張凱祥 邢德芳 高許雷 滕樂幫 呂永艷 孫國強(qiáng)*

(1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，青島266109；2.萊陽市團(tuán)旺畜牧獸醫(yī)工作站，萊陽265217；3.青島市嶗山區(qū)農(nóng)業(yè)和水利局，青島266061；4.平度市畜牧獸醫(yī)局，平度266700)

近年來，隨著我國奶牛養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，對大豆等蛋白質(zhì)飼料的需要量不斷增加，在集約化的養(yǎng)殖模式下，大量未被利用的氮元素經(jīng)奶牛的糞尿直接排放到外界環(huán)境中，既造成了蛋白質(zhì)資源的浪費(fèi)，又加劇了環(huán)境的污染，蛋白質(zhì)飼料原料短缺和環(huán)境污染等因素成為制約我國奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要因素。實(shí)際生產(chǎn)中，在不影響奶牛產(chǎn)奶性能的前提下，提高奶牛對飼糧蛋白質(zhì)的利用率、降低氮排泄量，對減少因奶牛養(yǎng)殖對環(huán)境造成的污染具有重要的意義。在反芻動物蛋白質(zhì)營養(yǎng)中，限制性氨基酸及飼糧氨基酸組成模式是決定動物體內(nèi)含氮物質(zhì)利用效率的重要因素[1]。賴氨酸作為反芻動物的第一或第二限制性氨基酸，有研究發(fā)現(xiàn)，將其進(jìn)行過瘤胃處理后添加到反芻動物飼糧中可以避免賴氨酸在瘤胃中的降解，增加小腸內(nèi)賴氨酸的含量，提高飼糧蛋白質(zhì)的利用率[2]。王星凌等[3]研究飼糧蛋白質(zhì)和賴氨酸對奶牛生產(chǎn)性能和氮排泄的影響時發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加過瘤胃賴氨酸(RPLys)可顯著提高奶牛產(chǎn)奶量和乳蛋白率，并可提高氮的利用率。RPLys可以滿足奶牛對限制性氨基酸的需要，增加小腸可利用氨基酸的數(shù)量，提高奶牛的產(chǎn)奶性能。歐陽靖[4]在研究飼糧賴氨酸對羔羊消化代謝的影響時發(fā)現(xiàn)，賴氨酸可以提高羔羊?qū)τ袡C(jī)物的消化量，增加氮的沉積，提高氮的利用率。劉鋼等[5]研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛的飼糧中添加RPLys可以平衡奶牛機(jī)體氨基酸的利用體系，促進(jìn)蛋白質(zhì)的消化吸收，提高飼料蛋白質(zhì)的利用率和奶牛的產(chǎn)奶量，減少氮排泄量。蛋白質(zhì)營養(yǎng)的實(shí)質(zhì)是氨基酸營養(yǎng)，蛋白質(zhì)消化率的變化間接反映氨基酸消化率的變化[6]，RPLys在反芻動物中的研究主要集中于產(chǎn)奶性能方面，而在飼糧中添加RPLys對奶牛瘤胃微生物蛋白(MCP)產(chǎn)量以及氮排泄影響的研究極為鮮見。本試驗(yàn)通過在奶牛飼糧中添加不同水平的RPLys，探討其對瘤胃MCP產(chǎn)量、產(chǎn)奶性能和氮排泄的影響，確定RPLys在奶牛飼糧中的最適添加量，以期提高奶牛產(chǎn)奶性能、飼糧蛋白質(zhì)利用率和瘤胃MCP產(chǎn)量，減少氮排泄，改善養(yǎng)殖環(huán)境，為我國奶牛養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計

