葉春玲

導(dǎo)讀：具有自交不親和性的十字花科蔬菜育種材料，在自交留種時，須采用人工蕾期授粉的方法。通過多年的田間工作經(jīng)驗，總結(jié)了授粉過程中在剝蕾、授粉、防止花粉污染等方面需要注意的技術(shù)要點，并進(jìn)行了詳細(xì)說明。

剝蕾授粉-1

剝蕾授粉-2

自交不親和是指開花植物雖然能在同一時期產(chǎn)生正常的花粉和雌蕊，但當(dāng)一朵花的花粉成熟后落到同一朵花的柱頭上時，由于柱頭上乳突細(xì)胞的角質(zhì)膜外覆蓋著一層蛋白質(zhì)薄膜，能對自身和非自身花粉進(jìn)行有效識別，使自花花粉不能在本朵花柱頭上萌發(fā)，從而不能完成受精形成種子的現(xiàn)象[1]。十字花科蔬菜中普遍存在自交不親和現(xiàn)象，因此目前我國十字花科蔬菜育種中，利用自交不親和性選育雜交一代品種仍然是常用的方法。

具有自交不親和性的育種材料進(jìn)行自交留種時，一般通過人工蕾期授粉的方法來達(dá)成。人工蕾期授粉是一個精細(xì)而繁雜的工作，其成敗往往決定了一個年度育種工作的成敗。筆者通過多年田間工作經(jīng)驗總結(jié)，將人工蕾期授粉工作的關(guān)鍵技術(shù)要點編成“順口溜”，方便田間教授工人，以下進(jìn)行詳細(xì)說明。

1 剝蕾的注意事項

1.1 從外而內(nèi)

以人為參照物，剝蕾時，先將外側(cè)的枝條進(jìn)行剝蕾授粉，然后依次向內(nèi)進(jìn)行，由難到易。這樣做是為了避免在操作時，對剛剝出的細(xì)嫩柱頭造成多次刮擦傷害，或避免將柱頭上授的花粉蹭掉，以保證授粉的有效性。

1.2 三刀法

所謂“三刀法”，即使用鑷子3次將花蕾剝開露出柱頭。首先用尖頭鑷子在花蕾頂端稍下方扯開一個口子，使柱頭微露。然后在破口的左右兩側(cè)將鑷子的一個鑷瓣放在外側(cè)，一個鑷瓣避開柱頭放在內(nèi)側(cè)，其后稍加用力將花萼和未展開的花瓣一起剝掉，讓柱頭完整地露出來。在此操作過程中要注意的是一定不能傷害柱頭甚至將柱頭夾斷，否則會影響花粉在柱頭上的萌發(fā)及花粉管在花柱和子房中的生長，使受精失敗[2]。

花蕾很小，因而動作也很輕、少。很多人不容易掌握剝蕾要領(lǐng)，因此我們形象地將剝蕾總結(jié)為“三刀法”，就好像外科醫(yī)生給花蕾動手術(shù)一樣。一般工人在嚴(yán)格教授3天的情況下，可以熟練掌握動作要領(lǐng)。這種方法雖然費(fèi)時費(fèi)工，但效果很好。以前也有同事使用“剝蕾器”，但各類育種材料的花蕾千差萬別，如白菜的花蕾比較短粗，青菜的花蕾比較細(xì)長，甘藍(lán)類的花蕾比較粗長；有的花蕾比較脆，有的花蕾比較軟；甚至有些花椰菜材料的柱頭是彎曲的，因此用“剝蕾器”，要么剝不干凈，要么“誤傷”柱頭情況嚴(yán)重；一般要將“剝蕾器”調(diào)試好，且一種“剝蕾器”只能應(yīng)用于單一材料的原種繁殖。

1.3 盡量小

要盡量剝小的花蕾。因為自交不親和材料的柱頭乳突細(xì)胞的細(xì)胞壁和質(zhì)膜之間存在胼胝質(zhì)，可以有效阻礙花粉管穿過柱頭，所以開花前1.0～1.5天的花蕾，已有部分自交不親和性，一般進(jìn)行剝蕾授粉結(jié)籽差。蕾期自交授粉一般選擇開花前2～4天的花蕾[3]。一般工人剝蕾時，為了省事或圖快，僅做較大的蕾，這樣結(jié)籽會很差。因此，剝蕾工作中務(wù)必強(qiáng)調(diào)“盡量小”。但過小的花蕾也不宜進(jìn)行剝蕾授粉，蕾齡過小，雌蕊無受精能力，授粉無效，不能結(jié)籽[4]，導(dǎo)致花蕾枯死。

