李 密，史俊友*，景年華，趙紅艷

(1.曲靖師范學(xué)院 化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，云南 曲靖 655011；2.曲靖師范學(xué)院 生物資源與食品工程學(xué)院，云南 曲靖 655011)

隨著三七在中醫(yī)藥行業(yè)的廣泛應(yīng)用及其規(guī)范化、規(guī)?；N植的大力開展，人們對三七須根、三七花藥用價值的研究也在逐步增多。研究表明，三七花、三七須根與三七主要有效成分相同，均為皂苷類[1-3]，且含量較高[4]。其中，三七花具有活血化瘀[5]、抗炎[6]、鎮(zhèn)靜[7]、降壓[8]、降脂[9]等功效。據(jù)云南省藥材標(biāo)準(zhǔn)[10]記載，三七須根具有散瘀止血，消腫定痛作用；目前以其提取物制作而成的“三七冠心寧”在治療亞急性心肌梗塞[11]、心絞痛[12]、冠心病、心律失常[13]等癥效果良好。微量元素是中藥歸經(jīng)和藥性物質(zhì)基礎(chǔ)，中草藥的功效與其微量

元素含量有著密切關(guān)系[14-16]。旨在進一步推進三七產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，明確三七花、三七須根在元素組成方面差異，本研究對三七花與須根中Cu、Fe、Mn、Zn、Co等微量元素進行了含量測定。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

Fe、 Co、Mn、Zn、Cu等多元素標(biāo)準(zhǔn)儲備液，購自北京有色金屬研究總院(唯一標(biāo)識號：159406)，原始濃度為100 μg/mL；硝酸、高氯酸、雙氧水均為優(yōu)級純；實驗用水均為二次去離子水。

1.2 主要儀器與設(shè)備

TAS-990火焰型原子吸收分光光度計：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；JK-G-350A3高速萬能粉碎機：上海精學(xué)科學(xué)儀器有限公司； GHG-9035A型電熱鼓風(fēng)干燥箱：上海一恒科學(xué)儀器有限公司；AL204-IC型電子天平：米利托-托利多(上海)有限公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品處理

足量的待測三七花與根須首先用水洗凈，后用超純水清洗3遍，于陰涼通風(fēng)處晾干，在鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)于50℃下烘干，經(jīng)粉碎后過40目篩[16-18]，備用。準(zhǔn)確稱取約1g待測試樣，置于250 mL錐形瓶中，加入HNO3和HClO4混酸(4∶1)20 mL，靜置過夜。于加熱板上加熱消解，將HNO3和HClO4混酸低溫加熱至棕色煙冒盡，升溫后繼續(xù)加熱，當(dāng)有白煙冒出時，后加入5 mL H2O2，加熱至溶液近干為止，若消化液有雜質(zhì)，可加入10 mL 二次蒸餾水繼續(xù)加熱。最后，當(dāng)待處理液冷卻后，用已配置好的0.5%稀硝酸將待測液定容至50 mL容量瓶，即得待測樣品液?？瞻滓喊凑障嗤椒ㄖ苽?。

1.3.2 原子吸收工作條件

本次實驗選擇空氣-乙炔焰，助燃比為4∶1進行測定，經(jīng)反復(fù)嘗試，對各元素進行測定時的優(yōu)化條件如表1。

表1 五種元素的測定參數(shù)Table 1 The working parameters for five elements with FAAS

表1(續(xù))

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制及樣品的測定

移取元素的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液10.00 mL于100 mL容量瓶中，用已配好的稀硝酸溶液定容，制成質(zhì)量濃度均為 10 μg/mL的元素儲備液，后取不同體積的元素標(biāo)準(zhǔn)儲備液于50 mL的容量瓶中，以超純水定容，配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，各元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列結(jié)果見表2。在1.3.2實驗條件下，測定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，依據(jù)A-C關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)。相同實驗條件下，對1.3.1中制備的樣品液直接進樣進行8種元素的測定，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算相應(yīng)含量。

表2 五種元素標(biāo)準(zhǔn)系列設(shè)置Table 2 The standard series for five elements (μg/mL)

1.3.4 加標(biāo)回收實驗

平行稱取三七花、三七須根樣品各18份，每份1g，將其中3份按照1.3.1項方法進行樣品處理，向另外15份中分別加入與樣品含量相近的5種待測元素標(biāo)準(zhǔn)液，每個元素平行3份，進行消化后制得加標(biāo)待測液，后在1.3.2條件下進行加標(biāo)回收實驗?；厥章式Y(jié)果試驗見表4。

2 結(jié)果與分析

2.1 各元素標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

表3 各元素標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程及相關(guān)系數(shù)Table 3 Standard curve regression equation and correlation coefficient of each element

以Cu、Fe、Mn、Zn、Co等五種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。從表3 可見，五種元素標(biāo)準(zhǔn)工作曲線線性關(guān)系良好，線性相關(guān)系數(shù)均在0.99以上，表明所得線性回歸方程穩(wěn)定可靠。

2.2 樣品中五種元素的含量測定

由表 4可知，三七花和三七須根中微量元素含量豐富，其中三七須根中五種微量元素含量為：Cu：11.92 μg/g，Mn：52.38 μg/g，F(xiàn)e：200.36 μg/ g，Zn：17.39 μg/g，Co：3.06 μg/g。三七花中幾種微量元素含量為：Cu：14.29 μg/g，Mn：124.01 μg/g，F(xiàn)e：158.62 μg/g，Zn：18.14 μg/g，Ca：285.71 μg/g， Mg：273.60 μg/g，Co：4.40 μg/g。對上述數(shù)據(jù)分析可得，五種微量元素的含量在三七花和三七須根中相對次序相同，均為Fe > Mn >Zn > Cu > Co，但二者也存在一定差異：三七花中Cu、Mn、Zn、Co四種元素含量高于三七須根，而三七須根中Fe含量高于三七須根。另外，二者中Mn、Fe含量差異較大，其余三種較接近。

本實驗通過多次平行試驗對加標(biāo)回收率進行了測定，結(jié)果顯示兩個樣品五種微量元素的回收率都較高，在97.2%～104.4%之間，說明所采用的測定方法是合適、可靠。

表4 兩種樣品元素含量及加樣回收率Table 4 The element content and sample recovery rate of two samples

注：a 每種元素對應(yīng)第一行數(shù)值為三七須根元素含量情況；b 每種元素對應(yīng)第二行為數(shù)值三七花元素含量情況。

3 結(jié)論

本實驗以三七花和三七須根為研究對象，首先采用濃硝酸+高氯酸(4∶1)混酸溶液對其進行消化，后運用火焰原子吸收法對其Cu、Mn、Fe、Zn、Co等五種微量元素含量進行了測定，該方法簡單、快速、穩(wěn)定性好，可靠性高。五種微量元素的加樣回收率在97.2%～104.4%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在在4.8%～0.5%之間，這說明該方法在準(zhǔn)確度和精密度方面都達到分析要求。五種微量元素的含量在三七花和三七須根中相對次序相同，相對次序為Fe > Mn >Zn > Cu > Co，其中兩個樣品鐵含量均大于100 μg/g，其活血化瘀等功效可能與之有關(guān)[19]。另外，在三七花和須根樣品中銅元素含量均低于20 μg/g，符合2015版《中國藥典》[20]相關(guān)要求?？傮w而言，三七花和三七須根中五種微量元素含量豐富，從微量元素功能的角度出發(fā)，二者具有很高的營養(yǎng)保健價值，具備較好的開發(fā)利用價值。