本試驗(yàn)所用RPLys(過瘤胃率為70%)由青島潤博特生物科技有限公司提供，為白色顆粒狀物質(zhì)，組成原料為L-賴氨酸鹽酸鹽、棕櫚油、二氧化硅，其中賴氨酸含量≥50%，水分含量≤12%。試驗(yàn)采用單因素隨機(jī)分組的方法，選取煙臺荷牧園牧業(yè)有限責(zé)任公司養(yǎng)殖的年齡、體重、胎次、產(chǎn)奶量、乳成分及泌乳期[(90±15) d]相近且體況良好的荷斯坦奶牛40頭，隨機(jī)分為4組，每組10頭。對照組、試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組飼糧中分別添加0、25、30和35 g/(d·頭)RPLys。每頭奶牛每天從飼糧中預(yù)留出0.5 kg麩皮，將RPLys與預(yù)留的0.5 kg麩皮混合均勻后均分為2份，每日分2次隨全混合日糧(TMR)飼喂。TMR組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 TMR組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 Items含量 Content膨化大豆 Extruded soybean2.09全株玉米青貯 Whole-plant corn silage27.10啤酒糟 Brewer’s grains6.20苜蓿草 Alfalfa hay13.08羊草 Chinese wide rye8.65過瘤胃脂肪 Rumen protected fat1)0.38食鹽 NaCl0.33小蘇打 NaHCO30.38預(yù)混料 Premix2)2.32生物脫霉素 Biological mycotoxin removement agent3)0.19合計 Total100.00營養(yǎng)水平 Nutrient levels4)粗蛋白質(zhì) CP15.30產(chǎn)奶凈能 NEL/(MJ/kg)6.58中性洗滌纖維 NDF40.20酸性洗滌纖維 ADF20.10鈣 Ca0.97磷 P0.42

1)過瘤胃脂肪主要成分Main components of rumen protected fat：棕櫚酸 palmitic acid≥75%，肉豆蔻酸 myristic acid 1%～5%，硬脂酸 stearic acid 6%～8%，油酸 oleic acid≤10%，糠酸 furoic acid≤2%。

2)預(yù)混料為每千克TMR干物質(zhì)提供The premix provided the following per kg of the DM for TMR:VA 8 000 IU，VD31 600 IU，VE 30 mg，F(xiàn)e 20 mg，Cu 16 mg，Zn 100 mg，Mn 35 mg，I 1 mg，Se 0.5 mg，Co 0.5 mg。

3)生物脫霉素主要成分Main components of biological mycotoxin removement agent：甘露寡糖mannan oligosaccharide≥14%，β-葡聚糖 β-glucan 15%～40%，粗蛋白質(zhì) crude protein≤35%，水分 moisture≤6%。

4)產(chǎn)奶凈能為計算值，是將配方中各原料的產(chǎn)奶凈能分別與其所占TMR的百分比相乘，然后相加得到[7]，其余營養(yǎng)水平為實(shí)測值。NELwas a calculated value which was the sum of NELof different multiplied by their percentages in the TMR[7], while the other nutrient levels were measured values.

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)牛采用分欄飼喂，整個試驗(yàn)期共75 d，其中預(yù)試期15 d，正試期60 d。試驗(yàn)牛每日使用荷蘭進(jìn)口SAC全自動擠奶器擠奶3次(04:00、12:00、18:00)，每日飼喂TMR 2次(04:30、18:30)，確保奶牛每日有20 h以上時間能夠接觸到TMR。試驗(yàn)?zāi)膛２墒澈?，在運(yùn)動場自由運(yùn)動和飲水，按常規(guī)對試驗(yàn)牛進(jìn)行驅(qū)蟲、光照及管理。

1.3 樣品的采集與處理

1.3.1 TMR樣

在預(yù)試期第1～3天、正試期第28～30天和第58～60天時采用四分法收集3次TMR樣，將收集的TMR樣置于65 ℃恒溫干燥箱中烘干，制成風(fēng)干樣，粉碎混勻后備用。

1.3.2 尿樣

分別在預(yù)試期第1～3天、正試期第28～30天和第58～60天時收集尿樣，參照朱雯[6]介紹的點(diǎn)收尿法，采取人工接尿結(jié)合膀胱取尿的方法，每天收集2次，每隔12 h收集1次，連續(xù)收集3 d，每天在前1天的基礎(chǔ)上延后4 h收集。向每次收集的尿樣中加入10%的硫酸，調(diào)整pH(使pH<3)后，于-20 ℃冰柜中冷凍保存。