1.4 盡量少

剝掉的萼片、花瓣和雄蕊要盡量少。在剝蕾授粉時對花蕾造成的傷害越少，越容易結(jié)籽。如果剝得過多，損傷越大，越容易導(dǎo)致花蕾枯死。另外雄蕊剝掉太多，下次授粉取花粉時會很困難。

1.5 動作少、準(zhǔn)

一方面，剝蕾授粉時對花蕾造成的傷害越少，越容易結(jié)籽，這就要求在剝蕾時動作要盡可能少和準(zhǔn)。另一方面，大面積授粉工作特別注重效率，我們創(chuàng)造性地應(yīng)用“三刀法”，處理一個花蕾動作越少越好，否則動作太多，則效率低下，浪費(fèi)人工。

1.6 不轉(zhuǎn)動

花蕾與花柄的連接處面積很小，并且花蕾越小，組織發(fā)育越不完善，因此，在剝蕾的過程中，捏穩(wěn)要剝的花蕾或花穗，不要轉(zhuǎn)動，以免造成機(jī)械損傷，扭傷花柄而引起花蕾脫落。

1.7 不漏剝

在剝蕾的過程中，處理完一個花穗，應(yīng)檢查有沒有漏掉的花蕾。整株處理完，也要檢查，確保無花枝遺漏。

2 授粉時的注意事項

2.1 新鮮花

授粉時，盡量取當(dāng)天開放花的花粉來涂抹柱頭，其花粉活力最旺盛，萌發(fā)能力最強(qiáng)；如果是早上或陰雨天氣情況下，當(dāng)天開花的花粉還沒有散開，也可用前1天開花的花粉，其萌發(fā)能力也比較強(qiáng)；一般前2天開花的花粉的萌發(fā)能力已急速下降，因此，授粉工作中，務(wù)必強(qiáng)調(diào)用“新鮮花”的花粉。

2.2 夾中間

十字花科蔬菜的花藥在花絲上的著生方式為基著藥，即花藥僅基部著生于花絲頂端。在取花藥涂抹柱頭時，盡量用鑷子的較寬部位去夾花絲的中間，這樣做是為了增大其與鑷子的接觸面積，以保證在授粉時花藥不亂晃動，從而減小操作難度。

2.3 看見黃

在柱頭上涂抹花粉時，要有足量的花粉，才能授粉完全。如何直觀地判斷柱頭上有沒有涂抹上足量的花粉？沒有涂抹花粉的柱頭是綠色的，我們以能看見柱頭上有黃色的花粉為原則。這個問題很重要，以前有同事為了節(jié)約時間，用花藥在剝好的花穗上掃抹，或者用煙蒂蘸花粉涂抹，結(jié)籽都很差，主要都是因為授粉不好。

2.4 動作輕

在用花藥涂抹柱頭時，動作一定要輕，以減少對細(xì)嫩柱頭的傷害，保證授粉的有效性。

2.5 不漏涂

一個花穗授粉完，應(yīng)檢查柱頭有沒有“看見黃”，做到不漏涂。

3 嚴(yán)禁花粉污染

在授粉過程中要盡最大可能杜絕異源花粉雜交的可能性，也稱“花粉污染”，保證種子純度。這對于育種家是至關(guān)重要的。

3.1 不相鄰

在多人同時進(jìn)行人工輔助授粉時，所選擇的授粉植株不能相鄰。在一壟雙行種植模式中，一個人所授植株周圍的至少5株暫時不能進(jìn)行授粉工作，以減少花粉的短距離傳播，避免異交情況發(fā)生，保證種子純度。

3.2 洗手、洗鑷子

在一株授粉完成，下一株植株授粉開始之前，要將手和鑷子在水中清洗，或用酒精殺滅花粉，以避免手和鑷子上的花粉人為傳播。

3.3 少走動

在進(jìn)行授粉工作時，人在育種圃里要少走動。

3.4 人走套網(wǎng)袋

育種圃內(nèi)，育種材料一般需進(jìn)行單株套袋授粉，如果有事需要暫時離開時，一定要將植株用網(wǎng)袋仔細(xì)地套好后再離開，避免未知的花粉來異交。

