張萌萌 曹立東 王仁卿 孫瑞蓮

（1. 山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，青島 266237；2. 山東大學(xué)環(huán)境研究院，青島 266237）

近年來，植物內(nèi)生細(xì)菌在土壤重金屬修復(fù)領(lǐng)域的研究受到廣泛關(guān)注，尤其是內(nèi)生細(xì)菌和植物相互作用方面。植物內(nèi)生細(xì)菌作為植物微生態(tài)系統(tǒng)中的天然組成成分，展現(xiàn)出高代謝能力和代謝活性特異性，對加強植物對環(huán)境的適應(yīng)性，改善植物生長，提高植物的逆境耐受性和環(huán)境可持續(xù)性具有重要意義。內(nèi)生細(xì)菌具有溶磷、產(chǎn)生植物激素、合成鐵載體、誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性等功能，能提高植物修復(fù)重金屬污染土壤的效果。內(nèi)生細(xì)菌聯(lián)合植物修復(fù)策略包括內(nèi)生細(xì)菌如何加強植物對重金屬的抗性、促進植物生長以及植物對重金屬的富集等方面，具有重要的理論和實際研究意義。目前，有關(guān)內(nèi)生細(xì)菌聯(lián)合植物修復(fù)重金屬污染土壤方面已有一些研究，本文對近幾年來國內(nèi)外內(nèi)生細(xì)菌協(xié)同植物修復(fù)重金屬污染土壤的作用機理進行了總結(jié)，以期推動內(nèi)生細(xì)菌在重金屬污染土壤修復(fù)中的應(yīng)用。

1 植物內(nèi)生細(xì)菌強化植物修復(fù)重金屬污染土壤的機制研究

全面了解耐重金屬內(nèi)生細(xì)菌的特性，是提高重金屬污染土壤植物修復(fù)效率的重要因素［1］。了解內(nèi)生細(xì)菌的特性，通常進行革蘭氏染色、氫氧化鉀（KOH）試驗、吲哚試驗、甲基紅試驗、氧化酶試驗、檸檬酸鹽試驗、淀粉水解試驗、蛋白酶生產(chǎn)試驗、明膠液化試驗和嗜鐵細(xì)胞生產(chǎn)等試驗。內(nèi)生細(xì)菌作為植株整個微生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分，具有強化植物修復(fù)重金屬污染土壤的功能（表1），主要表現(xiàn)在以下幾個方面：（1）通過產(chǎn)生植物生長調(diào)節(jié)激素、產(chǎn)生1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸（1-Aminocyclopropanecarboxylic acid，ACC）脫氨酶等，促進宿主植物種子萌芽、分蘗成長、幼苗存活和生物量累積等，進一步促使植物吸收和累積重金屬；（2）通過改變重金屬的生物有效性/毒性，增強植物向地上部轉(zhuǎn)運重金屬的能力，或者某些具有生物吸附/富集能力的內(nèi)生細(xì)菌，降低重金屬的生物有效性，使植物免受重金屬毒害；（3）通過與植物形成聯(lián)合修復(fù)體，提高植物抗重金屬毒性的能力。

1.1 植物內(nèi)生細(xì)菌的促生作用

植物激素有助于植物組織的生長和分化，調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育，過多或過少都會導(dǎo)致植物生長發(fā)育異常。植物內(nèi)生細(xì)菌通過自身合成或者促進植物合成生長素吲哚乙酸（Indole-3-acetic acid，IAA）、赤霉素（Gibberellin，GA）和細(xì)胞分裂素（Cytokinin，CTKs）等植物激素，促進植物體的生長發(fā)育，其中IAA是最活躍的成分［10］。接種熒光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens）的植物對鉛具有抗性，其原因在于熒光假單胞菌產(chǎn)生吲哚乙酸并作用于植物體［11］。王璐等［12］從Cu耐性富集植物蘇丹草根中分離得到了根瘤菌屬K1-6和腸桿菌屬K3-9，均具有產(chǎn)生IAA的能力，產(chǎn)量為21.8-54.9 mg/L，在添加Cu2+的條件下，接種菌株K1-6處理的蘇丹草根部和地上部干重分別比對照增加27%和13%，接種菌株K3-9處理的蘇丹草根部和地上部干重分別比對照增加41%和37%。關(guān)于內(nèi)生細(xì)菌產(chǎn)生GA的研究很少，更多的產(chǎn)生GA的內(nèi)生菌屬于內(nèi)生真菌，它們與植物的生長關(guān)系密切，能減輕環(huán)境脅迫［13］。

