乎寶力格,蘇日古嘎,高玉峰
(內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院,內(nèi)蒙古 通遼 028007)
引起失眠的原因有很多,主要是大腦正常的興奮和抑制過(guò)程失調(diào)。如環(huán)境因素、個(gè)體因素、軀體因素、精神因素、情緒因素、藥物因素等都可以通過(guò)影響大腦正常的興奮和抑制過(guò)程從而導(dǎo)致失眠[1-5]。蒙醫(yī)灸療法作為蒙醫(yī)傳統(tǒng)療法之一,在治療失眠癥方面有它獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)及發(fā)展前景。蒙醫(yī)學(xué)認(rèn)為引起疾病最根本的原因是三根(赫依、希拉、巴達(dá)干)失去平衡。正常情況下,三根互相制約,互相依存保持機(jī)體的平衡,任何一方出現(xiàn)偏盛或偏衰必會(huì)導(dǎo)致反常變化,引起疾病的發(fā)生。蒙醫(yī)理論認(rèn)為失眠癥的病因有外因和內(nèi)因,外因系勞逸失調(diào)、思慮太過(guò)、驚嚇、失血等,內(nèi)因系赫依琪素紊亂累及心臟白脈受累,機(jī)體在4個(gè)發(fā)病條件的作用下,赫依希日紊亂累及心臟、腎臟或赫依琪素紊亂累及白脈從而引起失眠,因此大多屬赫依病范疇。而蒙醫(yī)灸療法則是鎮(zhèn)赫依之邪,抑制赫依病擴(kuò)散之良方。前期研究已表明[6-9],施灸赫依三穴可改善睡眠紊亂模型大鼠睡眠,可降低中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)重要的神經(jīng)遞質(zhì)NO與NOS的活性。
研究表示,5-HT的減少是引起失眠的又一主要原因之一,表明5-HT是睡眠發(fā)生和維持所必須的,有重要調(diào)節(jié)睡眠的作用[10-11]。筆者在前期研究基礎(chǔ)上觀察施灸赫依三穴對(duì)失眠大鼠行為學(xué)變化及腦干內(nèi)5-HT的影響,進(jìn)一步探討其治療失眠的作用機(jī)制。
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇健康雄性SD大鼠60只,體質(zhì)量(200±10)g,全部大鼠均由沈陽(yáng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào):(SXSK(遼)2015-0001)。
1.2 試劑及儀器 ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀購(gòu)自北京智鼠多寶生物科技有限責(zé)任公司,AUW120D型島津電子天平(日本島津),對(duì)氯苯丙氨酸(PCPA)購(gòu)自北京環(huán)亞太克生物醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司,5-HT對(duì)照品購(gòu)自美國(guó)Sigma公司,艾灸貼購(gòu)自蘇州東方艾絨廠。
1.3 造模方法 本實(shí)驗(yàn)采用對(duì)氯苯丙氨酸造模法[12]。將PCPA用生理鹽水配置成混懸液(45 mg/100 g),腹腔注射PCPA混懸液(1 mg/100 g),1次/d,連續(xù)注射2 d。大鼠出現(xiàn)活動(dòng)明顯頻繁、對(duì)外界的聲、光等刺激異常敏感,興奮性增高,晝伏夜出節(jié)律消失等,表明造模成功。
1.4 分組及處理方法 將60只SD雄性大鼠隨機(jī)分為6組,即正常組、模型組、安定組、頂會(huì)穴組、赫依穴組、黑白際穴組,每組10只。正常組:大鼠腹腔注射0.9%氯化鈉溶液(1 mL/100 g),1次/d,連續(xù)注射2 d;與治療組相同的抓取、固定,不做任何治療,連續(xù)7 d。 模型組:造模成功后同灸療組一樣抓取,固定。安定組:造模成功后,將安定(地西泮)注射液,0.92 mg/kg,1次/d,連續(xù)灌胃7 d。頂會(huì)穴組:造模成功后施灸大鼠“頂會(huì)穴”,每日施灸1次,連續(xù)7 d。赫依穴組:造模成功后施灸大鼠“赫依穴”,每日施灸1次,連續(xù)7 d。黑白際穴組:造模成功后施灸大鼠“黑白際穴”,每日施灸1次,連續(xù)7 d。