3.5 不混網(wǎng)袋

在多人同時人工授粉時，網(wǎng)袋不可混在一起，因為網(wǎng)袋上都粘有花粉。務(wù)必保證授粉前從一株上取下的網(wǎng)袋，授粉后還套在其上。

3.6 不漏套枝條

在一株授粉結(jié)束，套網(wǎng)袋后要注意檢查，保證所有的枝條都套在網(wǎng)袋里，沒有枝條遺漏在外。如果事后發(fā)現(xiàn)有這樣的情況，則要摘除所有的花和已經(jīng)剝過的蕾，防止異交發(fā)生。

3.7 殺滅昆蟲

育種圃內(nèi)發(fā)現(xiàn)昆蟲（蜜蜂、蒼蠅等），務(wù)必要將其殺滅，防止昆蟲傳播花粉。

4 其他注意事項

4.1 不踩壟

在進(jìn)行剝蕾授粉工作時，腳盡量不踩踏植株根部附近的土壤，以免土壤板結(jié)嚴(yán)重。若土壤板結(jié)，就應(yīng)該中耕、培土，否則會對植株生長造成很大影響，甚至導(dǎo)致植株死亡。

4.2 采小葉

在首次授粉時，要將所有側(cè)枝上的葉片掐掉一大半。授粉時，也要將新長出的葉片掐掉一半，以抑制營養(yǎng)生長從而促進(jìn)生殖生長。同時春季授粉期經(jīng)常碰到“倒春寒”等陰雨天氣，掐掉葉片也有利于通風(fēng)，防止?jié)穸却?、通風(fēng)不良而發(fā)生病害。掐葉片的原則是只能掐掉一大半，不可以傷及枝條，剩下的一小半葉片會產(chǎn)生離層自動脫落。若傷到枝條，傷口大，難以愈合，很容易發(fā)病。

4.3 綁枝條

在1株植株授粉完成套網(wǎng)袋之前，如發(fā)現(xiàn)枝條過于松散，不好套袋，特別是授粉后期，枝條長，種莢膨大，因重力作用造成植株過于松散，要先用繩子將枝條束攏，但也不可綁束太緊，以免造成通風(fēng)不良。

4.4 不弄斷枝條

套網(wǎng)袋或其他操作時都要小心，不要將枝條弄斷，套好網(wǎng)袋后還要再檢查一下，將壓彎的枝條扶正。

4.5 下雨天，授2天

春季授粉期間，經(jīng)常會碰到“倒春寒”天氣，若出現(xiàn)連續(xù)陰雨天氣時會導(dǎo)致花粉粘連[5]，從而喪失活力。一般下雨天，應(yīng)悶棚提高溫度，但只能授粉2天，到第3天花粉粘連的情況已非常嚴(yán)重，應(yīng)停止授粉工作。

4.6 花粉落，蓋黑網(wǎng)

4月，常會碰到高溫干旱天氣，溫度過高時，會出現(xiàn)花藥發(fā)白、易脫落情況，花粉壽命變短。因此，溫度過高時，可用黑色遮陽網(wǎng)遮蓋大棚，降低棚內(nèi)溫度[6]，同時對育種圃加大通風(fēng)量，田間澆水，增加濕度。

4.7 勤整理

整個授粉期，是植株長勢最旺盛，也是最脆弱的時期。田間病蟲害經(jīng)常會暴發(fā)，因此整個育種圃應(yīng)經(jīng)常整理老葉、爛葉，采用重點涂藥及全面噴藥相結(jié)合的方式防治病蟲害，保持通風(fēng)，追施硼、鉀肥，精細(xì)管理。

5 總結(jié)

在十字花科蔬菜自交不親和系自交留種過程中，人工剝蕾授粉是一項很精細(xì)的工作，前人對此也做了大量工作和研究。筆者結(jié)合前人經(jīng)驗和多年的田間工作經(jīng)驗，總結(jié)了授粉工作中各個環(huán)節(jié)需要注意的事項，以供參考。但其中仍有不足之處，對一些現(xiàn)象背后的原理也不甚了解，對此我們?nèi)孕柰度氪罅康木﹂_展更為深入的研究。