重金屬脅迫會誘導(dǎo)植物產(chǎn)生大量乙烯，導(dǎo)致根的生長及根毛的形成受到抑制，阻礙植物生長，甚至導(dǎo)致植物死亡。許多內(nèi)生細(xì)菌能分泌ACC脫氨酶，該酶是一種將ACC（乙烯的前體）水解成α-酮丁酸和氨的酶，能有效降低金屬脅迫條件下植物乙烯合成量，從而減少過量乙烯對植物生長造成的不利影響，打破乙烯的抑制作用，提高植物抗逆性，此外，氨還可作為氮源，被植物吸收利用［14］。ACC脫氨酶是內(nèi)生細(xì)菌操控宿主植物的重要手段，Sun等［15］發(fā)現(xiàn)，從超富集植物油菜體內(nèi)分離得到的ACC脫氨酶活性較高的Cu耐受型內(nèi)生細(xì)菌巨大芽孢桿菌JL35和鞘氨醇單胞菌YM22，能顯著提高植物的生物量和Cu吸收量。Zhang等［16］報道，在Pb存在的情況下，接種具有較高ACC脫氨酶活性的不動桿菌Q2BJ2和芽孢桿菌Q2BG1，增加了油菜地上部分（15%）和根部（23%）的干重。

內(nèi)生細(xì)菌是植物病害生物防治的天然資源菌，在植物體內(nèi)有穩(wěn)定的生存空間，并且能產(chǎn)生與宿主植物代謝相同或相似的生理活性物質(zhì)，能夠有效地提高植物的抗病性。幾丁質(zhì)酶能促進真菌細(xì)胞壁幾丁質(zhì)的水解，抑制真菌的生長增殖，提高植物抗真菌能力，從而促進植物生長［17］。內(nèi)生細(xì)菌Serratia marcescensMOSEL-w2和Paenibacillussp. MOSEL-w13能分泌幾丁質(zhì)酶，具有抗病原真菌能力，其中，類芽孢桿菌屬MOSEL-w13顯示出較大的抗真菌活性，能夠阻礙超富集植物歐洲油菜（Brassica napus）和大麻（Cannabis sativa）病原真菌黑曲霉和尖孢鐮刀菌的生長［18］。植物內(nèi)生細(xì)菌通過合成胞外酶如幾丁質(zhì)酶，降解植物病原真菌的細(xì)胞壁，抑制植物病害，有效促進了植物生長發(fā)育。

表1 金屬脅迫下內(nèi)生細(xì)菌的特性及對植物修復(fù)重金屬污染土壤的影響

有些內(nèi)生細(xì)菌同時具備多種促生功能，可以在植物不同生長階段或者不同生長狀態(tài)下，促進植物的生長發(fā)育，調(diào)控植物的生理過程。Zhang等［5］從超富集植物美洲商陸（Phytolacca Americana）的根、莖和葉中分離出了耐銅內(nèi)生細(xì)菌，其中，Ralstoniasp. J1-22-2、Pantoea agglomeransJp3-3 和Pseudomonas thivervalensisY1-3-9具有多種植物生長促進特征，表現(xiàn)較高的ACC脫氨酶活性，能產(chǎn)生鐵載體和吲哚乙酸，并可以溶解無機磷酸鹽，其接種顯著促進歐洲油菜（Brassica napus）生長。耐鎘內(nèi)生細(xì)菌Rahnellasp. JN27分離自玉米（Zea mays）組織，能分泌吲哚乙酸和鐵載體，具有ACC脫氨酶活性和溶磷能力，其接種使千穗谷（Amaranthus hypochondriacus）、 莧 菜（Amaranthus mangostanus）、龍葵（Solanum nigrum）和玉米地上和地下部分的生物量都有顯著增加［3］。

