朱宇嘉 ，辛年香 ，馮 豆 ，朱志東 ，蔡延渠 ，鄧劍壕 ，呂 莉 ，董碧蓮 ，朱盛山

（1.廣州市普精生物科技有限公司，廣東廣州，510663；2.廣東藥科大學(xué)，中藥開(kāi)發(fā)研究所，廣東廣州，510006）

聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織（FAO）報(bào)告指出，弧菌病一直困擾著科學(xué)家、動(dòng)物衛(wèi)生主管部門(mén)和養(yǎng)殖者，很難采取有效的預(yù)防和治療措施[1]?；【×铕B(yǎng)蝦風(fēng)險(xiǎn)性大幅增加，全球尚無(wú)有效防治弧菌病的藥物。文獻(xiàn)[3]介紹的KFJ復(fù)方包括半邊蓮花、土香薷、檵木葉等8種植物，其提取物制劑（弧菌專(zhuān)家）在實(shí)際養(yǎng)殖環(huán)境中對(duì)弧菌病治療效果，證實(shí)“弧菌專(zhuān)家”是能有效防治弧菌病的藥物。但是，二次感染卻令人難于控制。本研究從對(duì)蝦的肝胰腺及其包膜入手，比較使用弧菌專(zhuān)家前后肝胰腺及其包膜變化與對(duì)蝦病癥的關(guān)系，同時(shí)檢測(cè)肝胰腺弧菌培養(yǎng)情況，為擬訂預(yù)防二次弧菌病方案提供臨床試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

試驗(yàn)地點(diǎn)：廣東省江門(mén)市新會(huì)區(qū)大鰲鎮(zhèn)百頃村馮某一口池塘和廣東省湛江市企水鎮(zhèn)企水灣鄧某一口高位池，兩地試驗(yàn)分別記為案例一與案例二。

試驗(yàn)時(shí)間：案例一于2018年1月13日至2018年1月15日間進(jìn)行，案例二于2018年1月26日至2018年2月5日間進(jìn)行。

表1 試驗(yàn)蝦塘基本數(shù)據(jù)

兩蝦塘基本數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)如表1所示。表1中蝦塘水質(zhì)數(shù)據(jù)（鹽度、pH值、氨氮、亞硝酸鹽、溶解氧）為病情診斷當(dāng)天所測(cè)數(shù)據(jù)。

1.1 使用“弧菌專(zhuān)家”前病癥觀(guān)察

案例一：1月9日，蝦塘開(kāi)始出現(xiàn)對(duì)蝦吃食減少情況，到1月13吃料量由一餐25 kg下降至一餐20 kg，每日三餐。蝦塘水面下風(fēng)口處有白（?。┍?條/m2，長(zhǎng)度3～12 cm。拋網(wǎng)觀(guān)察病蝦：腸道紅腫，肝胰腺萎縮，白膜覆蓋不完整等病癥，用TCBS培養(yǎng)皿檢測(cè)肝胰腺有大量弧菌。

案例二：2018年1月26日，病蝦活動(dòng)能力減弱，蝦身瘦弱，斷腸、空腸，肝胰腺萎縮、糜爛、白膜消失，拖便、浮便、食欲減退，慢料、減料，白便、偷死。吃料量由一餐25 kg下降至一餐15 kg，每日三餐。

1.2 治療與試驗(yàn)方法

兩案例均采用“弧菌專(zhuān)家”按標(biāo)示量進(jìn)行治療。治療需連續(xù)用藥2 d，早晚各1次。根據(jù)“弧菌專(zhuān)家”用法用量表和注意事項(xiàng)計(jì)算用藥量，按藥料比1：3的比例拌料后于蝦塘均勻投喂。

每次用藥前從蝦塘撈取對(duì)蝦10尾，觀(guān)察對(duì)蝦癥狀，觀(guān)察分體表癥狀觀(guān)察和解剖觀(guān)察。其中體表癥狀觀(guān)察記錄蝦體各種癥狀，解剖觀(guān)察即剝殼后記錄對(duì)蝦肝胰腺癥狀。用藥后半小時(shí)記錄對(duì)蝦吃料情況。用藥2 d后每天于早晨第1次喂料前撈取對(duì)蝦10尾，進(jìn)行體表癥狀觀(guān)察與解剖觀(guān)察。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 一次用藥效果

案例一：1次用“弧菌專(zhuān)家”后，對(duì)蝦癥狀出現(xiàn)好轉(zhuǎn)，吃料蝦肝胰腺增大趨于正常，棕色，白膜覆蓋面積加大（覆蓋率約80%）。肝胰腺弧菌TCBS檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，弧菌數(shù)量明顯減少。

案例二：蝦的活力明顯增強(qiáng)，基本沒(méi)有趴邊、拖便、斷腸，白便減少，肝臟白膜比較完整，蝦體色比較通透，偷死減少，吃料加快，TCBS弧菌培養(yǎng)檢測(cè)肝胰腺弧菌量較少。

2.2 用藥兩天后效果

案例一：用藥2 d，病蝦體表癥狀完全消失，體色通透，腸道飽滿(mǎn)。解剖發(fā)現(xiàn)肝胰腺正常充滿(mǎn)血色，白膜覆蓋基本完整，肝胰腺弧菌TCBS培養(yǎng)弧菌量少。