1.3.3 糞樣

分別在預(yù)試期第1～3天、正試期第28～30天和第58～60天收集3次糞樣，每次連續(xù)3 d進(jìn)行24 h全收糞。每次收集糞樣前將試驗(yàn)牛的牛床沖洗干凈，及時將試驗(yàn)牛糞便收集入桶，將每天收集的糞樣混合均勻并稱重，采用四分法收集當(dāng)天糞便，按每100 g糞樣加入25 mL硫酸(10%)的方式進(jìn)行固氮處理后，于-20 ℃冰柜中進(jìn)行冷凍保存。每階段采樣結(jié)束后，將3 d所收集的糞樣按樣重比例混勻，置于恒溫干燥箱中65 ℃烘至恒重，制成風(fēng)干樣進(jìn)行保存。

1.3.4 乳樣

分別在預(yù)試期第1天和正試期每隔15 d，按照早、中、晚4∶3∶3的比例收集乳樣50 mL于取樣瓶中，加入30 mg重鉻酸鉀防腐劑，混勻后將其放于4 ℃冰柜中冷藏保存，用于乳成分各項(xiàng)指標(biāo)的測定。

1.4 指標(biāo)測定與方法

1.4.1 采食量

試驗(yàn)牛分欄飼喂，單獨(dú)記錄每頭試驗(yàn)牛的采食量。預(yù)試期內(nèi)，每隔2 d記錄1次投料量，每次飼喂前收集剩余飼糧并稱重，依據(jù)投料量和剩料量計算出每頭牛的采食量。采用相同的方法，正試期內(nèi)每隔10 d記錄并計算1次采食量，總共記錄6次，每次連續(xù)記錄3 d，根據(jù)3 d的采食量記錄計算出該階段的平均采食量。每次根據(jù)上一階段測定的平均采食量調(diào)整下一階段TMR飼喂量。

1.4.2 常規(guī)營養(yǎng)物質(zhì)含量

參照GB/T 6435—2006[8]測定水分含量，計算干物質(zhì)(DM)含量；粗蛋白質(zhì)(CP)含量采用凱氏定氮法(GB/T 6432—1994[9])進(jìn)行測定；參照GB/T 20806—2006[10]測定中性洗滌纖維(NDF)含量；參照NY/T 1459—2007[11]測定酸性洗滌纖維(ADF)含量；鈣(Ca)含量的測定采用高錳酸鉀法(GB/T 6436—2002[12])；磷(P)含量的測定采用分光光度法(GB/T 6437—2002[13])。

1.4.3 瘤胃MCP產(chǎn)量

尿中排出的嘌呤衍生物(PD)主要來源于瘤胃微生物嘌呤，因此通過測定尿中PD的含量可以估測出瘤胃MCP產(chǎn)量。尿中尿酸和尿囊素的含量使用比色法進(jìn)行測定，尿酸和尿囊素含量之和即為尿PD含量[14]。測定尿酸含量時使用儀器為UV-1800 PC型紫外可見分光光度計(上海美譜達(dá)儀器有限公司)，測定尿囊素含量時使用的儀器為DNM-9602酶標(biāo)分析儀(北京普朗新技術(shù)有限公司)。

小腸吸收外源性嘌呤量(X)的計算公式為：

Y=0.85X+0.385BW0.75。

式中：Y為尿中PD排出量(mmol/d)；0.85為牛腸道吸收的嘌呤轉(zhuǎn)化為尿中PD的回收率；0.385為當(dāng)牛腸道吸收嘌呤的量為0時，尿中內(nèi)源PD的排出量；BW0.75為動物的代謝體重(kg)。

瘤胃MCP產(chǎn)量的計算公式為：

MCP(g/d)=(6.25×70X)/(0.83×0.116×
1 000)=6.25×0.727X。

式中：X為小腸吸收外源性嘌呤量(mmol/d)；70為每摩爾嘌呤的含氮量(mg/mol)；0.83為微生物核酸嘌呤的消化率；0.116為瘤胃微生物總氮中嘌呤氮的比例；6.25為氮換算為蛋白質(zhì)的平均系數(shù)。

