黃娟蘆，蘆映紅，楊琰，武貝，萬麗君，石祖亮，張璟璇（.湖北省婦幼保健院，武漢430070；.湖北醫(yī)藥學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，十堰44000）

地中海貧血（簡稱地貧）是一種常染色體隱性遺傳性疾病，又稱海洋性貧血或珠蛋白生成障礙性貧血，是小細胞低色素性貧血常見病因之一。在兒童期，地貧特別是輕型地貧容易與營養(yǎng)性缺鐵性貧血（IDA）相混淆[1?3]。本研究分析了地貧患兒紅細胞相關(guān)參數(shù)，包括紅細胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白（Hb）、平均紅細胞體積（MCV）、平均紅細胞Hb含量（MCH）、平均紅細胞Hb濃度（MCHC）及紅細胞體積分布寬度（RDW）變異系數(shù)（CV），并與IDA患兒及正常兒童紅細胞相關(guān)參數(shù)比較，旨在為簡便、快速鑒別地貧及IDA提供有效方法。

1 資料和方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 選取2017年1—12月本院血液科經(jīng)基因檢測結(jié)合鐵代謝指標確診為單純地貧患兒47例（地貧組），同時隨機選取輕度IDA患兒58例（輕度IDA組），中度IDA患兒45例（中度IDA組），以及血常規(guī)正常的健康兒童50例（對照組）。4組男女性別比及平均年齡分別為 25∶22、31∶27、28∶17、27∶23 及（20.8±11.7）、（17.8±14.7）、（18.4±10.0）、（18.5±9.6）個月。4 組性別比及年齡比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.1.2 納入及排除標準 納入標準：（1）所有貧血患兒均系小細胞低色素貧血；（2）地貧患兒系地中?；驒z測陽性；（3）IDA患兒參照文獻[4]診斷標準確診。排除標準：（1）地貧基因檢測陽性伴鐵代謝指標異常者；（3）地中海基因篩查陽性，但月齡小于3個月（早產(chǎn)兒補足月齡不足3個月）；（3）地中?；驒z測陰性，但鐵代謝指標無異常者。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 采集靜脈血，將標本分成2份，1份用于鐵代謝檢測，1份送華大基因公司行地中?；驒z測。采用日本Sysmex 800i全自動血細胞分析儀及試劑進行血常規(guī)測定。

1.2.2 地貧基因分析 地中海貧血基因檢測（α+β）301型篩查采用跨越斷裂點聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)及高通量測序技術(shù)進行檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS10.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料以表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 地貧患兒基因檢測結(jié)果 地貧組中α?地貧18例，占 38.3%，其中標準型 α?地貧（??SEA/aa）13 例，右側(cè)缺失型 α?地貧（?a3.7/aa）2 例，左側(cè)缺失型 α?地貧（?a4.7/aa）1 例，中間型 α?地貧（??SEA/?a3.7）1 例和 Hb Constant Spring（HbCS）1 例，分別占 72.2%、11.1%、5.6%、5.6%和5.6%。地貧組中β?地貧29例，占61.7%，其中IVS?Ⅱ?654（C?T）beta+14 例，Codons 41/42（?ttct）beta05例，Codons 17（a?t）beta05 例，Codons 43（g?t）beta02 例，28A〉G beta+1 例，HbJ?Bangkok 1 例，IVS?Ⅰ?129（A＞T）（HBB：c.93?2 A＞T）1例，分別占 48.3%、17.2%、17.2%、6.9%、6.9% 和 6.9%。見表 1、表 2。

表1 α-地貧缺失或突變基因型分布

表2 β-地貧突變基因型分布

2.2 4組紅細胞參數(shù)比較 地貧組RBC高于輕度、中度IDA組及對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。地貧組MCV值小于輕度、中度IDA組及對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。地中貧組MCH值小于輕度IDA組及對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但與中度IDA組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。地貧組MCHC值小于中度IDA組及對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但與輕度IDA組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。地貧組RDW?CV值大于輕度IDA組小于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但與中度IDA組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表3

表3 4組紅細胞參數(shù)比較（±s）

表3 4組紅細胞參數(shù)比較（±s）

組別n地貧組輕度IDA組中度IDA組對照組4758 4550 Hb（g/L）98.2±8.2100.3±6.074.3±9.1111.5±5.2 RBC（×1012）5.4±0.44.4±0.54.5±0.44.6±1.2 MCV（fL）58.0±5.574.4±8.663.1±4.389.1±6.2 MCH（pg）18.4±1.523.3±3.017.8±1.930.1±1.7 MCHC（g/L）317.5±12.6314.3±11.3282.0±14.5338.0±13.2 RDW-CV（%）19.2±4.116.1±2.820.3±4.212.9±2.6