1.2 內(nèi)生細(xì)菌改變重金屬的生物有效性/毒性

許多內(nèi)生細(xì)菌具有分泌鐵載體、有機酸等物質(zhì)的能力，這些物質(zhì)可以與重金屬形成絡(luò)合物，或者活化土壤中的重金屬，從而改變重金屬的生物有效性，減輕重金屬對植物體的毒害作用。鐵載體是一種對Fe3+具有超強絡(luò)合力的低分子量有機化合物，不僅能夠與鐵結(jié)合，還可以與Al、Zn、Cu、Pb和Cd等金屬形成穩(wěn)定的復(fù)合物，改變重金屬的生物有效性［19］。在內(nèi)生細(xì)菌產(chǎn)生的鐵載體作用下，許多植物會消耗土壤中的微量可利用鐵，獲得生長所需的鐵元素［20］。內(nèi)生細(xì)菌能產(chǎn)生有機酸，造成環(huán)境酸化，使土壤中的重金屬得到活化，在一定程度上，提高了土壤重金屬的生物有效性。鄧平香等［21］研究表明，熒光假單胞菌R1在生長代謝過程中，能分泌蘋果酸、琥珀酸、乙酸、檸檬酸、草酸等有機酸，導(dǎo)致ZnO和CdO溶解，提高了重金屬的生物有效性，在一定程度上促進東南景天的生長，增加其對Zn和Cd吸收。從Cd超富集植物龍葵中分離得到的Pseudomonassp. Lk9，能分泌較多的乙酸和檸檬酸等有機酸，促使土壤中有效Cd、Zn和Cu的釋放，其接種顯著提高了Cd的生物富集因子（28.9%）和其他金屬的植物提取率（Cd、Zn和Cu分別為17.4%、48.6%和104.6%），其中，土壤重金屬水溶性組分的增加主要歸因于酸萃取組分的流動性［4］。

某些內(nèi)生細(xì)菌具有生物吸附/富集能力，能通過釋放螯合劑等方式，降低重金屬的生物有效性，使植物免受重金屬的毒害。從球葵屬植物Sphaeralcea angustifolia和牧豆樹（Prosopis laevigata）根中分離出內(nèi)生細(xì)菌，約70%的內(nèi)生細(xì)菌可產(chǎn)生用于螯合As5+的化合物，而44%的內(nèi)生細(xì)菌可合成用于螯合 As3+的化合物［22］。Shin 等［23］研究表明，耐鉛內(nèi)生芽孢桿菌MN3-4能通過細(xì)胞外螯合和細(xì)胞內(nèi)積累鉛，減輕重金屬對赤楊皮的危害。趙?？〉龋?4］報道洋蔥伯克霍爾德菌G3具有良好的鋁離子吸附能力，并且吸附效果主要受吸附時間與pH的影響，受溫度變化的影響較小。在單金屬或多金屬系統(tǒng)中，內(nèi)生細(xì)菌能夠選擇性地吸附結(jié)合重金屬。從龍葵（Solanum nigrum）中分離得到內(nèi)生細(xì)菌沙雷氏菌LRE07，在72 h內(nèi)，對Cd2+和Zn2+的吸附量分別可達(dá)65%和36%，而對Cu、Pb和Cr的吸附較少［25］。

內(nèi)生細(xì)菌通過直接氧化或還原作用，改變重金屬的形態(tài)，降低重金屬的毒性，從而達(dá)到解毒的效果。眾多重金屬在土壤中以多種形態(tài)存在，而不同形態(tài)其毒性也不一樣。例如，砷（As）在土壤和水中的主要形式是無機亞砷酸鹽［As（III）］和砷酸鹽［As（V）］，含氧條件下，As（V）占主導(dǎo)地位；相反，在還原條件下，砷主要以As（III）形式存在，其比As（V）更具流動性和毒性［26-28］。從牧豆樹（Prosopis laevigata）和球葵屬植物Sphaeralcea angustifolia根中分離出的內(nèi)生細(xì)菌，具有As5+還原和As3+氧化的雙重能力，可改變As的存在形態(tài)。其中，在有氧條件下，Micrococcus luteusNE2E1可減少 94% 的 As5+，Pseudomonas zhaodongensisNM2E7可氧化 46% 的 As3+［22］。Wang等［29］從超富集植物蜈蚣草（Pteris vittata）分離得到的內(nèi)生細(xì)菌Serratia marcescensPRE01，具有較高的V、Cr抗性，PRE01在72 h內(nèi)對Cd（II）、Cr（VI）和V（V）的去除率分別為97.6%、21.7%和6.6%，大多數(shù)V（V）和Cr（VI）通過菌株還原成較低的價態(tài)來緩解金屬毒性。

