP+冰溫貯藏處理組：將山楂果實(shí)置于透氣塑料周轉(zhuǎn)箱中，放于密閉箱體，20 ℃下在密閉箱體中分別使用0.5、1.0 μL/L 1-MCP對(duì)山楂果實(shí)熏蒸24 h，預(yù)冷至0～1℃后，每10 kg山楂果裝入襯有微孔保鮮袋的塑料周轉(zhuǎn)箱中，扎嚴(yán)袋口，再冰溫貯藏（操作與冰溫貯藏對(duì)照組處理一致）。

EA+冰溫貯藏處理組：將山楂果實(shí)預(yù)冷至0～1 ℃，每10 kg山楂果裝入襯有微孔保鮮袋的塑料周轉(zhuǎn)箱中，分別放入1袋和2袋EA后扎嚴(yán)袋口，再冰溫貯藏（操作與冰溫貯藏對(duì)照組處理一致）。

貯藏期間每30 d測(cè)定果實(shí)乙烯釋放量、呼吸強(qiáng)度、果肉硬度；每90 d測(cè)定果實(shí)中原果膠、可溶性果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)及黃酮類化合物、果皮花青素含量；在貯藏270 d時(shí)測(cè)定可溶性固形物、可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)及質(zhì)量損失率、褐變率和好果率，并對(duì)果皮、果肉顯微組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行電子顯微鏡觀察。

1.3.2 指標(biāo)測(cè)定

1.3.2.1 乙烯釋放速率、呼吸強(qiáng)度的測(cè)定

采用氣相色譜法測(cè)定乙烯釋放速率。每次將1 kg樣品置于真空干燥器內(nèi)，密閉2 h后使用注射器抽取干燥器中的氣體20 mL，用GC-14C氣相色譜儀（配備氫火焰離子化檢測(cè)器）測(cè)定乙烯含量。采用面積外標(biāo)法計(jì)算果實(shí)乙烯釋放速率，標(biāo)準(zhǔn)樣品的含量為50 μL/L。使用果蔬呼吸測(cè)定儀測(cè)定呼吸強(qiáng)度，單位為mg/（kg·h）。

1.3.2.2 硬度的測(cè)定

在每個(gè)果實(shí)中間最大橫徑處去皮，取4 個(gè)點(diǎn)采用硬度計(jì)測(cè)定硬度，為避免探頭與種子接觸，探頭打入果肉至硬度計(jì)的1/2進(jìn)果線處，單位為kg/cm2[17]。

1.3.2.3 原果膠和可溶性果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定

原果膠和可溶性果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定均采用咔唑比色法[18]。

1.3.2.4 黃酮類化合物含量的測(cè)定

采用鹽酸乙醇法測(cè)定黃酮類化合物含量[19]，取2 g果肉鮮樣勻漿后，用提取液（V（體積分?jǐn)?shù)95%乙醇）∶V（1.5 mol/L鹽酸）＝85∶15）定容至25 mL，暗處常溫下浸提24 h，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)在325 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以每克鮮質(zhì)量果肉吸光度（A325nm）表征黃酮類化合物含量。

1.3.2.5 果皮花青素含量的測(cè)定

取2 g果皮，使用FT011硬度計(jì)所帶削皮刀取樣，保證取樣厚度一致，用體積分?jǐn)?shù)1%鹽酸-甲醇溶液研磨后定容至25 mL，室溫暗處浸提24 h，常溫下4 000 r/min離心5 min，取上清液，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)在波長(zhǎng)530 nm和600 nm處測(cè)定吸光度，花青素含量由每克果皮組織在這2 個(gè)波長(zhǎng)處吸光度的差（A530nm-A600nm）表示[19]。

1.3.2.6 可溶性固形物、可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定

將山楂果肉與蒸餾水以質(zhì)量比1∶4，在組織搗碎機(jī)中打成勻漿，并將勻漿用濾紙進(jìn)行過(guò)濾后，采用折光儀進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果的5 倍即為山楂果實(shí)的可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