1.5 觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法
1.5.1 轉(zhuǎn)棒平衡實(shí)驗(yàn)[13]實(shí)驗(yàn)裝置為單頭固定的水平直棒。先將疲勞轉(zhuǎn)棒儀調(diào)整到訓(xùn)練狀態(tài),讓各組大鼠適應(yīng),再將疲勞轉(zhuǎn)棒儀調(diào)到20 r/min,當(dāng)直棒轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí),將大鼠放在轉(zhuǎn)棒上,記錄大鼠在轉(zhuǎn)棒上持續(xù)不落降的時(shí)間,每只大鼠重復(fù)測(cè)定3次,取平均值。
1.5.2 大鼠腦干中5-HT含量測(cè)定 將大鼠快速斷頭處死,冰上迅速取大腦干稱重,- 80 ℃冰箱保存待測(cè)。
2.1 各組大鼠轉(zhuǎn)棒平衡實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果 見(jiàn)表1。與正常組相比,模型組大鼠在轉(zhuǎn)棒上維持時(shí)間縮短(P<0.05)。與模型組比較,安定組、赫依穴組、頂會(huì)穴組和黑白際穴組大鼠在轉(zhuǎn)棒上維持時(shí)間延長(zhǎng)(P<0.05)。
2.2 蒙醫(yī)灸療對(duì)PCPA致失眠模型大鼠腦干組織5-HT的影響 見(jiàn)表1。與正常組相比,模型組腦干5-HT含量降低(P<0.05)。與模型組比較,安定組、赫依穴組和頂會(huì)穴組腦干內(nèi)5-HT的含量升高(P<0.05)。
表1 蒙醫(yī)灸療法對(duì)SD大鼠轉(zhuǎn)棒平衡及腦組織中5-HT的影響( ,n = 10)
表1 蒙醫(yī)灸療法對(duì)SD大鼠轉(zhuǎn)棒平衡及腦組織中5-HT的影響( ,n = 10)
注:與正常組比較,# P<0.05;與模型組比較,△P<0.05
組 別 棒上停留(維持)時(shí)間/s 5-HT/(g/ng)正常組 212.98±62.90 45.63±6.38模型組 56.17±47.39# 20.14±7.92#安定組 112.13±46.84△ 38.26±8.71△赫依穴組 110.85±66.24△ 30.39±10.17△頂會(huì)穴組 111.39±74.41△ 28.6±7.89△黑白際穴組 112.2±57.80△ 23.94±5.45
蒙醫(yī)理論認(rèn)為人體體素相搏導(dǎo)致無(wú)法正常入睡稱失眠,屬于赫依病范疇。蒙醫(yī)灸療法具有通絡(luò)、行氣、活血,抑制赫依病之功效。蒙醫(yī)學(xué)中赫依三穴指的是頂會(huì)穴、赫依穴、黑白際穴。赫依穴:位于第七頸椎棘突與第一胸椎棘突間隙窩中;頂會(huì)穴:兩耳角直上連線中點(diǎn),頭頂正中心;黑白際穴:位于兩乳正中對(duì)直的心窩處[14]?!陡事端牟俊分杏涊d[15]:“赫依偏盛引起的疾病以頂會(huì)穴、赫依穴、黑白際穴灸之。”
5-HT作為神經(jīng)遞質(zhì),集中分布于腦干的中縫核內(nèi),其神經(jīng)功能十分復(fù)雜,涉及睡眠、痛覺(jué)、體溫、垂體內(nèi)分泌等多種生理功能活動(dòng)的調(diào)節(jié)[16]。PCPA是5-HT合成抑制劑,造成睡眠晝夜節(jié)律消失,達(dá)到完全失眠[17]。腦內(nèi)5-HT濃度的升高,會(huì)使機(jī)體產(chǎn)生疲勞和睡意[18-19]。本試驗(yàn)提示蒙醫(yī)灸療赫依穴和頂會(huì)穴可通過(guò)增加腦干組織5-HT的含量,從而達(dá)到促進(jìn)睡眠作用。與模型組相比,黑白際穴組腦干5-HT含量無(wú)顯著性差異(P>0.05),其原因可能與樣本量小或不同穴位所分布的5-HT含量與受體有關(guān)。