1.3 內(nèi)生細(xì)菌能提高植物重金屬抗性

內(nèi)生細(xì)菌與植物協(xié)同進化，在重金屬脅迫下，內(nèi)生細(xì)菌往往可以耐受多種重金屬污染，在一定程度上，提高了植物的重金屬抗性。大量研究表明，內(nèi)生細(xì)菌可幫助宿主植物適應(yīng)成長環(huán)境，提高植物修復(fù)效率［30-31］。內(nèi)生細(xì)菌能調(diào)節(jié)宿主植物的抗氧化酶活性，植物在受到金屬脅迫后，造成活性氧（Reactive oxygen species，ROS）大量累積，如過氧化氫（H2O2）等，這給植物造成很大危害，包括傷害細(xì)胞膜的完整性、體內(nèi)各種酶的活性、光合作用相關(guān)的細(xì)胞器等［32-34］。植物體內(nèi)的超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、過氧化氫酶（Catalase，CAT）、過氧化物酶（Peroxidase，POD）、抗壞血酸過氧化物酶（Ascorbate peroxidase，APX）、谷胱甘肽還原酶（Glutathione reductase，GR）和谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione peroxidase，GPX）等抗氧化酶能有效減輕對植物的這些危害［35］。接種內(nèi)生細(xì)菌能使宿主植物各種抗氧化酶活性增強，H2O2等降低，提高了植株對有害金屬的耐受性。Wan等［36］研究表明，在 10 μmol/L 和 50 μmol/L Cd 條件下，接種粘質(zhì)沙雷氏菌LRE07的龍葵植物葉片中的SOD、APX和GPX活性顯著高于非接菌組，有效抵御了重金屬引起的氧化脅迫，減輕了重金屬對植物的毒害程度。

1.4 影響內(nèi)生細(xì)菌修復(fù)重金屬污染土壤的因素

內(nèi)生細(xì)菌具有優(yōu)異的適應(yīng)能力和良好的修復(fù)效果，有助于減少植物重金屬毒性效應(yīng)，增加重金屬的吸收和去除速率，許多因素會影響內(nèi)生細(xì)菌在重金屬植物修復(fù)中的作用。首先，重金屬濃度是一個重要因素，在重金屬濃度較低的情況下，內(nèi)生細(xì)菌產(chǎn)生的有利影響更為明顯［11］。

內(nèi)生細(xì)菌的來源影響其在土壤重金屬修復(fù)中的效果。內(nèi)生細(xì)菌在許多植物物種均有發(fā)現(xiàn)。其中，超積累植物在土壤重金屬修復(fù)中具有廣闊的應(yīng)用價值，從超積累植物中分離得到的內(nèi)生細(xì)菌，多具有重金屬抗性的特點。例如，從天藍(lán)遏藍(lán)菜（Noccaea caerulescens）中分離得到的可培養(yǎng)內(nèi)生細(xì)菌，在培養(yǎng)基中表現(xiàn)出對Ni不同程度的耐受性［7］；從東南景天分離得到的內(nèi)生細(xì)菌SphingomonasSaMR12能增加植物體內(nèi)Cd的積累量，并且提高植物吸收Cd的能力［2］；從蜈蚣草中分離得到的內(nèi)生細(xì)菌Serratia marcescensPRE01具有較高的V、Cr和Cd抗性，能改變重金屬形態(tài)，進一步加速內(nèi)生細(xì)菌和植物之間的長期相互作用，促進宿主對金屬的吸收和運輸［30］。從伏毛蓼（Polygonumpubescens）分離出來的Rahnellasp. JN6對重金屬（特別是Cd、Pb和Zn）表現(xiàn)出非常高的耐受性，這可能與伏毛蓼在多種金屬污染土壤中生長有關(guān)［37］。