采用酸堿滴定法測(cè)定可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)[20]，取10 g山楂果肉勻漿，蒸餾水定容至100 mL，取10 mL濾液，用0.1 mol/L NaOH溶液進(jìn)行滴定（酚酞為指示液）。

1.3.2.7 果肉褐變率、質(zhì)量損失率、好果率的測(cè)定

在各處理中取樣2 kg進(jìn)行解剖，統(tǒng)計(jì)橫剖面褐變的果實(shí)個(gè)數(shù)，按公式（1）計(jì)算果實(shí)褐變率，并按公式（2）、（3）分別計(jì)算果實(shí)的質(zhì)量損失率和好果率，以發(fā)生褐變、腐爛和硬度過(guò)低（果肉硬度≤10kg/cm2）的果實(shí)定義為失去商品性的果實(shí)。

1.3.2.8 果皮、果肉微觀結(jié)構(gòu)觀察

將不同處理組的山楂分別切取厚度為2 mm左右的外皮層和果肉，將取下的樣品迅速放到體積分?jǐn)?shù)3%戊二醛固定液（0.1 mol/L、pH 7.2磷酸鹽緩沖液配制）中，然后4 ℃固定6 h。用相應(yīng)的緩沖液洗滌3 次，每次15 min，體積分?jǐn)?shù)30%、50%、70%、80%、90%、95%乙醇溶液逐級(jí)脫水，每級(jí)15 min，無(wú)水乙醇脫水2 次，每次20 min，然后叔丁醇置換，用JEOL JFD-320冷凍干燥儀進(jìn)行冷凍干燥，把干燥后的材料用導(dǎo)電膠帶粘在樣品臺(tái)上，用JEOL JFC-1600離子濺射鍍膜儀噴鍍鉑金，噴鍍好的材料放入掃描電子顯微鏡下進(jìn)行形態(tài)觀察。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS 20.0軟件的Duncan法進(jìn)行顯著性分析，采用Excel 2007軟件制圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對(duì)山楂果實(shí)貯藏過(guò)程中乙烯釋放速率及呼吸強(qiáng)度的影響

圖1 不同處理對(duì)山楂果實(shí)貯藏過(guò)程中乙烯釋放速率（A）及呼吸強(qiáng)度（B）的影響Fig.1 Effects of different treatments on ethylene production rate (A)and respiration intensity (B) of hawthorn fruits during storage

果實(shí)乙烯釋放速率與呼吸強(qiáng)度是反映果實(shí)采后生理代謝水平的重要指標(biāo)。如圖1A所示，在0～120 d各處理組山楂果實(shí)乙烯釋放速率始終處于較低水平，在150 d后呈先升高后降低趨勢(shì)。在貯藏210 d時(shí)，1.0 μL/L 1-MCP處理組出現(xiàn)高峰，值為3.85 μL/（kg·h），低于其他處理組峰值；而其他處理組乙烯釋放速率峰值均在貯藏180 d時(shí)出現(xiàn)，其中普通冷藏處理組峰值最高，為6.85 μL/（kg·h）。說(shuō)明1.0 μL/L 1-MCP處理+冰溫貯藏不僅降低了貯藏過(guò)程中果實(shí)的乙烯釋放速率，還推后了乙烯釋放速率峰值的出現(xiàn)。由圖1B可知，0～150 d各處理組中山楂果實(shí)呼吸強(qiáng)度在貯藏初期下降后，30～150 d期間一直處于較低水平；除1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組果實(shí)呼吸高峰在210 d出現(xiàn)外，其余處理組呼吸高峰均在180 d出現(xiàn)。說(shuō)明1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏較其他處理可明顯抑制山楂果實(shí)的呼吸代謝速率，并推遲呼吸高峰的出現(xiàn)，延緩山楂果實(shí)的衰老進(jìn)程。此外，各冰溫貯藏組中山楂果實(shí)呼吸代謝速率始終低于普通冷藏組，說(shuō)明冰溫處理能降低果實(shí)呼吸代謝速率。

