劉 鈺,韓增瑞,高德良,崔蕊蕊,郭雯婷,胡遵紀(jì),莊占興*
(1.山東省農(nóng)藥科學(xué)研究院,山東省化學(xué)農(nóng)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 濟(jì)南 250033; 2.濟(jì)南綠霸農(nóng)藥有限公司,山東 濟(jì)南 251600)
莠去津是以根吸收為主的三嗪類除草劑,也是使用最廣泛的除草劑品種之一,單位使用量大,適用于防除玉米等作物的一年生禾本科雜草和闊葉雜草,但莠去津易產(chǎn)生抗藥性,通常與其它藥劑復(fù)配使用[1]。乙草胺是酰胺類選擇性芽前土壤處理除草劑,適用于防除大豆、花生、玉米等旱作物田一年生禾本科雜草和一些小粒種子的闊葉雜草[2]。異丙甲草胺屬酰胺類除草劑,廣泛應(yīng)用于大豆、玉米、棉花等作物田的除草[3-4]。將三種除草劑按照適當(dāng)比例混配,既擴(kuò)大了殺草譜,又加大了對難治雜草的防治力度?;炫浜筮_(dá)到了使用方便、省時(shí)省工的目的。有關(guān)莠去津、乙草胺、異丙甲草胺復(fù)配制劑分析方法目前尚未見公開報(bào)道。本文采用氣相色譜法,毛細(xì)管柱和 FID 檢測器,建立了同時(shí)測定莠去津、乙草胺、異丙甲草胺含量的分析方法。
Agilent 7820A氣相色譜儀(美國安捷倫,G4350A-210氫火焰檢測器FID,7693A自動進(jìn)樣器);空氣及氫氣發(fā)生器(山東化工研究院);莠去津標(biāo)品(純度:99%,Dr.Ehrenstorfer)乙草胺標(biāo)品(純度:99%,Dr.Ehrenstorfer)異丙甲草胺(純度:99%,Dr.Ehrenstorfer);內(nèi)標(biāo)物:鄰苯二甲酸二正戊酯(純度:99%,Dr.Ehrenstorfer);丙酮(分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);40%莠去津·乙草胺·異丙甲草胺懸乳劑。
色譜柱:Agilent 19091J-413 HP-5 30m×0.320mm×0.25um。
氣體流量:載氣(N2)流量1.5mL/min;空氣300 mL/min;氫氣30 mL/min;分流比20∶1; 尾吹氣(N2)流量30mL/min;進(jìn)樣口溫度:250℃;柱溫:210℃;檢測器溫度:280℃;進(jìn)樣量:1μL。
在上述色譜條件下,各組分保留時(shí)間為:莠去津3.2min,乙草胺4.4min,異丙甲草胺5.5min,內(nèi)標(biāo)物8.3min,典型色譜圖如圖1、圖2。
1.3.1 內(nèi)標(biāo)物的制備
準(zhǔn)確稱取8.5g(精確至0.0002g)的鄰苯二甲酸二正戊酯于1000mL的容量瓶中,丙酮定容,搖勻備用。
1.3.2 標(biāo)樣溶液的制備
準(zhǔn)確稱取乙草胺標(biāo)準(zhǔn)樣品0.023g、莠去津標(biāo)準(zhǔn)樣品0.050g、異丙甲草胺標(biāo)準(zhǔn)樣品0.027g(分別精確至0.0002g)于10mL容量瓶中,加入5mL內(nèi)標(biāo)液,用丙酮定容,搖勻備用。
1.3.3 樣品溶液的制備
準(zhǔn)確稱取樣品0.25g(精確至0.0002g)于10mL容量瓶中,加入5mL內(nèi)標(biāo)液,用丙酮定容,搖勻備用。
1.3.4 測定
在上述測定條件下,待儀器基線穩(wěn)定后,連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液,待相鄰兩針乙草胺(莠去津、異丙甲草胺)于內(nèi)標(biāo)物的峰面積之比相對變化小于1.0%,按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測定。
圖1 標(biāo)樣色譜圖
圖2 樣品色譜圖
1.3.5 計(jì)算
將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中的峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比分別平均,乙草胺(莠去津、異丙甲草胺)質(zhì)量分?jǐn)?shù)X1(%),按式(1)計(jì):
(1)
式中:A1——標(biāo)樣溶液中,乙草胺(莠去津、異丙甲草胺)峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的平均值;
A2——試樣溶液中,乙草胺(莠去津、異丙甲草胺)峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的平均值;
m1——乙草胺(莠去津、異丙甲草胺)標(biāo)樣質(zhì)量,g;
m2——試樣質(zhì)量,g;
P——標(biāo)樣中乙草胺(莠去津、異丙甲草胺)的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%。
分別配置5個(gè)不同濃度的莠去津、乙草胺、異丙甲草胺的標(biāo)準(zhǔn)溶液,其中乙草胺和異丙甲草胺的濃度為0.5、1.0、2.0、4.0、5.0mg/mL,莠去津的濃度為1.0、2.0、4.0、8.0、10.0 mg/mL。在上述色譜操作條件下,測定乙草胺、莠去津、異丙甲草胺及內(nèi)標(biāo)物的峰面積,計(jì)算峰面積的比值。以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo),以峰面積的比值為縱坐標(biāo),建立坐標(biāo)系,進(jìn)行線性分析。乙草胺的線性方程為:y=0.3824x+0.0139相關(guān)系數(shù)R=0.9992 莠去津的線性方程為:y = 0.2421x+0.0567相關(guān)系數(shù)R=0.9994, 異丙甲草胺的線性方程為:y=0.4281x+0.034相關(guān)系數(shù)R=0.9991
按1.3中所述的測定步驟,在相同的色譜條件下,稱取同一樣品,平行測定5次,計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差及變異系數(shù),莠去津的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.09%,變異系數(shù)為0.45%;乙草胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.13%,變異系數(shù)為1.4%;異丙甲草胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.11%,變異系數(shù)為0.96%。相關(guān)數(shù)據(jù)見表2。
表2 精密度試驗(yàn)結(jié)果 %
稱取5份測定精密度的試樣,分別加入一定量的乙草胺、莠去津、異丙甲草胺標(biāo)準(zhǔn)品,按1.3的方法在同一色譜條件下進(jìn)行測定,經(jīng)統(tǒng)計(jì)乙草胺、莠去津、異丙甲草胺的平均回收率分別為:準(zhǔn)確度試驗(yàn)數(shù)據(jù)見表3。
加入量等于加入標(biāo)樣的質(zhì)量乘以標(biāo)樣純度。原有量等于試樣的稱樣量乘以含量。按公式:回收率=(測得量-原有量)/加入量,計(jì)算回收率。
表3 準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果
本分析方法測定莠去津、乙草胺、異丙甲草胺混配制劑的精密度和準(zhǔn)確度較高,線性關(guān)系良好,在同一色譜條件下同時(shí)測定三種有效成分快速、簡便、準(zhǔn)確。