內(nèi)生細(xì)菌的活性對植物生長和重金屬 吸收也會產(chǎn)生影響。例如，與油菜植物接種死菌相比，當(dāng)接種G10和G16活菌株時，根和地上部干重顯著增加，進一步促進重金屬污染土壤修復(fù)［9］。另外，接種單菌和多菌效果不同，劉莉華等［38］報道，抗性菌株能顯著促進龍葵在鎘污染土壤上的生長，強化龍葵吸收土壤中鎘的能力，不同鎘抗性菌株及菌株組合對龍葵各部位吸收鎘的影響不同，而且，混菌組合效果要明顯優(yōu)于接種單菌。

此外，環(huán)境脅迫也能影響內(nèi)生細(xì)菌在土壤重金屬修復(fù)中的效果。各種生物因素和非生物因素會影響內(nèi)生細(xì)菌的定殖及其在土壤重金屬修復(fù)中的效果，如干旱和土壤微生物等因素。在干旱脅迫條件下，與未接種相比，接種產(chǎn)氮假單胞菌Pseudomonas azotoformansASS1顯著提高了金屬（Cu、Zn和Ni）的積累量、總?cè)コ?、生物富集因子和生物積累系數(shù)，同時也降低了Cu的易位因子，有助于兔足三葉草（Trifolium arvense）在半干旱環(huán)境中繁殖，并提高重金屬污染土壤的修復(fù)過程［39］。鄧平香等［21］在研究產(chǎn)酸內(nèi)生菌熒光假單胞菌R1對東南景天生長和吸收重金屬的影響中發(fā)現(xiàn)，土壤滅菌處理更有利于東南景天的生長，其根系和地上部的生物量顯著增加，而且土壤中可提取態(tài)Zn、Cd含量也顯著增加。

2 超富集植物內(nèi)生細(xì)菌多樣性

植物內(nèi)生細(xì)菌是從表面消毒的植物組織中分離得到或從植物內(nèi)部獲得的，能夠定殖在健康植物的各種組織和器官內(nèi)，并未使植物的表型特征和功能發(fā)生改變的細(xì)菌［40］。第一株內(nèi)生細(xì)菌是Pasteur等［41］于1876年從無菌葡萄果汁中提取出的。內(nèi)生細(xì)菌在植物體內(nèi)廣泛存在，絕大多數(shù)高等植物體內(nèi)都存在著數(shù)量龐大的內(nèi)生細(xì)菌。據(jù)不完全統(tǒng)計，從多種野生植物、農(nóng)作物及經(jīng)濟作物中分離到的內(nèi)生細(xì)菌種類已超過了745種，鑒定為54個屬，其中假單胞菌屬（Pseudomonas）數(shù)量最多，居優(yōu)勢地位，約占42%；其次為芽孢桿菌屬（Bacillus）和黃單胞菌屬（Xanthomonas），其他還有伯克霍爾德氏菌屬（Burkholderia）等［42］。在目前的植物-內(nèi)生細(xì)菌聯(lián)合修復(fù)研究中，植物多采用超富集植物或富集植物，了解超富集植物內(nèi)生細(xì)菌多樣性，對于明晰內(nèi)生細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)組成、發(fā)現(xiàn)功能菌株等具有重要意義。

目前，研究植物內(nèi)生細(xì)菌多樣性的方法主要有培養(yǎng)法和免培養(yǎng)法。相當(dāng)多的內(nèi)生細(xì)菌處于存活但卻不可培養(yǎng)狀態(tài)，培養(yǎng)法難以模擬自然界中內(nèi)生細(xì)菌生長的真實環(huán)境。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，基于16S rRNA基因的指紋圖譜技術(shù)如變性梯度凝膠電泳（Denatured gradient gel electrophoresis，DGGE）、溫度梯度凝膠電泳（Temperature gradient gel electrophoresis，TGGE）、單鏈構(gòu)象多態(tài)性檢測（Single strand conformation polymorphism，SSCP）、核糖體DNA擴增片段限制性內(nèi)切酶分析（Ampli fi ed ribosomal DNA restriction analysis，ARDRA）和末端限制性片段長度多態(tài)性指紋技術(shù)（Terminal-restriction fragment length polymorphism，T-RFLP）等被廣泛用于微生物群落的研究中［43］，克服了傳統(tǒng)培養(yǎng)法的不足，尤其是近年來發(fā)展迅速的高通量測序技術(shù)，為檢測植物內(nèi)生細(xì)菌的多樣性提供了更為有效的手段。Sun等［15］基于16S rDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育分析表明，從耐銅植株海州香薷（Elsholtziasplendens）和鴨趾草（Commelinacommunis）中獲得的耐銅菌株屬于三大系統(tǒng)發(fā)育類群：厚壁菌、放線菌和變形桿菌。鄧平香等［44］利用Illumina Miseq高通量測序技術(shù)，分析了超積累生態(tài)型東南景天莖、葉內(nèi)生細(xì)菌的群落結(jié)構(gòu)，在屬分類水平上，植物葉片和莖的第一優(yōu)勢菌屬分別為聚球藻屬（Synechococcus）和鄰單胞菌屬（Plesiomonas）。

