■溫 琦 格日樂瑪 閆素梅

(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018)

阿爾巴斯白絨山羊是世界著名的絨肉兼用型品種。但是近年來，隨著羊絨價格不斷下降和羊肉需求量不斷提高，使得羊肉生產(chǎn)成為飼養(yǎng)絨山羊新的經(jīng)濟(jì)增長點(diǎn)。另一方面，在正常的絨山羊生產(chǎn)中，每年有30%左右的成年母羊被淘汰作為肉用，成為羊肉生產(chǎn)的重要來源。然而，傳統(tǒng)的天然放牧育肥使得草場生態(tài)受到了嚴(yán)重破壞。因此，改變傳統(tǒng)的飼養(yǎng)方式，對淘汰羊?qū)嵤┒唐诘纳犸曈食蔀榱四壳爸饕挠史绞剑@也是保證絨山羊產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要途徑。消化道酶活性可間接反映動物對飼糧營養(yǎng)物質(zhì)的消化程度，與其生長育肥性能和屠宰性能密切相關(guān)。課題組前期研究了放牧育肥與舍飼TMR育肥對絨山羊母羊營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與放牧育肥相比，舍飼育肥顯著提高母羊營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率，這可能與兩組羊的腸道消化酶活性不同有關(guān)。因此，本試驗(yàn)主要研究不同育肥方式[自然放牧育肥（NG）和TMR育肥（TMR）]下阿爾巴斯白絨山羊母羊消化道酶活性的變化規(guī)律，研究結(jié)果為深入研究絨山羊消化生理機(jī)制、制定絨山羊舍飼育肥方案提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計與日糧

試驗(yàn)在內(nèi)蒙古白絨山羊種羊場進(jìn)行，采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計，變量是育肥方式，即NG和TMR。從淘汰的成年母羊群中選擇年齡、體重相近的5歲成年母羊60只隨機(jī)分為兩組，每組30只，一組圈養(yǎng)飼喂TMR，即TMR組，參照《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 816-2004）配制TMR，每天飼喂2次，上、下午各1次。預(yù)飼期15 d，正式育肥期60 d，分為育肥前期(1～30 d，8月份)和育肥后期(31～60 d，9月份)兩個階段，育肥前期和后期每天每只羊飼喂的風(fēng)干料量分別為2.06 kg和2.19 kg，自由采食，自由飲水。TMR組成及營養(yǎng)水平見表1；另一組按照原場的飼喂方式在天然草場放牧，即NG組，每天上午7：00出牧，下午6：00歸牧，采食的牧草營養(yǎng)水平見表2。

表1 TMR組母羊日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

表2 自然放牧組母羊采食牧草營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.2 樣品的采集與處理

1.2.1 樣品的采集

育肥試驗(yàn)結(jié)束時，分別從每組母羊中隨機(jī)選取6只母羊禁食24 h、禁水2 h后進(jìn)行屠宰。在頸靜脈處放血處死、立即打開腹腔、取出內(nèi)臟，在冰盤上小心剝除胰腺的脂肪組織和結(jié)締組織后用錫箔紙包好，立即放入液氮中冷凍。同時參考《家畜解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)》迅速在冰盤上剪取十二指腸、空腸、回腸各腸段約7 cm左右，并用預(yù)冷的生理鹽水將各腸段上的食糜沖洗干凈，用錫箔紙包好放入液氮中快速冷凍。所有樣品轉(zhuǎn)入-20℃低溫凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 樣品的處理

1.2.2.1 小腸黏膜的處理

將冷凍的組織樣品置于4℃冰箱中，待樣品完全解凍后放在保鮮膜上沿腸壁縱向剪開，用載玻片刮下黏膜。準(zhǔn)確稱取腸黏膜的重量，按質(zhì)量體積比1∶9的比例加入勻漿介質(zhì)在玻璃勻漿器中勻漿(整個操作過程都在冰浴條件下進(jìn)行)。充分勻漿后將勻漿液倒入離心管中，3 000 r/min 4℃條件下離心10 min，收集上清并迅速將上清液分裝成若干份貯存于-20℃中，以備進(jìn)行酶活性分析。

