陳如龍 王長(zhǎng)水 馬強(qiáng) 何其元 馬益龍 布爾江·哈那啥提

摘要：在肉牛養(yǎng)殖過(guò)程中，肉?？赡軙?huì)患口蹄疫病，其具有很強(qiáng)的傳染性。在對(duì)肉牛進(jìn)行口蹄疫免疫時(shí)，免疫效果會(huì)受到多種因素的影響。所以，在具體的免疫過(guò)程中，要根據(jù)牛群及養(yǎng)牛場(chǎng)的實(shí)際情況，合理制定免疫程序，以達(dá)到最好的免疫效果。本文對(duì)肉?？谔阋卟煌庖叱绦虻拿庖咝ЧM(jìn)行了比較分析。

關(guān)鍵詞：肉牛口蹄疫;免疫程序;免疫效果;比較

牛只的個(gè)體差異、免疫間隔時(shí)間等都會(huì)影響到肉?？谔阋叩拿庖咝Ч?。并且，免疫時(shí)采用的程序不同，達(dá)到的免疫效果也會(huì)不同。所以，需要通過(guò)試驗(yàn)的方式，對(duì)不同免疫程序下的免疫效果進(jìn)行對(duì)比，以擇優(yōu)選擇最佳的口蹄疫免疫程序。

1試驗(yàn)材料的選擇

1）試驗(yàn)動(dòng)物：本次試驗(yàn)選擇90頭健康肉牛，年齡在2-6歲，來(lái)自于新疆博樂市某規(guī)?；馀ｐB(yǎng)殖場(chǎng)。

2）疫苗：試驗(yàn)所用的疫苗為O型一亞洲l型-A型三價(jià)滅活疫苗。

3）試驗(yàn)所用的抗體檢測(cè)儀器主要有以下幾種：酶標(biāo)分析儀;全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī);低速大容量臺(tái)式離心機(jī);電熱恒溫培養(yǎng)箱;移液器;立式壓力蒸汽滅菌器;96孔ELISA板、U型96孔抗原抗體反應(yīng)板等。

4）本次試驗(yàn)所用的檢測(cè)試劑主要有以下幾種：口蹄疫O型、口蹄疫亞洲l型和口蹄疫A型抗體檢測(cè)液。

2試驗(yàn)方法及過(guò)程

2.1試驗(yàn)方案

試驗(yàn)的時(shí)間從2017年2-12月，將90頭肉牛隨機(jī)分成三組，分別標(biāo)記為A、B、C。A組肉牛在2017年3月20日和9月20日分別注射1次O型一亞洲l型-A型三價(jià)滅活疫苗，每頭牛的注射劑量為1mL。B組牛在相同的時(shí)間分別注射相同的疫苗，每次注射劑量為2mL。C組牛注射同樣的疫苗，每次2mL，總共注射三次，分別為2017年3月20日、7月20日和11月20日。在注射疫苗后，定期從肉牛身上采集血樣，檢測(cè)其中的免疫抗體，并根據(jù)疫苗在不同時(shí)間和注射次數(shù)中的抗體水平，繪制出對(duì)應(yīng)的免疫抗體消長(zhǎng)曲線，從而分析出抗體水平的變化規(guī)律，確定出免疫效果最好的免疫次數(shù)，并制定出最具針對(duì)性的免疫程序。

2.2采樣方法

在對(duì)每個(gè)實(shí)驗(yàn)組的肉牛采血時(shí)，都是在C組免疫前、后的30d進(jìn)行的，總共采血6次，每頭牛每次的采血量為10mL，在無(wú)菌條件下進(jìn)行尾跟采血，將血清分離出來(lái)后檢測(cè)免疫抗體效價(jià)。

2.3檢測(cè)方法

在對(duì)免疫抗體進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，采用ELISA法，取一定量的病毒抗原與被檢測(cè)血清進(jìn)仔反應(yīng)，反應(yīng)在液相中進(jìn)行。然后，將抗原抗體的復(fù)合體轉(zhuǎn)移到ELISA酶標(biāo)板中，板上包被有口蹄疫特異性抗體。如果病原抗體不能完全被血清抗體所阻斷，那么未被阻斷部分就會(huì)被板內(nèi)的抗體所捕獲。再加入豚鼠抗血清，被捕獲的病原抗體會(huì)與其中的抗體相結(jié)合，利用兔抗豚鼠lgG酶結(jié)合物，以及底物溶液，就可以顯現(xiàn)出不同的顏色。通過(guò)對(duì)試驗(yàn)孔顏色、抗原對(duì)照孔顏色進(jìn)行對(duì)比，就可以判斷結(jié)果。

3試驗(yàn)結(jié)果及分析

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在對(duì)C組牛群注射第1次?？谔阋咭呙绾?，O型口蹄疫、亞洲I型口蹄疫和A型口蹄疫的免疫抗體保護(hù)率基本維持在66%，其他兩組在免疫空白期的抗體保護(hù)率分別為50%和56.67%、46.67%和56.67%、46.67%和53.33%。A組在注射疫苗1個(gè)月以后的抗體保護(hù)率超過(guò)83%，60d下降到66%，90d的時(shí)候下降到46%。A組牛在進(jìn)行第2次免疫后其抗體保護(hù)率更低，試驗(yàn)牛已經(jīng)不具備抵御口蹄疫病毒的能力。B組牛在第1次采血檢查中，抗體保護(hù)率超過(guò)96%，90d和150d分別下降為76%和53%，第2次免疫時(shí)，牛機(jī)體中的抗體已經(jīng)無(wú)法對(duì)自身進(jìn)行有效的保護(hù)。C組牛在第1次采血檢測(cè)時(shí)，其抗體保護(hù)率超過(guò)93%，60d時(shí)超過(guò)60%。在第2次和第3次免疫前的30d，牛機(jī)體內(nèi)的抗體保護(hù)率高于66%，試驗(yàn)牛體內(nèi)的抗體能對(duì)自身進(jìn)行有效的保護(hù)。由此可見，C組的免疫效果是最好的，能夠?qū)⑷馀ｓw內(nèi)的口蹄疫抗體效價(jià)長(zhǎng)期維持在比較均衡的狀態(tài)。即每年要對(duì)牛注射3次疫苗，每頭牛注射2mU次，注射的疫苗為O型一亞洲I型-A型三價(jià)滅活疫苗，能夠使肉牛具備長(zhǎng)期抵御口蹄疫的能力。

4結(jié)語(yǔ)

綜上所述，在肉牛的養(yǎng)殖過(guò)程中，采用不同的肉?？谔阋呙庖叱绦颍ǔＤ軌蜻_(dá)到不同的免疫效果，因此，每年對(duì)肉牛注射3次口蹄疫疫苗，肌肉注射，注射劑量為2mL/次，能夠達(dá)到比較好的免疫效果，并且肉牛體內(nèi)的口蹄疫抗體能夠常年維持在比較均衡的狀態(tài)。所以，在對(duì)肉牛進(jìn)行口蹄疫免疫時(shí)，可以選擇此免疫方式，增強(qiáng)肉牛抵御口蹄疫的能力，從而降低肉牛感染口蹄疫的風(fēng)險(xiǎn)。