2.2 不同處理對(duì)山楂貯藏過(guò)程中果肉硬度的影響

圖2 不同處理對(duì)山楂貯藏過(guò)程中果肉硬度的影響Fig.2 Effect of different treatments on flesh firmness of hawthorn fruits during storage

如圖2所示，山楂果肉硬度在貯藏期間總體呈下降趨勢(shì)，冰溫貯藏各處理組中山楂果肉硬度下降速率相對(duì)普通冷藏組均被明顯抑制，其中1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組果實(shí)果肉硬度下降最為緩慢，貯藏270 d時(shí)，果肉硬度仍能維持在14.50 kg/cm2，高于其他處理組。2 袋EA+冰溫貯藏處理組果肉硬度僅次于1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組，270 d后果肉硬度為11.30 kg/cm2。通過(guò)2 種抑制乙烯生成的方式比較，可以看出，在貯藏前150 d，1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組與2 袋EA+冰溫貯藏處理組對(duì)維持果實(shí)硬度效果差異不明顯，但在貯藏后期1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理比2 袋EA+冰溫貯藏處理效果持續(xù)性較好，這可能與1-MCP和EA對(duì)乙烯抑制作用機(jī)理不同有關(guān)。

2.3 不同處理對(duì)山楂貯藏過(guò)程中果肉中果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響

圖3 不同處理對(duì)山楂貯藏過(guò)程中原果膠（A）和可溶性果膠（B）質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響Fig.3 Effect of different treatments on protopectin (A) and soluble pectin (B) contents in hawthorn fruits during storage

在整個(gè)貯藏過(guò)程中，原果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)（圖3A），而可溶性果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)逐漸上升（圖3B），且各處理組中山楂果實(shí)原果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)與可溶性果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系；說(shuō)明隨山楂果肉硬度的下降，原果膠被降解生成可溶性果膠。貯藏270 d時(shí)，與其他處理組相比，普通冷藏組原果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)下降和可溶性果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)上升速率更快，說(shuō)明相比普通冷藏，冰溫貯藏可明顯抑制原果膠向可溶性果膠轉(zhuǎn)化的速率。本研究中，冰溫結(jié)合經(jīng)乙烯抑制處理效果明顯好于單獨(dú)使用冰溫貯藏，且在貯藏前180 d，1-MCP、EA處理組之間原果膠和可溶性果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)差異不顯著（P＞0.05）；貯藏270 d時(shí)，1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組中的原果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于2 袋EA+冰溫貯藏處理組，而可溶性果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)則低于2 袋EA+冰溫貯藏處理組（P＜0.05），說(shuō)明1.0 μL/L 1-MCP處理抑制冰溫貯藏的山楂果實(shí)中原果膠向可溶性果膠轉(zhuǎn)化效果更加顯著，可有效減緩山楂果肉硬度的下降速率，保持良好的貯藏品質(zhì)。

2.4 不同處理對(duì)山楂貯藏過(guò)程中果肉黃酮類化合物和果皮花青素含量的影響

圖4 不同處理對(duì)山楂貯藏過(guò)程中黃酮類化合物（A）和果皮花青素（B）含量的影響Fig.4 Effect of different treatments on flavonoid (A) and anthocyanin of peel (B) contents in hawthorn fruits during storage