1.4.4 產(chǎn)奶量及乳成分

采用荷蘭進(jìn)口SAC全自動擠奶器擠奶，擠奶時自動顯示產(chǎn)奶量。在預(yù)試期和正試期期間，每隔5 d記錄1次試驗(yàn)牛產(chǎn)奶量，每次連續(xù)記錄3 d，取3 d產(chǎn)奶量的平均值。

采用山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院奶牛研究中心生產(chǎn)性能測定實(shí)驗(yàn)室的乳成分和體細(xì)胞自動分析儀(Combi Foss FT+,丹麥Foss公司，)測定乳樣中的乳脂率、乳蛋白率、乳糖率和乳體細(xì)胞數(shù)，計算正試期內(nèi)各乳成分指標(biāo)的平均值。

1.4.5 氮代謝指標(biāo)

利用脲酶法測定尿中尿素氮含量[15]，利用苦味酸比色法測定尿肌酐含量[16]，以上測定所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。參考Valadares等[16]的試驗(yàn)方法，通過尿肌酐(每天每頭牛1 kg體重大約排出29 mg尿肌酐)標(biāo)記來測定試驗(yàn)牛的排尿量。試驗(yàn)測定尿素氮、尿肌酐含量時，使用儀器為UV-1800 PC型紫外可見分光光度計(上海美譜達(dá)儀器有限公司)。

氮代謝指標(biāo)計算公式如下：

糞氮(g/d)=每日排氮量×
糞中CP的含量×0.16；
尿氮(g/d)=每日排尿量×尿氮含量；
乳氮(g/d)=產(chǎn)奶量×乳蛋白率×0.16；
可消化氮(g/d)=飼糧食入氮-糞氮；
氮總排出量(g/d)=糞氮+尿氮；
氮沉積(g/d)=飼糧食入氮-
糞氮-尿氮-乳氮；
氮表觀消化率(%)=[(飼糧食入氮-
糞氮)/飼糧食入氮]×100。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

使用Excel 2010軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步處理，使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，采樣Duncan氏法多重比較檢驗(yàn)組間差異顯著性，以P<0.05和P<0.01分別表示差異顯著和極顯著，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 RPLys添加量對奶牛瘤胃MCP產(chǎn)量的影響

由表2可知，在尿酸排出量方面，各試驗(yàn)組均極顯著高于對照組(P<0.01)，且30 g/(d·頭)RPLys添加組極顯著高于25 g/(d·頭)RPLys添加組(P<0.01)，與35 g/(d·頭)RPLys添加組之間差異不顯著(P>0.05)；在尿囊素排出量方面，30和35 g/(d·頭)RPLys添加組極顯著高于對照組(P<0.01)，25 g/(d·頭)RPLys添加組與對照組無顯著差異(P>0.05)，30 g/(d·頭)RPLys添加組還極顯著高于25 g/(d·頭)RPLys添加組(P<0.01)；在尿PD排出量方面，25 g/(d·頭)RPLys添加組顯著高于對照組(P<0.05)，30和35 g/(d·頭)RPLys添加組極顯著高于對照組(P<0.01)，30 g/(d·頭)RPLys添加組極顯著高于25 g/(d·頭)RPLys添加組(P<0.01)，與35 g/(d·頭)RPLys添加組之間差異不顯著(P>0.05)；在瘤胃MCP產(chǎn)量方面，25 g/(d·頭)RPLys添加組顯著高于對照組(P<0.05)，30和35 g/(d·頭)RPLys添加組極顯著高于對照組(P<0.01)，30 g/(d·頭)RPLys添加組極顯著高于25 g/(d·頭)RPLys添加組(P<0.01)，與35 g/(d·頭)RPLys添加組之間無顯著差異(P>0.05)，25、30、35 g/(d·頭)RPLys添加組的瘤胃MCP產(chǎn)量分別比對照組提高了5.34%、14.76%、10.06%。

表2 RPLys添加量對奶牛瘤胃微生物蛋白產(chǎn)量的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 RPLys添加量對奶牛干物質(zhì)采食量和產(chǎn)奶性能的影響