1.2.2.2 胰腺的處理

將冷凍的胰臟置于4℃冰箱中解凍，待樣品將要完全解凍時從頭、體、尾三個部位剪取約0.5 g左右的胰腺，并用分析天平準(zhǔn)確稱重。按質(zhì)量體積比1∶9的比例加入勻漿介質(zhì)在玻璃勻漿器中勻漿(整個操作過程都在冰浴條件下進(jìn)行)。充分勻漿后將勻漿液倒入離心管中3 000 r/min 4℃條件下離心10 min，收集上清并迅速將上清液分裝成若干份貯存于-20℃中，以備進(jìn)行酶活性分析。

1.3 測定指標(biāo)及方法

1.3.1 測定指標(biāo)

十二指腸、空腸、回腸、胰腺的淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性；十二指腸的糜蛋白酶活性。

1.3.2 測定方法

測試方法參照南京建成生物工程研究所提供的淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶及糜蛋白酶測試盒說明書進(jìn)行。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 9.0軟件的統(tǒng)計程序進(jìn)行T檢驗(yàn)分析，統(tǒng)計結(jié)果P＜0.01表示組間差異極顯著，P＜0.05表示組間差異顯著，0.05≤P＜0.10表示組間差異趨于顯著。

2 結(jié)果

2.1 淀粉酶活性（見表3）

表3 不同育肥方式對母羊小腸及胰腺淀粉酶活性的影響(U/mg prot.)

從表3可以看出，不同育肥方式對母羊小腸淀粉酶活性無顯著性影響，但對于胰腺淀粉酶活性有顯著的影響。TMR組母羊胰腺淀粉酶活性顯著高于NG組母羊（P=0.02）；十二指腸、空腸及回腸淀粉酶活性略高于NG組，但是差異不顯著（P=0.48、P=0.65、P=0.77）。

2.2 脂肪酶活性（見表4）

表4可以看出，TMR組母羊十二指腸和空腸脂肪酶活性顯著高于NG組母羊（P=0.04，P=0.02）；回腸和胰腺脂肪酶活性略高于NG組母羊，但是差異不顯著（P=0.73，P=0.52）。

表4 不同育肥方式對母羊小腸及胰腺脂肪酶活性的影響(U/mg prot.)

2.3 胰蛋白酶活性（見表5）

表5 不同育肥方式對母羊小腸及胰腺胰蛋白酶活性的影響(U/mg prot.)

表5顯示了不同育肥條件下母羊小腸及胰腺的胰蛋白酶活性。表5結(jié)果可見，TMR組母羊十二指腸和胰腺胰蛋白酶活性顯著高于NG組母羊（P=0.003、P=0.02）；回腸胰蛋白酶活性有高于NG組母羊的趨勢（P=0.08）；空腸胰蛋白酶活性略高于NG組母羊，但差異不顯著（P=0.46）。

2.4 糜蛋白酶活性（見表6）

表6 不同育肥方式對母羊十二指腸糜蛋白酶活性的影響(U/mg prot.)