此外，內(nèi)生細(xì)菌的數(shù)量、種類和群落結(jié)構(gòu)受多種因素的影響。目前，已從大量植物體中分離獲得內(nèi)生細(xì)菌［45-48］，不同植物體內(nèi)含有的內(nèi)生細(xì)菌種類和數(shù)量有明顯差異，同一植物體內(nèi)不同器官之間含有的內(nèi)生細(xì)菌種類和數(shù)量也顯著不同。根據(jù)形態(tài)學(xué)特征，從Cd超富集植物龍葵組織中共分離得到30株耐重金屬的可培養(yǎng)內(nèi)生細(xì)菌，內(nèi)生細(xì)菌在根中最多，并且從莖到葉逐漸減少［49］。植物內(nèi)部組織為內(nèi)生細(xì)菌提供了相對獨立的生存環(huán)境，但外在環(huán)境因素會影響內(nèi)生細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)。其中，重金屬脅迫是影響內(nèi)生細(xì)菌數(shù)量、群落結(jié)構(gòu)和活性的重要因素之一［50］。Zhang等［6］發(fā)現(xiàn)，從植株根、莖和葉分離得到的內(nèi)生細(xì)菌具有產(chǎn)IAA的特性，可誘導(dǎo)雜種狼尾草（Pennisetum americanum×P. purpureum）對重金屬解毒并產(chǎn)生抗性，并且錳脅迫會提高產(chǎn)IAA內(nèi)生細(xì)菌的比例。在重金屬脅迫下，從耐重金屬植物體內(nèi)分離到的內(nèi)生細(xì)菌通常具有對重金屬吸收、耐受和解毒的特性。從超富集植物東南景天（Sedum alfredii）中分離得到伯克氏菌屬SaZR4、SaMR10，鞘氨醇單胞菌屬SaMR12和貪噬菌屬SaNR1，其中，伯克氏菌屬SaZR4顯著促進植物對Zn的提取，鞘氨醇單胞菌屬SaMR12和貪噬菌屬SaNR1顯著促進植物對Zn和Cd的提?。?1］。

3 展望

內(nèi)生細(xì)菌作為一種天然資源，是輔助植物修復(fù)重金屬污染土壤的重要工具，具有廣闊的理論研究價值和開發(fā)應(yīng)用前景。內(nèi)生細(xì)菌-植物聯(lián)合修復(fù)重金屬污染土壤的相關(guān)研究已經(jīng)取得了重大進展，隨著研究的深入，有望探討更深層次的機理，并使大規(guī)模的實際應(yīng)用成為可能，但目前的研究還主要局限在植物生理代謝水平上。為了更好地了解內(nèi)生細(xì)菌強化植物修復(fù)重金屬污染土壤的作用機制，推動內(nèi)生細(xì)菌大規(guī)模應(yīng)用于植物修復(fù)重金屬污染土壤，今后的研究重點應(yīng)考慮：（1）內(nèi)生細(xì)菌自身存活原因以及如何耐受重金屬的機制研究；（2）分子生物學(xué)角度研究植物內(nèi)生細(xì)菌的行為動力學(xué)和代謝；（3）在逆境條件下，接種外源內(nèi)生細(xì)菌的生態(tài)學(xué)效應(yīng)研究，包括植物代謝和微生物的群落結(jié)構(gòu)和代謝；（4）內(nèi)生細(xì)菌、植物以及土壤之間的生態(tài)互作效應(yīng)研究。以上這些問題的解決有助于加快內(nèi)生細(xì)菌在重金屬植物修復(fù)中的應(yīng)用，具有重要的理論和實踐意義。