黃酮類化合物與果皮花青素是山楂果實(shí)中的重要生物活性物質(zhì)，含量高低直接反映山楂貯藏品質(zhì)的優(yōu)劣。如圖4A所示，在貯藏過(guò)程中山楂果實(shí)中黃酮類化合物含量呈先升后降的趨勢(shì)，這可能是山楂果實(shí)后熟作用的結(jié)果。其中普通冷藏組、冰溫貯藏對(duì)照組和0.5 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組果實(shí)的黃酮類化合物含量在貯藏90 d時(shí)達(dá)到最大值；而1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組、1 袋EA+冰溫貯藏處理組、2 袋EA+冰溫貯藏處理組在貯藏180 d達(dá)到最大值。其中貯藏270 d時(shí)，1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組山楂果實(shí)黃酮類化合物的含量顯著高于其他處理組（P＜0.05），說(shuō)明1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理有效減緩了山楂果肉中黃酮類化合物的降解速率。

由圖4B可知，在貯藏過(guò)程中，不同處理組中山楂果皮花青素含量呈逐漸上升趨勢(shì)，可見(jiàn)山楂果實(shí)中的花青素含量也可作為判斷山楂果實(shí)成熟衰老的指標(biāo)之一。其中1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組山楂果皮花青素含量始終低于普通冷藏和其他冰溫貯藏組，說(shuō)明該處理可有效抑制山楂果實(shí)因成熟衰老引起的花青素積累。

2.5 不同處理對(duì)山楂果實(shí)貯藏品質(zhì)的影響

表1 貯藏結(jié)束時(shí)不同處理中山楂果實(shí)的品質(zhì)指標(biāo)Table1 Quality indices of hawthorn fruits subjected to different treatments after storage%

經(jīng)測(cè)定，山楂果實(shí)的初始可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)和可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為16.20%、2.89%（表中未列出）。如表1所示，與貯藏前相比，貯藏270 d后果實(shí)可溶性固形物、可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)以及好果率均下降，而質(zhì)量損失率和褐變率則上升。其中1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組的山楂果實(shí)在貯藏270 d時(shí)，可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)、可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)和好果率均高于普通冷藏及其他冰溫貯藏組，而質(zhì)量損失率和褐變率均低于普通冷藏與其他冰溫貯藏組。

圖5 貯藏結(jié)束后不同處理組山楂的果肉表觀色澤Fig.5 Flesh color of hawthorn fruits with different treatments at the end of storage

由圖5可看出，不同處理中山楂果肉色澤存在差異，其中冰溫條件下結(jié)合使用1-MCP和EA處理可有效抑制果肉色澤褐變，有利于山楂果實(shí)貯藏品質(zhì)提升。通過(guò)肉眼觀察，各處理組山楂果肉褐變程度從高到低排序?yàn)椋浩胀ɡ洳兀? 袋EA+冰溫貯藏＞2 袋EA+冰溫貯藏＞0.5 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏＞1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏?？芍庇^看出1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理抑制果肉褐變效果更佳。

2.6 不同處理對(duì)山楂果皮和果肉微觀結(jié)構(gòu)的影響

圖6 貯藏前后山楂果實(shí)的表皮組織結(jié)構(gòu)Fig.6 Epidermal tissue of hawthorn fruits before and after storage

圖7 貯藏前后山楂果實(shí)果肉組織結(jié)構(gòu)Fig.7 Flesh tissue of hawthorn fruits before and after storage

植物細(xì)胞的細(xì)胞壁與細(xì)胞的生長(zhǎng)、發(fā)育、分化以及物質(zhì)代謝密切相關(guān)，它既構(gòu)成細(xì)胞結(jié)構(gòu)骨架，同時(shí)還參與細(xì)胞大部分的生理活動(dòng)。相關(guān)研究表明，細(xì)胞壁胞間層結(jié)構(gòu)的改變會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞壁物質(zhì)降解、細(xì)胞分離，進(jìn)而破壞細(xì)胞壁總體結(jié)構(gòu)而引發(fā)果實(shí)變軟。由圖6A1、B1可以看出，采摘預(yù)冷后的新鮮山楂，果皮平滑，果點(diǎn)邊緣規(guī)則；而經(jīng)過(guò)270 d貯藏后，普通冷藏組（圖6A2、B2）果實(shí)表皮出現(xiàn)褶皺起伏，果點(diǎn)邊緣開(kāi)裂嚴(yán)重，說(shuō)明果實(shí)失水較為嚴(yán)重；由圖7A1、B1看出，采摘預(yù)冷后的新鮮山楂果肉組織結(jié)構(gòu)整齊、規(guī)則、致密，反映出較好的新鮮度。而普通冷藏組（圖7A2、B2）山楂果肉組織結(jié)構(gòu)松散，細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)出現(xiàn)許多不規(guī)則空腔和孔洞，組織結(jié)構(gòu)均勻性差；這可能是貯藏期間果實(shí)自身衰老和組成結(jié)構(gòu)物質(zhì)消耗導(dǎo)致微觀形態(tài)的改變，從另一方面印證了果肉硬度、果實(shí)新鮮度下降的原因。