由表3可知，各試驗(yàn)組的干物質(zhì)采食量與對照相比均差異不顯著(P>0.05)。正試期內(nèi)，在產(chǎn)奶量方面，25和35 g/(d·頭)RPLys添加組顯著高于對照組(P<0.05)，30 g/(d·頭)RPLys添加組極顯著高于對照組(P<0.01)，25、30、35 g/(d·頭)RPLys添加組的產(chǎn)奶量分別比對照組提高了5.34%、9.30%、6.69%；在乳蛋白率方面，30 g/(d·頭)RPLys添加組極顯著高于對照組(P<0.01)，35 g/(d·頭)RPLys添加組顯著高于對照組(P<0.05)，25 g/(d·頭)RPLys添加組與對照組相比無顯著差異(P>0.05)；在乳脂率、乳糖率和乳體細(xì)胞數(shù)方面，各試驗(yàn)組與對照組相比均無顯著差異(P>0.05)。

表3 RPLys添加量對奶牛干物質(zhì)采食量和產(chǎn)奶性能的影響

2.3 RPLys添加量對奶牛氮排泄及氮表觀消化率的影響

由表4可知，各試驗(yàn)組的食入氮與對照組相比均無顯著差異(P>0.05)；各試驗(yàn)組糞氮、尿氮排出量均極顯著低于對照組(P<0.01)，其中30 g/(d·頭)RPLys添加組尿氮排出量極顯著低于25 g/(d·頭)RPLys添加組；在乳氮排出量方面，各試驗(yàn)組均極顯著高于對照組(P<0.01)，其中30 g/(d·頭)RPLys添加組極顯著高于25和35 g/(d·頭)RPLys添加組(P<0.01)；在可消化氮方面，各試驗(yàn)組均極顯著高于對照組(P<0.01)，其中30 g/(d·頭)RPLys添加組顯著高于25 g/(d·頭)RPLys添加組(P<0.05)，與35 g/(d·頭)RPLys添加組之間差異不顯著(P>0.05)；在氮總排出量方面，各試驗(yàn)組均極顯著低于對照組(P<0.01)，其中30 g/(d·頭)RPLys添加組極顯著低于25 g/(d·頭)RPLys添加組(P<0.01)，25、30、35 g/(d·頭)RPLys添加組的氮總排出量分別比對照組降低了5.70%(P<0.01)、9.98%(P<0.01)、7.87%(P<0.01)；各試驗(yàn)組的氮沉積均極顯著高于對照組(P<0.01)；在氮表觀消化率方面，各試驗(yàn)組均極顯著高于對照組(P<0.01)。

3 討 論

3.1 RPLys添加量對奶牛瘤胃MCP產(chǎn)量的影響

尿中PD的含量與瘤胃MCP產(chǎn)量存在高度相關(guān)性[17]，由于尿中排出的PD主要來源于瘤胃微生物嘌呤，因此通過測定尿中PD的含量可以估測出奶牛瘤胃MCP產(chǎn)量。本試驗(yàn)條件下，在奶牛飼糧中添加不同水平RPLys后顯著或極顯著提高了奶牛瘤胃MCP產(chǎn)量。劉文杰[18]研究賴氨酸對小尾寒羊瘤胃和整體消化代謝的影響時指出，添加賴氨酸可以提高瘤胃液中總揮發(fā)性脂肪酸、乙酸、丙酸和丁酸的濃度，增加瘤胃液中細(xì)菌總數(shù)，同時提高了綿羊?qū)τ袡C(jī)物和粗蛋白質(zhì)的表觀消化率，改善瘤胃發(fā)酵類型，促進(jìn)瘤胃消化代謝能力，提高瘤胃MCP產(chǎn)量。黃健[6]研究飼糧中添加賴氨酸對梅花鹿生長性能和消化代謝的影響時發(fā)現(xiàn)，賴氨酸能增加尿囊素和PD排出量，間接促進(jìn)瘤胃MCP產(chǎn)量的增加。林英庭等[19]研究瘤胃保護(hù)性賴氨酸對小尾寒羊瘤胃發(fā)酵的影響時發(fā)現(xiàn)，在綿羊的飼糧中添加瘤胃保護(hù)性賴氨酸可以顯著提高瘤胃MCP產(chǎn)量，瘤胃液NH3-N濃度變化反映了瘤胃微生物對飼糧氮的降解速度和瘤胃微生物對氨態(tài)氮(NH3-N)的利用速度，瘤胃液NH3-N濃度間接影響MCP產(chǎn)量。在奶牛飼糧中添加RPLys后，通過改善瘤胃發(fā)酵類型，促使瘤胃MCP合成的速率大于瘤胃微生物分解蛋白質(zhì)生成NH3-N的速率，提高了奶牛瘤胃MCP產(chǎn)量。本試驗(yàn)中，隨著RPLys添加量的增加，瘤胃MCP產(chǎn)量呈先增加后降低的變化趨勢，其中RPLys添加量為30 g/(d·頭)時增加效果最明顯。因?yàn)榘被嶂g存在拮抗作用[20]，添加高劑量的賴氨酸后，可能干擾了其他氨基酸的吸收和代謝，從而導(dǎo)致瘤胃MCP產(chǎn)量不再增加。