從表6可以看出，TMR組母羊十二指腸糜蛋白酶活性顯著高于NG組母羊（P=0.009）。

3 討論

小腸是動物機(jī)體的主要消化吸收部位，小腸消化酶活性直接影響動物的營養(yǎng)物質(zhì)消化率。因此，消化酶活性水平的高低直接反映機(jī)體對飼糧營養(yǎng)物質(zhì)消化利用程度。影響小腸消化酶活性的因素有很多，其中主要有品種、年齡、飼糧組成、小腸部位及腸道內(nèi)環(huán)境等。育肥方式是影響飼糧組成的主要因素，而飼糧組成又決定了動物飼糧的營養(yǎng)水平。本試驗(yàn)研究了NG與TMR兩種育肥方式對阿爾巴斯絨山羊成年母羊小腸及胰腺主要消化酶活性的影響，結(jié)果表明，TMR育肥可顯著提高母羊十二指腸胰蛋白酶、糜蛋白酶和脂肪酶活性，空腸脂肪酶活性，胰腺淀粉酶和胰蛋白酶活性(P＜0.05)；對母羊回腸胰蛋白酶活性有提高的趨勢（P=0.08）。這說明育肥方式可影響成年母羊小腸及胰腺的酶活性，這可能與兩種育肥方式下動物采食的飼糧營養(yǎng)水平不同有關(guān)。TMR組TMR的蛋白質(zhì)和能量的營養(yǎng)水平均高于NG組（1～30 d兩組蛋白水平接近）。王寶山與劉月琴等研究發(fā)現(xiàn)，小尾寒羊小腸內(nèi)的淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性隨飼糧中粗蛋白質(zhì)含量的增加而增加。仁瑞清等研究結(jié)果得出，與飼喂低能量水平的開食料相比，飼喂能量水平較高的開食料可增加犢牛小腸各段及胰腺內(nèi)脂肪酶、胰蛋白酶和十二指腸糜蛋白酶的活性。這些研究結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果相似，進(jìn)一步說明了動物消化道酶活性受飼糧組成及營養(yǎng)水平的影響。

本試驗(yàn)中，與NG育肥相比，TMR育肥略微增加了母羊的小腸淀粉酶活性，這可能與它們的日糧組成及采食量有關(guān)。其中，十二指腸的淀粉酶活性值高于空腸、回腸和胰腺。小腸內(nèi)容物中的淀粉酶主要由胰腺分泌的，然而，飼喂1 h內(nèi)胰腺分泌的淀粉酶到最高值（徐明，2007；John等，1999）。本試驗(yàn)是在進(jìn)食24 h、進(jìn)水2 h后屠宰的，可能屠宰時胰腺中分泌的淀粉酶已充分流經(jīng)十二指腸，但未大量流至回腸段，且回腸段之前留存的食糜已經(jīng)基本排空，故造成了十二指腸段淀粉酶活性比空腸和回腸段高的現(xiàn)象。因此可以推斷，屠宰前停止飼喂時間對淀粉酶活性有一定的影響，具體作用機(jī)理還需要進(jìn)一步探討。另一方面，TMR組母羊胰腺淀粉酶活性顯著高于NG組母羊，這可能是因?yàn)門MR的淀粉水平高于牧草的原因。

日糧脂肪消化依賴于胃腸道脂肪酶及胰腺脂肪酶活性。研究發(fā)現(xiàn)，日糧中粗脂肪含量的增加可以提高體內(nèi)小腸消化酶中脂肪酶的活力。本試驗(yàn)中，TMR組母羊日糧粗脂肪含量高于放牧母羊，這也是引起TMR組母羊的十二指腸和空腸胰腺脂肪酶活性顯著高于NG組母羊，回腸脂肪酶活性趨于顯著高于NG組的主要原因。此外，本試驗(yàn)結(jié)果也指出，各部位脂肪酶活性從大到小排序依次為胰腺、回腸、空腸、十二指腸，提示脂肪在小腸后段被消化，與劉月琴等（2004）結(jié)果一致。

小腸胰蛋白酶、糜蛋白酶是日糧蛋白質(zhì)的主要分解酶。本試驗(yàn)TMR組母羊的日糧蛋白水平高于NG組母羊，這是導(dǎo)致本試驗(yàn)結(jié)果TMR組母羊十二指腸胰蛋白酶和糜蛋白酶活性顯著高于NG組母羊，空腸和回腸胰蛋白酶活性值略高于放牧母羊的主要原因。本試驗(yàn)結(jié)果與Mourot等（1979）和Simoes-Nunes（1986）一致。此外，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，十二指腸胰蛋白酶活性最高，其次空腸，最后是回腸。這些結(jié)果提示日糧蛋白質(zhì)主要在小腸前段消化。

4 結(jié)論

與NG育肥相比，TMR育肥可以提高絨山羊成年母羊小腸和胰腺的消化酶活性。