由圖6A3、B3和圖7A3、B3可知，1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組的山楂果實(shí)在貯藏結(jié)束后，表皮未出現(xiàn)褶皺，果實(shí)表皮果點(diǎn)相對(duì)采收時(shí)邊緣略有開(kāi)裂，相對(duì)普通冷藏組，果肉組織所出現(xiàn)的空腔孔洞相對(duì)較少，結(jié)構(gòu)變化較小；說(shuō)明1-MCP處理結(jié)合冰溫貯藏有效抑制了山楂果實(shí)失水以及果肉組織內(nèi)有關(guān)結(jié)構(gòu)物質(zhì)的降解，較好地保持了山楂果實(shí)質(zhì)地。

3 討 論

從果實(shí)的呼吸強(qiáng)度和乙烯釋放速率的趨勢(shì)變化可以看出，‘敞口’山楂屬典型的呼吸躍變型果實(shí)；1-MCP已被證明對(duì)呼吸躍變型果實(shí)比較有效[21]。本研究發(fā)現(xiàn)，-1.0 ℃的冰溫條件下，1-MCP和EA處理對(duì)‘敞口’山楂果實(shí)呼吸代謝、果肉軟化均有抑制作用，比單獨(dú)使用冰溫貯藏方式效果更佳；說(shuō)明冰溫貯藏與1-MCP、EA結(jié)合使用產(chǎn)生保鮮效果的協(xié)同效應(yīng)。Bai Xiaohang等[22]發(fā)現(xiàn)促進(jìn)保鮮配方和1-MCP的聯(lián)合處理比單獨(dú)使用1-MCP更有利于延緩甜瓜成熟和衰老，保持果實(shí)品質(zhì)，延長(zhǎng)保質(zhì)期，提高芳香揮發(fā)性化合物的水平；Lu Xingang等[23]發(fā)現(xiàn)1-MCP與Ca處理相結(jié)合，對(duì)‘紅富士’蘋果果實(shí)的香氣形成和軟化抑制具有協(xié)同作用，從而能提高其感官品質(zhì)。在本研究中，1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理的保鮮效果顯著優(yōu)于其他處理，不僅降低了呼吸強(qiáng)度和乙烯釋放速率高峰值，還能推遲其出現(xiàn)。1-MCP與EA的抑制乙烯作用機(jī)理不同，1-MCP是通過(guò)與乙烯競(jìng)爭(zhēng)受體，并與之緊密結(jié)合，阻斷乙烯與受體的正常結(jié)合，從而有效地阻止內(nèi)源乙烯的合成和外源乙烯的誘導(dǎo)作用，主要是通過(guò)抑制果實(shí)乙烯生成系統(tǒng)II的乙烯合成來(lái)實(shí)現(xiàn)的[24]，該作用一旦起效后，即使解除外界1-MCP氣體環(huán)境，其抑制乙烯效果仍然持續(xù)穩(wěn)定；而乙烯吸收劑是通過(guò)化學(xué)氧化反應(yīng)來(lái)吸收果實(shí)自身產(chǎn)生的乙烯氣體，從而降低貯藏環(huán)境中乙烯的含量，達(dá)到抑制果實(shí)代謝速率的目的；在使用過(guò)程中，隨著反應(yīng)的進(jìn)行有效成分不斷減少，吸收和氧化能力不斷衰減，進(jìn)而導(dǎo)致貯藏后期的乙烯抑制效果不佳的情況發(fā)生。