表4 RPLys添加量對奶牛氮排泄及氮表觀消化率的影響

3.2 RPLys添加量對奶牛干物質(zhì)采食量和產(chǎn)奶性能的影響

Robinson等[21]研究發(fā)現(xiàn)，在泌乳奶牛的飼糧中添加RPLys對干物質(zhì)采食量無顯著影響。韓云勝等[22]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加RPLys對荷斯坦奶牛的干物質(zhì)采食量無顯著影響。在本試驗(yàn)條件下，奶牛飼糧中添加RPLys對荷斯坦奶牛的干物質(zhì)采食量無顯著影響，與上述研究結(jié)果一致。云伏雨[23]在奶牛飼糧中補(bǔ)飼瘤胃保護(hù)性賴氨酸后發(fā)現(xiàn)其對奶牛干物質(zhì)采食量無顯著影響，但顯著提高了奶牛的產(chǎn)奶量和乳蛋白含量。RPLys的使用可以滿足泌乳奶牛對限制性氨基酸的需要，增加小腸可利用氨基酸的數(shù)量，進(jìn)而提高泌乳奶牛的生產(chǎn)性能。Giallongo等[24]向奶牛灌注RPLys后發(fā)現(xiàn)，RPLys可提高奶牛產(chǎn)奶量，促進(jìn)乳蛋白合成，提高乳蛋白率。劉鋼等[5]研究表明，在奶牛飼糧中添加RPLys可以降低奶牛對過瘤胃蛋白質(zhì)的需要量，滿足奶牛對限制性氨基酸的需要量，提高奶牛的產(chǎn)奶量和乳蛋白率。唐慶鳳等[25]研究發(fā)現(xiàn)，在泌乳水牛飼糧中添加RPLys能夠顯著提高水牛的乳蛋白率。Giallongo等[26]在研究過瘤胃賴氨酸對奶牛生產(chǎn)性能的影響時指出，RPLys可以提高奶牛的產(chǎn)奶量和乳蛋白率。奶牛飼糧中的小腸可消化蛋白質(zhì)(IDCP)是合成乳蛋白的來源[27]，在奶牛飼糧中添加RPLys后可提高IDCP的總量，并改善了IDCP中可消化氨基酸的組成比例，從而提高了奶牛乳蛋白的含量。本試驗(yàn)條件下，飼糧中添加RPLys后顯著提高了奶牛的乳蛋白率，可能是添加RPLys后改善了小腸內(nèi)氨基酸的組成，提高了奶牛對蛋白質(zhì)的利用率，進(jìn)而提高了奶牛的乳蛋白率。本試驗(yàn)中，隨著RPLys添加量的增加，試驗(yàn)牛產(chǎn)奶量和乳蛋白率呈先升高后降低的變化趨勢，其中RPLys添加量為30 g/(d·頭)時提高效果最明顯；乳脂率、乳糖率和乳體細(xì)胞數(shù)的變化趨勢并不明顯。飼喂高劑量的RPLys引起奶牛產(chǎn)奶量和乳蛋白率降低的原因，可能是由于高劑量賴氨酸與其他氨基酸之間產(chǎn)生了拮抗作用，影響了其他氨基酸的消化和吸收[20]，降低了飼糧蛋白質(zhì)的利用率，從而造成了試驗(yàn)牛產(chǎn)奶量和乳蛋白率的降低。