案例二：2 d用4次藥后，吃料基本恢復(fù)正常。觀(guān)察并剖取吃料蝦肝胰腺和腸道，可見(jiàn)肝胰腺白膜覆蓋基本完整，腸道呈棕黑色飽滿(mǎn)狀態(tài)。取肝胰腺搗碎后涂抹TCBS培養(yǎng)皿，24 h后觀(guān)察培養(yǎng)弧菌結(jié)果正常。

2.3 停藥兩天后癥狀

案例一：停藥2 d后，對(duì)蝦未發(fā)現(xiàn)病癥，對(duì)蝦腸道飽滿(mǎn)。解剖觀(guān)察發(fā)現(xiàn)白膜覆蓋完整。

案例二：停藥2 d后，對(duì)蝦體表未發(fā)現(xiàn)癥狀。解剖觀(guān)察發(fā)現(xiàn)白膜覆蓋率約為80%。TCBS培養(yǎng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)肝胰腺有少量弧菌。

2.4 停藥4 d后癥狀

案例一：腸道飽滿(mǎn)度較兩天前有所下降，肝胰腺白膜覆蓋率下降（覆蓋率約50%），TCBS培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)肝胰腺弧菌量回升。蝦塘吃料速度放緩。

案例二：肝胰腺白膜基本消失，蝦體出現(xiàn)發(fā)紅癥狀，TCBS培養(yǎng)檢測(cè)肝胰腺含大量弧菌。蝦塘出現(xiàn)偷死癥狀（每日排除死蝦約30尾）。

3 討論

3.1 肝胰腺白膜與弧菌感染的關(guān)系

在2個(gè)試驗(yàn)案例中，“弧菌專(zhuān)家”用藥期間對(duì)蝦白膜覆蓋率逐漸擴(kuò)大。用藥2 d后，2個(gè)案例中對(duì)蝦白膜基本恢復(fù)完整。于此同時(shí)，蝦塘中弧菌病癥狀逐步好轉(zhuǎn)，TCBS培養(yǎng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)對(duì)蝦肝胰腺弧菌數(shù)量不斷下降。到停藥第2天，案例一中對(duì)蝦沒(méi)有2次感染跡象，案例二中，白膜覆蓋率下降，肝胰腺出現(xiàn)少量弧菌，體表沒(méi)有觀(guān)察到癥狀。停藥后第4天，對(duì)蝦肝胰腺白膜覆蓋率均出現(xiàn)下降現(xiàn)象，其中，案例一中的對(duì)蝦肝胰腺白膜覆蓋率約為50%，此時(shí)，對(duì)蝦出現(xiàn)減料等早期病癥。案例二中的對(duì)蝦肝胰腺白膜基本消失，對(duì)蝦病癥嚴(yán)重，出現(xiàn)偷死的現(xiàn)象。

由2個(gè)試驗(yàn)案例可見(jiàn)，對(duì)蝦肝胰腺白膜覆蓋率與弧菌病病情嚴(yán)重程度呈反相關(guān)關(guān)系。筆者推論肝胰腺白膜具有防御弧菌感染的功能。白膜覆蓋不完整將導(dǎo)致弧菌入侵肝胰腺，繼而出現(xiàn)各種弧菌病病癥。

在案例二試驗(yàn)塘中，筆者自停藥后第5天起開(kāi)始使用“弧菌專(zhuān)家”進(jìn)行預(yù)防。2次用藥（1 d 1次，連用2 d）后，對(duì)蝦吃料速度恢復(fù)正常，預(yù)防開(kāi)始后第3天取蝦解剖觀(guān)察發(fā)現(xiàn)，對(duì)蝦肝胰腺白膜基本覆蓋完整，肝胰腺無(wú)任何病癥。

3.2 預(yù)防二次感染

病蝦用藥2 d后，肝胰腺好轉(zhuǎn)，但其保護(hù)肝胰腺免遭弧菌等入侵的屏障白膜覆蓋仍不完整，無(wú)法防止弧菌入侵肝胰腺。蝦塘和塘中死蝦體內(nèi)弧菌含量高，活蝦好吃死蝦，導(dǎo)致弧菌入侵二次感染。尚處于康復(fù)期的病蝦，要及時(shí)預(yù)防（先間隔2～3 d，后慢慢延長(zhǎng)）。當(dāng)出現(xiàn)活力下降，拖便，慢料，斷腸，肝臟和腸道發(fā)紅等情況應(yīng)及時(shí)用藥，最好是提前用藥，或加大用藥。

4 總結(jié)

該文通過(guò)2個(gè)案例研究對(duì)蝦弧菌病發(fā)病與肝胰腺白膜覆蓋率之間的關(guān)系。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，對(duì)蝦肝胰腺白膜能夠抵御弧菌入侵對(duì)蝦肝胰腺。正常對(duì)蝦肝胰腺白膜覆蓋完整，肝胰腺無(wú)弧菌，病蝦往往肝胰腺白膜覆蓋不完整甚至消失，肝胰腺檢測(cè)出大量弧菌。應(yīng)對(duì)弧菌病應(yīng)當(dāng)以預(yù)防為主，定期使用弧菌專(zhuān)家預(yù)防，有助于保護(hù)對(duì)蝦肝胰臟。如對(duì)蝦出現(xiàn)病癥或白膜覆蓋不完整，應(yīng)及時(shí)采用“弧菌專(zhuān)家”進(jìn)行治療。治療后由于白膜處于恢復(fù)階段，弧菌仍有可能入侵肝胰臟，為防止二次感染，應(yīng)采用“弧菌專(zhuān)家”進(jìn)行預(yù)防。