貯藏期間果實(shí)中黃酮類化合物含量呈先升后降趨勢(shì)，而果皮花青素含量則隨果實(shí)后熟衰老逐漸增加，其中1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理較其他處理可明顯抑制果實(shí)中黃酮類化合物的減少以及果皮花青素含量的上升，表現(xiàn)出較好的保鮮效果。在Park等[25]對(duì)EA和1-MCP對(duì)番茄影響的研究中，2 μL/L 1-MCP比1 μL/L 1-MCP的處理對(duì)推遲番茄果實(shí)轉(zhuǎn)紅更有效，EA處理不及2 μL/L 1-MCP處理保鮮效果顯著，與本研究中1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理能有效抑制山楂果皮中花青素含量的上升，EA不及1-MCP（1.0 μL/L）處理效果明顯的研究結(jié)果相似。此外，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，各處理組果肉硬度下降，原果膠降解轉(zhuǎn)化為可溶性果膠，山楂果肉硬度與果實(shí)中原果膠含量呈正相關(guān)，而與可溶性果膠含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，結(jié)合果皮與果肉顯微組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)空腔與空洞的變化情況，從另一方面闡述了1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理能更有效抑制果肉軟化的機(jī)理；這與使用1-MCP處理甜瓜[26]、番木瓜[27]、蘋果[28]和‘巴特利特’梨[29]等研究結(jié)果相一致?？梢?jiàn)1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理可以有效抑制山楂果實(shí)采后軟化現(xiàn)象的發(fā)生，并較好地維持果實(shí)組織的新鮮質(zhì)地。

研究發(fā)現(xiàn)，果實(shí)衰老和環(huán)境脅迫造成的生理性傷害是造成采后山楂果肉褐變的主要因素[16]。在本研究中山楂果實(shí)在冰溫的低溫脅迫條件下，并未造成山楂果實(shí)生理傷害導(dǎo)致的褐變率上升。1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理組山楂果實(shí)的褐變率最低，僅為3.05%，說(shuō)明該處理對(duì)抑制山楂果肉褐變效果非常顯著，這與Chen Yuan等[30]發(fā)現(xiàn)1-MCP在非生物脅迫條件下，可有效延緩棉花植株葉片衰老的研究結(jié)果相似。進(jìn)一步說(shuō)明，1.0 μL/L 1-MCP+冰溫貯藏處理是延緩貯藏期間山楂果肉褐變切實(shí)可行的保鮮方式。

4 結(jié) 論

1.0 μL/L 1-MCP處理結(jié)合冰溫貯藏能有效抑制山楂果實(shí)乙烯釋放速率及呼吸強(qiáng)度，且推遲了二者峰值的出現(xiàn)；減緩了原果膠向可溶性果膠的轉(zhuǎn)化速率，較好地維持了果肉硬度，并減緩了山楂果實(shí)失水以及果肉組織內(nèi)有關(guān)結(jié)構(gòu)物質(zhì)的降解，較好地維持了山楂果實(shí)采后果肉質(zhì)地與色澤；降低了果肉中黃酮類化合物降解和果皮花色苷含量上升速率；有效抑制了果實(shí)中可溶性固形物和可滴定酸的損失，減小了果實(shí)質(zhì)量損失率和褐變率，較好地維持了山楂果實(shí)良好的貯藏品質(zhì)。可見(jiàn)，1.0 μL/L 1-MCP處理結(jié)合-1.0 ℃冰溫貯藏是‘敞口’山楂長(zhǎng)期高品質(zhì)貯藏的綜合保鮮技術(shù)。