3 討 論

地貧和IDA是臨床上最常見的小細胞低色素性貧血，前者是由于人類α和（或）β珠蛋白基因缺陷，導(dǎo)致α和（或）β珠蛋白合成減少甚至缺失，引起珠蛋白合成障礙性貧血；后者是因為體內(nèi)鐵缺乏，導(dǎo)致Hb合成減少，引起貧血。由于二者的發(fā)病機制不同，治療方案也截然不同。二者的鑒別尤為重要[5?6]，尤其是輕型地貧，臨床表現(xiàn)及血常規(guī)表現(xiàn)與IDA十分相似，既往的細胞形態(tài)分析、血細胞計數(shù)、蛋白電泳等聯(lián)合鑒別診斷方法耗時且低效，基因檢測雖精準，但費用昂貴[7]。尋求一種簡單有效的方法對這兩類貧血進行初步鑒別，不僅有利于提高輕型地貧的檢測率，防止誤診誤治，還可以大大節(jié)約醫(yī)療成本和時間。

本研究中，47例地貧均為雜合子，未發(fā)現(xiàn)純合子，說明輕型地貧系湖北地區(qū)兒童地貧的主要表現(xiàn)，因而基因診斷對于臨床癥狀較輕而極易漏診的兒童尤為重要，與唐燕青等[8]的觀點一致。β?地貧基因突變至少有186種[9]，中國人常見的基因突變依次為CD41?42、CD17（A?T）、IVS?Ⅱ?654（C?T）、?28、CD71/72 等[10]。本研究結(jié)果顯示，湖北地區(qū)兒童地貧以β?地貧為主，IVS?Ⅱ?654（C?T）突變是本地區(qū) β?地貧主要突變類型，與肖晗等[11]研究一致。唐青燕等[8]研究指出，百色市兒童β?地貧以 CD17（A?T）為主；而闕婷等[12]研究指出，南寧地區(qū)兒童以CD41?42為主。這些結(jié)論與本研究結(jié)果不一致，表明地貧有區(qū)域差異，具有高度的異質(zhì)性。因此，在各地區(qū)廣泛開展地貧篩查，建立本地區(qū)基因突變數(shù)據(jù)庫對該地區(qū)地貧患兒的診治尤為重要。

近年來，關(guān)于紅細胞參數(shù)在地貧與IDA鑒別診斷中的意義已有較多報道。歐燕蘭等[13]認為，地貧患者MCV值顯著低于IDA患者，其是鑒別二者的較好指標。馮建庭[14]比較了地貧患者、IDA患者及健康人的相關(guān)紅細胞參數(shù)，認為RDW鑒別地貧和IDA的準確率較高。上述研究對象均為成人，且未進行分層研究。本研究中，地貧患兒均系輕型或靜止型單純地貧，故隨機選取了輕度、中度IDA患兒及健康兒童與其對照，以便更好地進行統(tǒng)計分析。本研究結(jié)果顯示，4組RBC均在正常范圍，且地貧組RBC值高于其余3組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），考慮與慢性溶血至骨髓代償增生有關(guān)。地貧組MCV值顯著小于其余3組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），這與歐燕蘭等[13]的結(jié)論一致。地貧組RDW?CV值大于輕度IDA組及對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但與中度IDA組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），這與馮建庭[14]的研究結(jié)論不完全一致，考慮與對IDA患兒進行了分層研究有關(guān)，也可能與不同地區(qū)地貧患者的臨床差異有關(guān)。地貧組MCH值低于輕度IDA組及對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但與中度IDA組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。地貧組MCHC值低于對照組，高于中度IDA組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但與輕度IDA組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。王英等[15]研究認為，地貧患兒MCV、MCH、RDW、MCHC與IDA組、對照組均有顯著差異，與本研究結(jié)果不完全一致，考慮與本研究排除了地貧合并缺鐵性貧血患兒，且王英等[15]研究未按Hb分層有關(guān)。

綜上所述，RBC和MCV可視為兒童地貧與IDA鑒別診斷的良好指標，在兒童小細胞低色素性貧血中，當RBC較高而MCV較?。ㄐ∮?0 fL）時要高度警惕地貧的可能，此時行地貧基因檢測，既可提高本地區(qū)地貧患兒的檢出率，避免誤診誤治，還可降低醫(yī)療成本。