3.3 RPLys添加量對奶牛氮排泄及氮表觀消化率的影響

氮消化代謝反映了飼糧蛋白質(zhì)沉積效率和氨基酸平衡狀況，也與動物的生產(chǎn)性能密切相關(guān)，飼糧中添加RPLys可以提高動物對蛋白質(zhì)的消化吸收，提高蛋白質(zhì)的利用率，降低氮排泄[28]。氨作為飼糧蛋白質(zhì)降解的產(chǎn)物，更是瘤胃微生物生長所需的主要氮源。毛成文[29]研究飼糧賴氨酸水平對獺兔生長性能和氮排泄的影響時指出，賴氨酸能降低血漿中尿素氮的含量，提高機(jī)體對蛋白質(zhì)的消化吸收能力，提高氮沉積率。在本試驗(yàn)條件下，奶牛采食含有RPLys的飼糧后，糞氮、尿氮排出量和氮總排出量均極顯著降低，可消化氮和氮表觀消化率均顯著提高。Socha等[30]研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛飼糧中添加RPLys可以降低尿中尿氮的濃度，提高氮的轉(zhuǎn)化率，提高蛋白質(zhì)的利用率，減少氮排出量。方桂友等[31]在研究賴氨酸對泌乳母豬生產(chǎn)性能和氮排泄的影響中發(fā)現(xiàn)，賴氨酸可以降低母豬尿素氮的濃度，顯著減少糞氮排出量，提高氮表觀消化率。李雪玲等[32]研究RPLys對斷奶羔羊生長指標(biāo)及氮利用率的影響時指出，飼糧中添加RPLys可以提高飼糧蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化效率、氮沉積和氮表觀消化率。Whelan等[33]研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛飼糧中添加賴氨酸可以改善氨基酸平衡，減少尿氮排放，提高氮的利用率。飼糧中添加RPLys可以增加小腸可消化氨基酸總量，減少蛋白質(zhì)在瘤胃內(nèi)轉(zhuǎn)化過程中的損失，進(jìn)一步提高飼糧蛋白質(zhì)的利用率，減少氮的排出量。奶牛瘤胃內(nèi)氮代謝與MCP產(chǎn)量息息相關(guān)，奶牛飼糧中添加RPLys有助于改善瘤胃消化代謝能力，使瘤胃MCP合成的速率大于瘤胃微生物分解蛋白質(zhì)生成NH3-N的速率，提高奶牛瘤胃MCP產(chǎn)量，減少NH3-N的損失，提高氮的利用率，降低氮總排出量。本試驗(yàn)中，隨著RPLys添加量的增加，試驗(yàn)牛氮總排出量呈先降低后升高的變化趨勢，其中RPLys添加量為30 g/(d·頭)時提高效果最明顯。添加高添加量的RPLys造成奶牛氮總排出量升高的原因，可能是因?yàn)橘嚢彼崤c精氨酸之間產(chǎn)生了拮抗作用，賴氨酸與精氨酸的膜轉(zhuǎn)運(yùn)載體相同，當(dāng)賴氨酸添加量較高時，影響了精氨酸的吸收，增加了腎臟中精氨酸的降解，提高了尿中精氨酸和尿素的排出量，增加了尿氮的排出量[27]，從而導(dǎo)致高添加量組[30 g/(d·頭)RPLys組]氮總排出量相對升高。

4 結(jié) 論

飼糧中添加RPLys可以提高奶牛瘤胃MCP產(chǎn)量和產(chǎn)奶性能，降低奶牛氮排泄。綜合考慮以上各個指標(biāo)，在本試驗(yàn)條件下，奶牛飼糧中RPLys的最適添加量為30 g/(d·頭)。