黃 俊，聶 鑫，羅開宏，李貴星

(四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科，四川 成都 610041)

近年來，我國(guó)甲狀腺疾病發(fā)病率逐年增高[1]。甲狀腺相關(guān)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目檢查對(duì)甲狀腺疾病的診斷和和療效評(píng)估非常重要，檢查方法由最初的放免法、酶聯(lián)免疫法更換為準(zhǔn)確度和靈敏度更高的電化學(xué)發(fā)光法。為縮短實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)時(shí)間，實(shí)驗(yàn)室采用抗凝血來快速分離血漿，有研究顯示：肝素鈉會(huì)導(dǎo)致游離甲狀腺素(FT4)和促甲狀腺激素(TSH)測(cè)定結(jié)果較血清檢測(cè)結(jié)果偏高[2]，肝素鋰以及 EDTA-K2對(duì)甲狀腺素(T4)及TSH的測(cè)定有影響[3，4]。甲狀腺自身抗體是指由于自身免疫紊亂產(chǎn)生的針對(duì)甲狀腺某些成分的免疫球蛋白，主要包括促甲狀腺激素受體抗體(TRAb)、抗甲狀腺球蛋白抗體(A-TG)和抗過氧化物酶抗體(A-TPO)，對(duì) Graves 病和橋本氏甲狀腺炎等甲狀腺疾病的鑒別診斷與療效評(píng)估非常重要。目前尚未有研究探討抗凝劑對(duì)甲狀腺自身抗體的檢測(cè)影響。作者采用羅氏Cobas e601 型電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑，比較分析肝素鋰抗凝血漿和無添加劑血清樣本甲狀腺全套功能指標(biāo)的差異，探究肝素鋰抗凝血漿對(duì)甲狀腺指標(biāo)的影響，指導(dǎo)臨床采血管的正確使用。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇 2017 年 8-9 月在華西醫(yī)院就診的疑似甲狀腺疾病的門診患者 60 例，其中男 23 例，女 37 例；年齡 10～73 歲，中位年齡 43 歲。同時(shí)采用肝素鋰抗凝的綠頭管和無添加劑的紅頭管各采血 3 ml，所得血液樣本均在室溫放置 30 分鐘待紅頭管血清析出后采用 3500 轉(zhuǎn)/分離心 5 分鐘分別收集綠頭管血漿或紅頭管血清。

1.2儀器及試劑及檢測(cè)方法FT3、FT4、T3、T4、TSH、A-TG、A-TPO、TRAb和甲狀腺球蛋白(TG)濃度檢測(cè)均采用羅氏 Cobas e601 電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑和校準(zhǔn)品進(jìn)行。所有檢測(cè)均嚴(yán)格按照儀器操作和試劑說明書等相關(guān) SOP 文件進(jìn)行，本實(shí)驗(yàn)室通過美國(guó)病理學(xué)家協(xié)會(huì)(CAP)認(rèn)可，保證結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用 SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。所有指標(biāo)采用中位數(shù)(四分位數(shù)間距)表示。兩種標(biāo)本處理方式之間的數(shù)據(jù)比較采用秩和檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺激素檢測(cè)水平比較綠頭管血漿與紅頭管血清中FT3、FT4、T3、T4和TSH檢測(cè)結(jié)果如表 1 所示，兩組各指標(biāo)檢測(cè)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)。

表1 綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺激素檢測(cè)水平

2.2綠頭管血漿與紅頭管血清中TG水平比較綠頭管血漿和紅頭管血清中TG檢測(cè)水平分別為 8.24 μg/L[(1.61～18.52)μg/L]和 7.74 μg/L[(1.02～18.31)μg/L]，兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-0.079，P= 0.937)。見圖 1。

圖1 綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺球蛋白檢測(cè)水平

2.3綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺自身抗體水平比較綠頭管血漿和紅頭管血清中A-TPO檢測(cè)水平分別為 14.58 IU/ml[(10.85～98.11)IV/ml]和 11.44 IU/ml[(8.01～86.82)IU/ml]，兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-1.474，P= 0.141)(見圖 2)。綠頭管血清中A-TG和TRAb檢測(cè)水平為 35.00 IU/ml[(22.37～284.70)IU/ml]和 3.55 IU/ml[(3.30～4.08)IU/ml]，明顯高于紅頭管血清中 15.3 IU/ml[(10.00～238.22)IU/ml]和 0.68 IU/ml[(0.41～1.00)IU/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.072 和-7.147，P= 0.002和 0.000)(見圖 3)。

3 討論

近年來，甲狀腺相關(guān)疾病的發(fā)病率逐年增高，甲狀腺激素及相關(guān)項(xiàng)目檢查對(duì)甲狀腺疾病的診斷、鑒別診斷及療效評(píng)估非常重要。在臨床工作中，為縮短標(biāo)本處理時(shí)間及臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果回報(bào)時(shí)間(Turn Around Time，TAT)，臨床常采用抗凝血來快速分離血漿。為提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性，明確抗凝血是否會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響尤為重要。不同的文獻(xiàn)報(bào)道不一，并且缺乏抗凝血對(duì)甲狀腺自身抗體檢測(cè)影響的相關(guān)研究。

圖2 綠頭管血漿與紅頭管血清中抗過氧化物酶抗體檢測(cè)水平

圖3 綠頭管血漿與紅頭管血清中抗甲狀腺球蛋白抗體和促甲狀腺激素受體抗體檢測(cè)水平

本研究的結(jié)果顯示：采用肝素鋰抗凝血漿標(biāo)本和無添加血清標(biāo)本檢測(cè) FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO 時(shí)，結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明當(dāng)患者檢測(cè)FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO 時(shí)，可采用肝素鋰抗凝血體進(jìn)行分析。

TRAb 是針對(duì)促甲狀腺素受體(TSHR)的自身抗體，與 Graves 病(GD)和自身免疫性甲狀腺功能減退癥的發(fā)病密切相關(guān)。目前，TRAb 的檢測(cè)主要應(yīng)用于 GD 的診斷以及治療方案的選擇，連續(xù)監(jiān)測(cè)TRAb 還可以反映抗甲狀腺藥物的療效以及預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)，因此，TRAb 檢測(cè)結(jié)果可影響臨床醫(yī)生對(duì)患者的診斷、治療和預(yù)后判斷。A-TG 是自身免疫性甲狀腺疾病病人血清中的一種常見自身抗體，臨床上常應(yīng)用于橋本氏甲狀腺炎等自身免疫性甲狀腺疾病的篩選診斷，也是A-TG陽性甲亢患者 I131治療后發(fā)生甲減的主要預(yù)測(cè)因子[5]，本研究結(jié)果顯示：采用肝素鋰抗凝血 TRAb和A-TG檢測(cè)結(jié)果明顯高于血清樣本，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)。我們認(rèn)為：當(dāng)患者檢查甲功有 TRAb和A-TG項(xiàng)目時(shí)，不能采用肝素鋰抗凝血漿樣本代替血清樣本，應(yīng)該使用無添加劑的紅頭管。

綜上所述，對(duì)于 FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO，必要時(shí)可采用肝素鋰抗凝血漿樣本縮短標(biāo)本處理時(shí)間以提高檢測(cè)時(shí)效性，測(cè)定 TRAb 以及 A-TG 時(shí)只能采用血清樣本以保證準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。然而，肝素鋰影響 TRAb 及 A-TG 檢測(cè)結(jié)果的機(jī)制尚不清楚，還需進(jìn)一步研究。